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스타필러코커스 해모라이티쿠스 (Staphylococcus haemolyticus) 유래의 L62 리파아제를 담체에 흡착시켜 담체에 고정하는 단계; 및 상기 담체에 고정된 L62 리파아제에 가교제를 반응시켜, 상기 L62 리파아제를 상호간 가교 결합시키는 단계를 포함하는 L62 리파아제를 고정하는 방법
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제 1항에 있어서, 상기 담체는 아크릴계 합성수지; 셀룰로오스, 아가로스, 젤라틴 및 알부민으로 구성되는 군에서 선택되는 생고분자; 또는 알루미나, 다공성 실리카 및 제올라이트로 구성되는 군에서 선택되는 무기 고분자인 것을 특징으로 하는 L62 리파아제를 고정하는 방법
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제 1항에 있어서, 상기 가교제는 글루타르알데하이드, 덱스트란 폴리알데하이드, 디메틸아디피미데이트 디하이드로클로라이드, 디메틸 수베리미데이트 디하이드로클로라이드, 디숙신이미딜 수버레이트, 숙신이미딜-4(N-말레이미도메틸)-사이클로헥산-1-카르복실레이트, N-숙신이미딜-3-(2-피리딜디티오-프로피오네이트), N-숙신이미딜 (4-요오도아세틸)-아미노벤조에이트, m-말레이미도벤조일-N-하이드록시숙신이미드 에스테르로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 L62 리파아제를 고정하는 방법
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제 1항에 있어서, 상기 L62 리파아제는 서열번호 1의 아미노산 서열로 구성되는 L62 리파아제를 고정하는 방법
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스타필러코커스 해모라이티쿠스 (Staphylococcus haemolyticus) 유래의 L62 리파아제를 담체에 흡착시켜 고정하는 단계; 상기 담체에 고정된 L62 리파아제에 가교제를 반응시켜, 상기 L62 리파아제를 상호간 가교 결합시키는 단계; 및 상기 가교 결합한 상태에서 상기 담체에 고정된 L62 리파아제를 사용하여, 반응 매질 내의 유지 및 알코올의 에스테르 교환 반응시키거나, 또는 반응 매질 내의 지방산 및 알코올 사이의 에스테르 반응시키는 단계를 포함하는 지방산 알킬 에스테르를 제조하는 방법
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제 5항에 있어서, 상기 에스테르 교환 반응 단계는, 상기 유지가 상기 반응 매질 내에 잔류하는 수분에 의한 가수분해에 의하여 상기 유지로부터 글리세롤이 제거된 뒤, 적어도 한 개의 글리세롤이 제거된 유지 또는 지방산이 알코올과 반응하여 지방산-알코올 에스테르로 전환되는 단계와, 상기 지방산-알코올 에스테르를 상기 글리세롤 성분 및 수분으로부터 분리하는 단계를 포함하는 지방산 알킬 에스테르를 제조하는 방법
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제 5항 또는 제 6항에 있어서, 상기 알코올은 탄소수 1~4의 모노 알코올인 것을 특징으로 하는 지방산 에스테르를 제조하는 방법
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제 7항에 있어서, 상기 알코올은 메탄올, 에탄올, 프로판올, n-부탄올, 이소-부탄올, tert-부탄올 및 이들의 조합으로 구성되는 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 지방산 알킬 에스테르를 제조하는 방법
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제 5항 또는 제 6항에 있어서, 상기 유지는 식물성 오일, 동물성 지방 또는 폐유를 포함하는 지방산 알킬 에스테르를 제조하는 방법
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제 9항에 있어서, 상기 식물성 오일은 올리브유이고, 상기 동물성 지방은 어유이며, 상기 폐유는 폐식용유인 것을 특징으로 하는 지방산 알킬 에스테르를 제조하는 방법
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제 5항 또는 제 6항에 있어서, 상기 알코올과 상기 유지는 3:1 내지 10:1의 몰비로 상기 반응 매질에 첨가되는 것을 특징으로 하는 지방산 알킬 에스테르를 제조하는 방법
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제 5항 또는 제 6항에 있어서, 상기 알코올은 상기 반응 매질에 대하여 1 ~ 60%(v/v)의 농도로 첨가되는 것을 특징으로 하는 지방산 알킬 에스테르를 제조하는 방법
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제 5항 또는 제 6항에 있어서, 상기 에스테르 교환 반응 또는 상기 에스테르 반응은 20 ~ 55 ℃의 온도 범위에서 진행되는 것을 특징으로 하는 지방산 알킬 에스테르를 제조하는 방법
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제 5항 또는 제 6항에 있어서, 상기 에스테르 교환 반응 또는 상기 에스테르 반응은 pH 5 ~ 12 범위에서 진행되는 것을 특징으로 하는 지방산 알킬 에스테르를 제조하는 방법
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