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외래 단백질로서 서열식별번호:1의 아미노산 서열로 구성되는 L62 리파아제와, 세포 표면 고정 모체(cell surface anchoring motif)로서 서열식별번호:3의 아미노산 서열로 구성되는 에스터라아제 A의 융합 단백질을 코딩하는 뉴클레오티드를 포함하는 세포 표면 발현 시스템
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제 1항에 있어서, 상기 L62 리파아제는 서열식별번호:2의 염기 서열로 코딩되는 핵산에 의하여 발현되는 세포 표면 발현 시스템
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제 2항에 있어서, 상기 에스터라아제 A는 서열식별번호:4의 염기 서열로 코딩되는 핵산에 의하여 발현되는 것을 특징으로 하는 세포 표면 발현 시스템
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제 1항에 있어서, 상기 세포 표면 발현 시스템은 그람 음성 세균인 숙주 세포의 표면에서 발현되는 것을 특징으로 하는 세포 표면 발현 시스템
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제 4항에 있어서, 상기 숙주 세포는 대장균(E
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제 1항에 있어서, 상기 세포 표면 발현 시스템은 상기 융합 단백질을 세포 표면으로 이동시키며, 세포 외막에서 절단되는 리더 서열을 더욱 포함하는 세포 표면 발현 시스템
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제 6항에 있어서, 상기 리더 서열은 서열식별번호:5의 염기 서열로 구성되는 세포 표면 발현 시스템
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제 7항에 있어서, 상기 세포 표면 발현 시스템은 상기 융합 단백질을 코딩하는 뉴클레오티드에 작동 가능하게 연결된 전사조절 서열, 상기 융합 단백질의 발현 여부를 확인하는 선택 마커 서열, 및 복제개시원점을 더욱 포함하는 세포 표면 발현 시스템
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제 1항에 있어서, 상기 세포 표면 발현 시스템은 재조합 발현 벡터인 것을 특징으로 하는 세포 표면 발현 시스템
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제 9항에 있어서, 상기 재조합 발현 벡터는 플라스미드 재조합 발현 벡터인 것을 특징으로 하는 세포 표면 발현 시스템
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외래 단백질로서 서열식별번호:1의 아미노산 서열로 구성되는 L62 리파아제와, 세포 표면 고정 모체(cell surface anchoring motif)로서 서열식별번호:3의 아미노산 서열로 구성되는 에스터라아제 A의 융합 단백질을 코딩하는 염기 서열로 구성되는 핵산을 포함하는 세포 표면 발현 시스템을 숙주 세포에 주입하는 단계; 상기 숙주 세포를 배양하여 상기 숙주 세포의 표면에서 상기 L62 리파아제를 발현시키는 단계; 및 상기 숙주 세포의 표면에서 발현된 L62 리파아제에, 유지 또는 지방산과, 알코올을 포함하는 반응 매질을 첨가하여, 에스테르 교환 반응 또는 에스테르 반응을 유도하는 단계를 포함하는 지방산 알킬 에스테르를 제조하는 방법
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제 11항에 있어서, 상기 에스테르 교환 반응은, 상기 유지가 상기 반응 매질 내에 잔류하는 수분에 의한 가수분해에 의하여 상기 유지로부터 글리세롤이 제거된 뒤, 적어도 한 개의 글리세롤이 제거된 유지 또는 지방산이 알코올과 반응하여 지방산-알코올 에스테르로 전환되는 단계와, 상기 지방산-알코올 에스테르를 상기 글리세롤 성분 및 수분으로부터 분리하는 단계를 포함하는 지방산 알킬 에스테르를 제조하는 방법
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제 11항 또는 제 12항에 있어서, 상기 알코올은 C1 ~ C4의 모노 알코올인 것을 특징으로 하는 지방산 에스테르를 제조하는 방법
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제 11항 또는 제12항에 있어서, 상기 유지는 식물성 오일, 동물성 지방 또는 폐유를 포함하는 지방산 알킬 에스테르를 제조하는 방법
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제 11항 또는 제12항에 있어서, 상기 알코올과 상기 유지는 1:3 내지 1:10의 몰비로 상기 반응 매질에 첨가되는 것을 특징으로 하는 지방산 알킬 에스테르를 제조하는 방법
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제 11항 또는 제 12항에 있어서, 상기 에스테르 반응 또는 상기 에스테르 교환 반응은 20 ~ 55℃ 범위의 온도 및 pH 7 ~ 12의 범위에서 진행되는 것을 특징으로 하는 지방산 알킬 에스테르를 제조하는 방법
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외래 단백질로서 서열식별번호:1의 아미노산 서열로 구성되는 L62 리파아제와, 세포 표면 고정 모체(cell surface anchoring motif)로서 서열식별번호:3의 아미노산 서열로 구성되는 에스터라아제 A의 융합 단백질을 코딩하는 뉴클레오티드를 포함하는 세포 표면 발현 시스템으로 형질전환된 미생물
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제 17항에 있어서, 상기 미생물은 대장균(E
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외래 단백질로서 서열식별번호:1의 아미노산 서열로 구성되는 L62 리파아제와, 세포 표면 고정 모체(cell surface anchoring motif)로서 서열식별번호:3의 아미노산 서열로 구성되는 에스터라아제 A의 융합 단백질을 코딩하는 뉴클레오티드를 포함하는 세포 표면 발현 시스템을 숙주 세포에 주입하는 단계; 상기 숙주 세포를 배양하여 상기 숙주 세포의 표면에 발현된 L62 리파아제를 수득하는 단계를 포함하는 L62 리파아제의 제조 방법
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제 19항에 있어서, 상기 숙주 세포는 대장균(E
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