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비스페놀 A 노출에 대응하는 바다송사리 유전자 및 이를 이용한 수생태계 환경오염 진단 방법

  • 기술번호 : KST2015196342
  • 담당센터 : 부산기술혁신센터
  • 전화번호 : 051-606-6561
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 비스페놀 A 노출에 대응하는 바다송사리 유전자 및 이를 이용한 수생태계 환경오염 진단 방법에 관한 것으로써, 구체적으로 본 발명에 따른 수생태계 환경오염 진단 방법은 비스페놀 A에 대응하여 발현량이 변화하는 바다송사리의 유전자를 이용하는 것으로써, 비스페놀 A에 노출된 바다송사리에서 하향 또는 상향 조절되는 유전자들을 확인하였으므로, 상기 비스페놀 A에 대응하는 바다송사리의 유전자를 집적한 마이크로어레이 칩, 이를 이용한 진단방법 및 상기 마이크로어레이 칩을 포함하는 키트를 해양 생태계의 스트레스 검출 또는 건강 진단에 유용하게 사용할 수 있다.
Int. CL C12N 15/12 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) C12N 15/11 (2006.01)
CPC C12Q 1/6837(2013.01) C12Q 1/6837(2013.01) C12Q 1/6837(2013.01) C12Q 1/6837(2013.01)
출원번호/일자 1020120020191 (2012.02.28)
출원인 한국해양과학기술원
등록번호/일자 10-1379314-0000 (2014.03.24)
공개번호/일자 10-2013-0098576 (2013.09.05) 문서열기
공고번호/일자 (20140328) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2012.02.28)
심사청구항수 15

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국해양과학기술원 대한민국 부산광역시 영도구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 염승식 대한민국 경남 거제시 중곡로*길 **,
2 우선옥 대한민국 경남 거제시 중곡로*길 **,
3 원효경 대한민국 경남 진주시
4 이애경 대한민국 부산 사상구
5 류재천 대한민국 서울 종로구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이원희 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로 ***, 성지하이츠빌딩*차 ***호 (역삼동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국해양과학기술원 부산광역시 영도구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2012.02.28 수리 (Accepted) 1-1-2012-0162336-97
2 [출원인변경]권리관계변경신고서
[Change of Applicant] Report on Change of Proprietary Status
2012.12.20 수리 (Accepted) 1-1-2012-1061715-20
3 [대리인선임]대리인(대표자)에 관한 신고서
[Appointment of Agent] Report on Agent (Representative)
2013.01.11 수리 (Accepted) 1-1-2013-0029906-15
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2013.08.22 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2013-0580456-31
5 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2013.10.22 수리 (Accepted) 1-1-2013-0953887-08
6 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2013.10.22 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2013-0953888-43
7 등록결정서
Decision to grant
2014.02.25 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2014-0134021-35
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2014.07.11 수리 (Accepted) 4-1-2014-5084020-12
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2017.06.28 수리 (Accepted) 4-1-2017-0034176-95
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2018.01.23 수리 (Accepted) 4-1-2018-5013167-10
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2018.07.10 수리 (Accepted) 4-1-2018-5131202-66
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.02.25 수리 (Accepted) 4-1-2020-5042665-74
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.10.20 수리 (Accepted) 4-1-2020-5235797-63
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
하기 모든 유전자 각각의 핵산 서열의 올리고뉴클레오티드 전부 또는 그의 상보가닥 분자가 집적된, 시료내 비스페놀 A(Bisphenol A, BPA) 노출 여부 검출용 마이크로어레이 칩:서열번호 1로 기재되는 유전자(proline rich 6), 서열번호 2로 기재되는 유전자(telomerase reverse transcriptase gene), 서열번호 3으로 기재되는 유전자(uridine phosphorylase 2), 서열번호 4로 기재되는 유전자(MHC Class Ⅰ Region), 서열번호 5로 기재되는 유전자(vitellogenin Ⅱ), 서열번호 6로 기재되는 유전자(retinoid X receptor beta (RXRB) gene), 서열번호 7로 기재되는 유전자(protein tyrosine phosphatase-like, member b), 서열번호 8로 기재되는 유전자(TRAF-binding protein), 서열번호 9로 기재되는 유전자(HSPC038 protein), 서열번호 10으로 기재되는 유전자(Glycerol-3-phosphate dehydrogenase), 서열번호 11로 기재되는 유전자(proteasome subunit, beta type 8), 서열번호 12로 기재되는 유전자(trypsinogen), 서열번호 13로 기재되는 유전자(carnitine O-acetyltransferase precursor), 서열번호 14로 기재되는 유전자(tubulin, beta 5), 서열번호 15로 기재되는 유전자(muscleblind mRNA), 서열번호 16으로 기재되는 유전자(phosphoenolpyruvate carboxykinase), 서열번호 17로 기재되는 유전자(protein phosphatase 2 regulatory subunit B beta), 서열번호 18로 기재되는 유전자(eukaryotic peptide chain release factor GTP-binding subunit), 서열번호 19로 기재되는 유전자(40S ribosomal protein S18), 서열번호 20으로 기재되는 유전자(trypsinogen), 서열번호 21로 기재되는 유전자(estrogen receptor beta 2), 서열번호 22로 기재되는 유전자(bromodomain containing 2 (RING3) gene), 서열번호 23으로 기재되는 유전자(glutathione S-transferase), 서열번호 24로 기재되는 유전자(cysteine dioxygenase), 서열번호 25로 기재되는 유전자(cyclin G2), 서열번호 26로 기재되는 유전자(protein kinase C and casein kinase substrate in neurons 1), 서열번호 27로 기재되는 유전자(septin 7b (sept7b), transcript variant 1), 서열번호 28로 기재되는 유전자(c-type lysozyme mRNA), 서열번호 29로 기재되는 유전자(Uridine phosphorylase 1), 서열번호 30으로 기재되는 유전자(60S acidic ribosomal protein P1), 서열번호 31로 기재되는 유전자(heart-type fatty acid-binding protein), 서열번호 32로 기재되는 유전자(choriogenin Hminor), 서열번호 33으로 기재되는 유전자(ribosomal protein L13), 서열번호 34로 기재되는 유전자(glucose-regulated protein 94), 서열번호 35로 기재되는 유전자(cathepsin F), 서열번호 36으로 기재되는 유전자(5,10-methylenetetrahydrofolate reductase (NADPH)-like mRNA), 서열번호 37로 기재되는 유전자(mitogen-activated protein kinase 1), 서열번호 38로 기재되는 유전자(Transcription initiation factor IIA gamma chain), 서열번호 39로 기재되는 유전자(ATPase, H+ transporting, lysosomal, V1 subunit E isoform 1), 서열번호 40으로 기재되는 유전자(leukocyte elastase inhibitor), 서열번호 41로 기재되는 유전자(Putative transmembrane 4 superfamily member protein), 서열번호 42로 기재되는 유전자(mitogen-activated protein kinase (p38)), 서열번호 43으로 기재되는 유전자(DEAD-box RNA-dependent helicase p68 mRNA), 서열번호 44로 기재되는 유전자(Transforming growth factor-beta-induced protein ig-h3), 서열번호 45로 기재되는 유전자(40S ribosomal protein S19), 서열번호 46으로 기재되는 유전자(alcohol dehydrogenase Class Ⅵ, ADH8), 서열번호 47로 기재되는 유전자(malate dehydrogenase), 서열번호 48로 기재되는 유전자(carboxyl ester lipase, tandem duplicate 2), 서열번호 49로 기재되는 유전자(alpha-2-macroglobulin), 서열번호 50으로 기재되는 유전자(TBT-binding protein), 서열번호 51로 기재되는 유전자(keratin 15), 서열번호 52로 기재되는 유전자(complement component C9), 서열번호 53으로 기재되는 유전자(alpha-2-macroglobulin-2), 서열번호 54로 기재되는 유전자(kelch-like ECH-associated protein 1b), 서열번호 55로 기재되는 유전자(hepcidin-like precursor), 서열번호 56으로 기재되는 유전자(NADH dehydrogenase subunit 4), 서열번호 57로 기재되는 유전자(cyclin Y-like 1), 서열번호 58로 기재되는 유전자(complement regulatory plasma protein), 서열번호 59로 기재되는 유전자(protein kinase C and casein kinase substrate in neurons 2), 서열번호 60으로 기재되는 유전자(choriogenin L), 서열번호 61로 기재되는 유전자(complement factor B/C2-B), 서열번호 62로 기재되는 유전자(Nedd4 family interacting protein 2), 서열번호 63으로 기재되는 유전자(Restin (Cytoplasmic linker protein-170 alpha-2)), 서열번호 64로 기재되는 유전자(ornithine decarboxylase antizyme large isoform ORF1), 서열번호 65로 기재되는 유전자(catalase), 서열번호 66으로 기재되는 유전자(ring finger protein 141), 서열번호 67로 기재되는 유전자(Cytochrome P450 7B1 (Oxysterol 7-alpha-hydroxylase)), 서열번호 68로 기재되는 유전자(hypoxanthine phosphoribosyltransferase 1), 서열번호 69로 기재되는 유전자(cytochrome P450 CYP2Y3), 서열번호 70으로 기재되는 유전자(chymotrypsinogen 2-like protein), 서열번호 71로 기재되는 유전자(Iron-responsive element-binding protein 1), 서열번호 72로 기재되는 유전자(calreticulin), 서열번호 73으로 기재되는 유전자(delta 6-desaturase), 서열번호 74로 기재되는 유전자(kelch domain containing 10), 서열번호 75로 기재되는 유전자(arginyl-tRNA synthetase), 서열번호 76으로 기재되는 유전자(ATP-binding cassette transporter sub-family G member 2b), 서열번호 77로 기재되는 유전자(adult alpha-type globin), 서열번호 78로 기재되는 유전자(GTP cyclohydrolase 1 precursor), 서열번호 79로 기재되는 유전자(Thyroid hormone receptor-associated protein complex 150 kDa component), 서열번호 80으로 기재되는 유전자(sex hormone-binding globulin), 서열번호 81로 기재되는 유전자(protein phosphatase 2A regulatory subunit B' delta isoform), 서열번호 82로 기재되는 유전자(cyclin B2), 서열번호 83으로 기재되는 유전자(Isocitrate dehydrogenase), 서열번호 84로 기재되는 유전자(ATP citrate lyase (ACLY), transcript variant 2), 서열번호 85로 기재되는 유전자(decorin mRNA), 서열번호 86으로 기재되는 유전자(apolipoprotein A-Ⅳ4), 서열번호 87로 기재되는 유전자(Translation initiation factor eIF-2B subunit epsilon), 서열번호 88로 기재되는 유전자(Ribosomal protein S14, transcript variant 4), 서열번호 89로 기재되는 유전자(Transmembrane protein 85), 서열번호 90으로 기재되는 유전자(heat shock protein 84b), 서열번호 91로 기재되는 유전자(warm-temperature-acclimation-related-65 kDa-protein(C79)), 서열번호 92로 기재되는 유전자(glutathione S transferase Rho-class), 서열 번호 93으로 기재되는 유전자(Arylamine N-acetyl transferase), 서열 번호 94로 기재되는 유전자(Apolipoprotein E1), 서열 번호 95로 기재되는 유전자(Basigin), 서열 번호 96으로 기재되는 유전자(Complement component C8 beta), 서열 번호 97로 기재되는 유전자(C1q-like adipose specific protein), 서열 번호 98로 기재되는 유전자(Calcium binding protein P22), 서열 번호 99로 기재되는 유전자(Ceruloplasmin), 서열 번호 100으로 기재되는 유전자(Chitinase), 서열 번호 101로 기재되는 유전자(Choline kinase), 서열 번호 102로 기재되는 유전자(Delta-6 fatty acyl desaturase), 서열 번호 103으로 기재되는 유전자(Glutaminase), 서열 번호 104로 기재되는 유전자(Hepcidin), 서열 번호 105로 기재되는 유전자(Lipoprotein lipase), 서열 번호 106으로 기재되는 유전자(N-acetyltransferase), 서열 번호 107로 기재되는 유전자(Plasminogen), 서열 번호 108로 기재되는 유전자(Retinol binding protein 4), 서열 번호 109로 기재되는 유전자(Transferrin), 서열 번호 110으로 기재되는 유전자(Vitellogenin 1) 및 서열 번호 111로 기재되는 유전자(Warm temperature acclimation related 65 kDa protein(C243))
2 2
제 1항에 있어서, 상기 유전자는 바다송사리(Oryzias javanicus)로부터 유래되는 것을 특징으로 하는 비스페놀 A 노출 여부 검출용 마이크로어레이 칩
3 3
제 1항에 있어서, 서열번호 1로 기재되는 유전자(proline rich 6), 서열번호 2로 기재되는 유전자(telomerase reverse transcriptase gene), 서열번호 3으로 기재되는 유전자(uridine phosphorylase 2), 서열번호 4로 기재되는 유전자(MHC Class Ⅰ Region), 서열번호 5로 기재되는 유전자(vitellogenin Ⅱ), 서열번호 6로 기재되는 유전자(retinoid X receptor beta (RXRB) gene), 서열번호 7로 기재되는 유전자(protein tyrosine phosphatase-like, member b), 서열번호 8로 기재되는 유전자(TRAF-binding protein), 서열번호 9로 기재되는 유전자(HSPC038 protein), 서열번호 10으로 기재되는 유전자(Glycerol-3-phosphate dehydrogenase), 서열번호 11로 기재되는 유전자(proteasome subunit, beta type 8), 서열번호 12로 기재되는 유전자(trypsinogen), 서열번호 13로 기재되는 유전자(carnitine O-acetyltransferase precursor), 서열번호 14로 기재되는 유전자(tubulin, beta 5), 서열번호 15로 기재되는 유전자(muscleblind mRNA), 서열번호 16로 기재되는 유전자(phosphoenolpyruvate carboxykinase), 서열번호 17로 기재되는 유전자(protein phosphatase 2 regulatory subunit B beta), 서열번호 18로 기재되는 유전자(eukaryotic peptide chain release factor GTP-binding subunit), 서열번호 19로 기재되는 유전자(40S ribosomal protein S18), 서열번호 20으로 기재되는 유전자(trypsinogen), 서열번호 21로 기재되는 유전자(estrogen receptor beta 2), 서열번호 22로 기재되는 유전자(bromodomain containing 2 (RING3) gene), 서열번호 23으로 기재되는 유전자(glutathione S-transferase), 서열번호 24로 기재되는 유전자(cysteine dioxygenase), 서열번호 25으로 기재되는 유전자(cyclin G2), 서열번호 26로 기재되는 유전자(protein kinase C and casein kinase substrate in neurons 1), 서열번호 27로 기재되는 유전자(septin 7b (sept7b), transcript variant 1), 서열번호 28로 기재되는 유전자(c-type lysozyme mRNA), 서열번호 29로 기재되는 유전자(Uridine phosphorylase 1), 서열번호 30으로 기재되는 유전자(60S acidic ribosomal protein P1), 서열번호 31로 기재되는 유전자(heart-type fatty acid-binding protein), 서열번호 32로 기재되는 유전자(choriogenin Hminor), 서열번호 33으로 기재되는 유전자(ribosomal protein L13), 서열번호 34로 기재되는 유전자(glucose-regulated protein 94), 서열번호 35로 기재되는 유전자(cathepsin F),서열번호 36으로 기재되는 유전자(5,10-methylenetetrahydrofolate reductase (NADPH)-like mRNA), 서열번호 37로 기재되는 유전자(mitogen-activated protein kinase 1), 서열번호 38로 기재되는 유전자(Transcription initiation factor ⅡA gamma chain), 서열번호 39로 기재되는 유전자(ATPase, H+ transporting, lysosomal, V1 subunit E isoform 1), 서열번호 40으로 기재되는 유전자(leukocyte elastase inhibitor), 서열번호 41으로 기재되는 유전자(Putative transmembrane 4 superfamily member protein), 서열번호 42로 기재되는 유전자(mitogen-activated protein kinase (p38)) 및 서열번호 43으로 기재되는 유전자(DEAD-box RNA-dependent helicase p68 mRNA)로 구성된 군으로부터 선택되는 유전자는 비스페놀 A 노출에 대응하여 발현이 감소하는 것을 특징으로 하는 비스페놀 A 노출 여부 검출용 마이크로어레이 칩
4 4
제 1항에 있어서, 서열번호 44로 기재되는 유전자(Transforming growth factor-beta-induced protein ig-h3), 서열번호 45로 기재되는 유전자(40S ribosomal protein S19), 서열번호 46으로 기재되는 유전자(alcohol dehydrogenase Class VI, ADH8), 서열번호 47로 기재되는 유전자(malate dehydrogenase), 서열번호 48로 기재되는 유전자(carboxyl ester lipase, tandem duplicate 2), 서열번호 49로 기재되는 유전자(alpha-2-macroglobulin), 서열번호 50으로 기재되는 유전자(TBT-binding protein), 서열번호 51로 기재되는 유전자(keratin 15), 서열번호 52로 기재되는 유전자(complement component C9), 서열번호 53으로 기재되는 유전자(alpha-2-macroglobulin-2), 서열번호 54로 기재되는 유전자(kelch-like ECH-associated protein 1b), 서열번호 55로 기재되는 유전자(hepcidin-like precursor), 서열번호 56으로 기재되는 유전자(NADH dehydrogenase subunit 4), 서열번호 57로 기재되는 유전자(cyclin Y-like 1), 서열번호 58로 기재되는 유전자(complement regulatory plasma protein), 서열번호 59로 기재되는 유전자(protein kinase C and casein kinase substrate in neurons 2), 서열번호 60으로 기재되는 유전자(choriogenin L), 서열번호 61로 기재되는 유전자(complement factor B/C2-B), 서열번호 62로 기재되는 유전자(Nedd4 family interacting protein 2), 서열번호 63으로 기재되는 유전자(Restin (Cytoplasmic linker protein-170 alpha-2)), 서열번호 64로 기재되는 유전자(ornithine decarboxylase antizyme large isoform ORF1), 서열번호 65로 기재되는 유전자(catalase), 서열번호 66으로 기재되는 유전자(ring finger protein 141), 서열번호 67로 기재되는 유전자(Cytochrome P450 7B1 (Oxysterol 7-alpha-hydroxylase)), 서열번호 68로 기재되는 유전자(hypoxanthine phosphoribosyltransferase 1), 서열번호 69로 기재되는 유전자(cytochrome P450 CYP2Y3), 서열번호 70으로 기재되는 유전자(chymotrypsinogen 2-like protein), 서열번호 71로 기재되는 유전자(Iron-responsive element-binding protein 1), 서열번호 72로 기재되는 유전자(calreticulin), 서열번호 73으로 기재되는 유전자(delta 6-desaturase), 서열번호 74로 기재되는 유전자(kelch domain containing 10), 서열번호 75로 기재되는 유전자(arginyl-tRNA synthetase), 서열번호 76으로 기재되는 유전자(ATP-binding cassette transporter sub-family G member 2b), 서열번호 77로 기재되는 유전자(adult alpha-type globin), 서열번호 78로 기재되는 유전자(GTP cyclohydrolase 1 precursor), 서열번호 79로 기재되는 유전자(Thyroid hormone receptor-associated protein complex 150 kDa component), 서열번호 80으로 기재되는 유전자(sex hormone-binding globulin), 서열번호 81로 기재되는 유전자(protein phosphatase 2A regulatory subunit B' delta isoform), 서열번호 82로 기재되는 유전자(cyclin B2), 서열번호 83으로 기재되는 유전자(Isocitrate dehydrogenase), 서열번호 84로 기재되는 유전자(ATP citrate lyase (ACLY), transcript variant 2), 서열번호 85로 기재되는 유전자(decorin mRNA), 서열번호 86으로 기재되는 유전자(apolipoprotein A-IV4), 서열번호 87로 기재되는 유전자(Translation initiation factor eIF-2B subunit epsilon), 서열번호 88로 기재되는 유전자(Ribosomal protein S14, transcript variant 4), 서열번호 89로 기재되는 유전자(Transmembrane protein 85), 서열번호 90으로 기재되는 유전자(heat shock protein 84b), 서열번호 91로 기재되는 유전자(warm-temperature-acclimation-related-65 kDa-protein(C79)) 및 서열번호 92로 기재되는 유전자(glutathione S transferase Rho-class)로 구성된 군으로부터 선택되는 유전자는 비스페놀 A 노출에 대응하여 발현이 증가하는 것을 특징으로 하는 비스페놀 A 노출 여부 검출용 마이크로어레이 칩
5 5
제 1항에 있어서, 서열 번호 93으로 기재되는 유전자(Arylamine N-acetyl transferase), 서열 번호 94로 기재되는 유전자(Apolipoprotein E1), 서열 번호 95로 기재되는 유전자(Basigin), 서열 번호 96으로 기재되는 유전자(Complement component C8 beta), 서열 번호 97로 기재되는 유전자(C1q-like adipose specific protein), 서열 번호 65로 기재되는 유전자(Catalase), 서열 번호 98로 기재되는 유전자(Calcium binding protein P22), 서열 번호 99로 기재되는 유전자(Ceruloplasmin), 서열 번호 61로 기재되는 유전자(Complement factor B/C2-B), 서열 번호 100으로 기재되는 유전자(Chitinase), 서열 번호 101로 기재되는 유전자(Choline kinase), 서열 번호 60으로 기재되는 유전자(Choriogenin L), 서열 번호 102로 기재되는 유전자(Delta-6 fatty acyl desaturase), 서열 번호 73으로 기재되는 유전자(Delta 6-desaturase), 서열 번호 103으로 기재되는 유전자(Glutaminase), 서열 번호 92로 기재되는 유전자(Glutathione S-transferase), 서열 번호 104로 기재되는 유전자(Hepcidin), 서열 번호 40으로 기재되는 유전자(Leukocyte elastase inhibitor), 서열 번호 105로 기재되는 유전자(Lipoprotein lipase), 서열 번호 106으로 기재되는 유전자(N-acetyltransferase), 서열 번호 107로 기재되는 유전자(Plasminogen), 서열 번호 108로 기재되는 유전자(Retinol binding protein 4), 서열 번호 66으로 기재되는 유전자(Ring finger protein 141), 서열 번호 50으로 기재되는 유전자(TBT-binding protein), 서열 번호 109로 기재되는 유전자(Transferrin), 서열 번호 3으로 기재되는 유전자(Uridine phosphorylase 2), 서열 번호 110으로 기재되는 유전자(Vitellogenin 1) 및 서열 번호 111로 기재되는 유전자(Warm temperature acclimation related 65 kDa protein(C243))로 구성된 군으로부터 선택되는 유전자는 외부 스트레스에 대한 기작에 관련된 유전자인 것을 특징으로 하는 비스페놀 A 노출 여부 검출용 마이크로어레이 칩
6 6
1) 피검 시료에 노출된 실험군의 바다송사리와, 정상 대조군의 바다송사리에서 각각 RNA를 분리하는 단계;2) 단계 1)의 실험군 및 대조군의 RNA로부터 cDNA를 합성하면서 실험군과 대조군을 각기 다른 형광물질로 표지하는 단계;3) 단계 2)의 각기 다른 형광물질로 표지된 cDNA를 제 1항의 마이크로어레이 칩과 혼성화시키는 단계;4) 반응한 마이크로어레이 칩을 분석하는 단계; 및 5) 분석한 데이터에서 제 1항의 마이크로어레이 칩에 집적된 유전자 발현 정도를 대조군과 비교하여 확인하는 단계를 포함하는, 시료내 비스페놀 A 노출 여부 검출 방법
7 7
제 6항에 있어서, 시료는 생체시료, 식품시료, 화학시료, 공업시료, 임상시료 및 환경시료로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 비스페놀 A 노출 여부 검출 방법
8 8
제 6항에 있어서, 단계 2)의 형광물질은 Cy3, Cy5, 폴리 L-라이신-플루오레세인 이소티오시아네이트(poly L-lysine-fluorescein isothiocyanate, FITC), 로다민-B-이소티오시아네이트(rhodamine-B-isothiocyanate, RITC) 및 로다민(rhodamine)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 비스페놀 A 노출 여부 검출 방법
9 9
1) 피검시료에 노출된 실험군의 바다송사리와, 정상 대조군의 바다송사리에서 각각 RNA를 분리하는 단계;2) 단계 1)의 RNA를, 하기 각각의 유전자에 상보적이고 유전자를 증폭할 수 있는 프라이머 쌍을 모두 사용하여 정량 실시간 RT-PCR(Quantitative real-time reverse transcript polymerase chain reaction, qRT-PCR)을 수행하는 단계; 및서열번호 1로 기재되는 유전자(proline rich 6), 서열번호 2로 기재되는 유전자(telomerase reverse transcriptase gene), 서열번호 3으로 기재되는 유전자(uridine phosphorylase 2), 서열번호 4로 기재되는 유전자(MHC Class Ⅰ Region), 서열번호 5로 기재되는 유전자(vitellogenin Ⅱ), 서열번호 6로 기재되는 유전자(retinoid X receptor beta (RXRB) gene), 서열번호 7로 기재되는 유전자(protein tyrosine phosphatase-like, member b), 서열번호 8로 기재되는 유전자(TRAF-binding protein), 서열번호 9로 기재되는 유전자(HSPC038 protein), 서열번호 10으로 기재되는 유전자(Glycerol-3-phosphate dehydrogenase), 서열번호 11로 기재되는 유전자(proteasome subunit, beta type 8), 서열번호 12로 기재되는 유전자(trypsinogen), 서열번호 13로 기재되는 유전자(carnitine O-acetyltransferase precursor), 서열번호 14로 기재되는 유전자(tubulin, beta 5), 서열번호 15로 기재되는 유전자(muscleblind mRNA), 서열번호 16으로 기재되는 유전자(phosphoenolpyruvate carboxykinase), 서열번호 17로 기재되는 유전자(protein phosphatase 2 regulatory subunit B beta), 서열번호 18로 기재되는 유전자(eukaryotic peptide chain release factor GTP-binding subunit), 서열번호 19로 기재되는 유전자(40S ribosomal protein S18), 서열번호 20으로 기재되는 유전자(trypsinogen), 서열번호 21로 기재되는 유전자(estrogen receptor beta 2), 서열번호 22로 기재되는 유전자(bromodomain containing 2 (RING3) gene), 서열번호 23으로 기재되는 유전자(glutathione S-transferase), 서열번호 24로 기재되는 유전자(cysteine dioxygenase), 서열번호 25로 기재되는 유전자(cyclin G2), 서열번호 26로 기재되는 유전자(protein kinase C and casein kinase substrate in neurons 1), 서열번호 27로 기재되는 유전자(septin 7b (sept7b), transcript variant 1), 서열번호 28로 기재되는 유전자(c-type lysozyme mRNA), 서열번호 29로 기재되는 유전자(Uridine phosphorylase 1), 서열번호 30으로 기재되는 유전자(60S acidic ribosomal protein P1), 서열번호 31로 기재되는 유전자(heart-type fatty acid-binding protein), 서열번호 32로 기재되는 유전자(choriogenin Hminor), 서열번호 33으로 기재되는 유전자(ribosomal protein L13), 서열번호 34로 기재되는 유전자(glucose-regulated protein 94), 서열번호 35로 기재되는 유전자(cathepsin F), 서열번호 36으로 기재되는 유전자(5,10-methylenetetrahydrofolate reductase (NADPH)-like mRNA), 서열번호 37로 기재되는 유전자(mitogen-activated protein kinase 1), 서열번호 38로 기재되는 유전자(Transcription initiation factor IIA gamma chain), 서열번호 39로 기재되는 유전자(ATPase, H+ transporting, lysosomal, V1 subunit E isoform 1), 서열번호 40으로 기재되는 유전자(leukocyte elastase inhibitor), 서열번호 41로 기재되는 유전자(Putative transmembrane 4 superfamily member protein), 서열번호 42로 기재되는 유전자(mitogen-activated protein kinase (p38)), 서열번호 43으로 기재되는 유전자(DEAD-box RNA-dependent helicase p68 mRNA), 서열번호 44로 기재되는 유전자(Transforming growth factor-beta-induced protein ig-h3), 서열번호 45로 기재되는 유전자(40S ribosomal protein S19), 서열번호 46으로 기재되는 유전자(alcohol dehydrogenase Class Ⅵ, ADH8), 서열번호 47로 기재되는 유전자(malate dehydrogenase), 서열번호 48로 기재되는 유전자(carboxyl ester lipase, tandem duplicate 2), 서열번호 49로 기재되는 유전자(alpha-2-macroglobulin), 서열번호 50으로 기재되는 유전자(TBT-binding protein), 서열번호 51로 기재되는 유전자(keratin 15), 서열번호 52로 기재되는 유전자(complement component C9), 서열번호 53으로 기재되는 유전자(alpha-2-macroglobulin-2), 서열번호 54로 기재되는 유전자(kelch-like ECH-associated protein 1b), 서열번호 55로 기재되는 유전자(hepcidin-like precursor), 서열번호 56으로 기재되는 유전자(NADH dehydrogenase subunit 4), 서열번호 57로 기재되는 유전자(cyclin Y-like 1), 서열번호 58로 기재되는 유전자(complement regulatory plasma protein), 서열번호 59로 기재되는 유전자(protein kinase C and casein kinase substrate in neurons 2), 서열번호 60으로 기재되는 유전자(choriogenin L), 서열번호 61로 기재되는 유전자(complement factor B/C2-B), 서열번호 62로 기재되는 유전자(Nedd4 family interacting protein 2), 서열번호 63으로 기재되는 유전자(Restin (Cytoplasmic linker protein-170 alpha-2)), 서열번호 64로 기재되는 유전자(ornithine decarboxylase antizyme large isoform ORF1), 서열번호 65로 기재되는 유전자(catalase), 서열번호 66으로 기재되는 유전자(ring finger protein 141), 서열번호 67로 기재되는 유전자(Cytochrome P450 7B1 (Oxysterol 7-alpha-hydroxylase)), 서열번호 68로 기재되는 유전자(hypoxanthine phosphoribosyltransferase 1), 서열번호 69로 기재되는 유전자(cytochrome P450 CYP2Y3), 서열번호 70으로 기재되는 유전자(chymotrypsinogen 2-like protein), 서열번호 71로 기재되는 유전자(Iron-responsive element-binding protein 1), 서열번호 72로 기재되는 유전자(calreticulin), 서열번호 73으로 기재되는 유전자(delta 6-desaturase), 서열번호 74로 기재되는 유전자(kelch domain containing 10), 서열번호 75로 기재되는 유전자(arginyl-tRNA synthetase), 서열번호 76으로 기재되는 유전자(ATP-binding cassette transporter sub-family G member 2b), 서열번호 77로 기재되는 유전자(adult alpha-type globin), 서열번호 78로 기재되는 유전자(GTP cyclohydrolase 1 precursor), 서열번호 79로 기재되는 유전자(Thyroid hormone receptor-associated protein complex 150 kDa component), 서열번호 80으로 기재되는 유전자(sex hormone-binding globulin), 서열번호 81로 기재되는 유전자(protein phosphatase 2A regulatory subunit B' delta isoform), 서열번호 82로 기재되는 유전자(cyclin B2), 서열번호 83으로 기재되는 유전자(Isocitrate dehydrogenase), 서열번호 84로 기재되는 유전자(ATP citrate lyase (ACLY), transcript variant 2), 서열번호 85로 기재되는 유전자(decorin mRNA), 서열번호 86으로 기재되는 유전자(apolipoprotein A- Ⅳ4), 서열번호 87로 기재되는 유전자(Translation initiation factor eIF-2B subunit epsilon), 서열번호 88로 기재되는 유전자(Ribosomal protein S14, transcript variant 4), 서열번호 89로 기재되는 유전자(Transmembrane protein 85), 서열번호 90으로 기재되는 유전자(heat shock protein 84b), 서열번호 91로 기재되는 유전자(warm-temperature-acclimation-related-65 kDa-protein(C79)), 서열번호 92로 기재되는 유전자(glutathione S transferase Rho-class), 서열 번호 93으로 기재되는 유전자(Arylamine N-acetyl transferase), 서열 번호 94로 기재되는 유전자(Apolipoprotein E1), 서열 번호 95로 기재되는 유전자(Basigin), 서열 번호 96으로 기재되는 유전자(Complement component C8 beta), 서열 번호 97로 기재되는 유전자(C1q-like adipose specific protein), 서열 번호 98로 기재되는 유전자(Calcium binding protein P22), 서열 번호 99로 기재되는 유전자(Ceruloplasmin), 서열 번호 100으로 기재되는 유전자(Chitinase), 서열 번호 101로 기재되는 유전자(Choline kinase), 서열 번호 102로 기재되는 유전자(Delta-6 fatty acyl desaturase), 서열 번호 103으로 기재되는 유전자(Glutaminase), 서열 번호 104로 기재되는 유전자(Hepcidin), 서열 번호 105로 기재되는 유전자(Lipoprotein lipase), 서열 번호 106으로 기재되는 유전자(N-acetyltransferase), 서열 번호 107로 기재되는 유전자(Plasminogen), 서열 번호 108로 기재되는 유전자(Retinol binding protein 4), 서열 번호 109로 기재되는 유전자(Transferrin), 서열 번호 110으로 기재되는 유전자(Vitellogenin 1) 및 서열 번호 111로 기재되는 유전자(Warm temperature acclimation related 65 kDa protein(C243))
10 10
제 9항에 있어서, 시료는 생체시료, 식품시료, 화학시료, 공업시료, 임상시료 및 환경시료로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 비스페놀 A 노출 여부 검출 방법
11 11
제 1항의 마이크로어레이 칩을 포함하는, 비스페놀 A 노출 여부 검출용 키트
12 12
제 11항에 있어서, 스트렙타비딘-알칼리 탈인화효소 접합물질(strepavidin-like phosphatease conjugate), 화학형광물질(chemiflurorensce) 및 화학발광물질(chemiluminescent)로 이루어진 형광물질군으로부터 선택되는 어느 하나를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 비스페놀 A 노출 여부 검출용 키트
13 13
제 11항에 있어서, 혼성화에 사용되는 완충용액, RNA로부터 cDNA를 합성하기 위한 역전사효소, dNTPs 및 rNTP(사전 혼합형 또는 분리 공급형), 표식시약, 및 세척 완충용액으로 이루어진 반응시약군으로부터 선택되는 어느 하나를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 비스페놀 A 노출 여부 검출용 키트
14 14
하기 각각의 유전자에 상보적이고 상기 유전자를 증폭할 수 있는 프라이머 쌍을 모두 포함하는, 비스페놀 A 노출 여부 검출용 키트:서열번호 1로 기재되는 유전자(proline rich 6), 서열번호 2로 기재되는 유전자(telomerase reverse transcriptase gene), 서열번호 3으로 기재되는 유전자(uridine phosphorylase 2), 서열번호 4로 기재되는 유전자(MHC Class Ⅰ Region), 서열번호 5로 기재되는 유전자(vitellogenin Ⅱ), 서열번호 6로 기재되는 유전자(retinoid X receptor beta (RXRB) gene), 서열번호 7로 기재되는 유전자(protein tyrosine phosphatase-like, member b), 서열번호 8로 기재되는 유전자(TRAF-binding protein), 서열번호 9로 기재되는 유전자(HSPC038 protein), 서열번호 10으로 기재되는 유전자(Glycerol-3-phosphate dehydrogenase), 서열번호 11로 기재되는 유전자(proteasome subunit, beta type 8), 서열번호 12로 기재되는 유전자(trypsinogen), 서열번호 13로 기재되는 유전자(carnitine O-acetyltransferase precursor), 서열번호 14로 기재되는 유전자(tubulin, beta 5), 서열번호 15로 기재되는 유전자(muscleblind mRNA), 서열번호 16으로 기재되는 유전자(phosphoenolpyruvate carboxykinase), 서열번호 17로 기재되는 유전자(protein phosphatase 2 regulatory subunit B beta), 서열번호 18로 기재되는 유전자(eukaryotic peptide chain release factor GTP-binding subunit), 서열번호 19로 기재되는 유전자(40S ribosomal protein S18), 서열번호 20으로 기재되는 유전자(trypsinogen), 서열번호 21로 기재되는 유전자(estrogen receptor beta 2), 서열번호 22로 기재되는 유전자(bromodomain containing 2 (RING3) gene), 서열번호 23으로 기재되는 유전자(glutathione S-transferase), 서열번호 24로 기재되는 유전자(cysteine dioxygenase), 서열번호 25로 기재되는 유전자(cyclin G2), 서열번호 26로 기재되는 유전자(protein kinase C and casein kinase substrate in neurons 1), 서열번호 27로 기재되는 유전자(septin 7b (sept7b), transcript variant 1), 서열번호 28로 기재되는 유전자(c-type lysozyme mRNA), 서열번호 29로 기재되는 유전자(Uridine phosphorylase 1), 서열번호 30으로 기재되는 유전자(60S acidic ribosomal protein P1), 서열번호 31로 기재되는 유전자(heart-type fatty acid-binding protein), 서열번호 32로 기재되는 유전자(choriogenin Hminor), 서열번호 33으로 기재되는 유전자(ribosomal protein L13), 서열번호 34로 기재되는 유전자(glucose-regulated protein 94), 서열번호 35로 기재되는 유전자(cathepsin F), 서열번호 36으로 기재되는 유전자(5,10-methylenetetrahydrofolate reductase (NADPH)-like mRNA), 서열번호 37로 기재되는 유전자(mitogen-activated protein kinase 1), 서열번호 38로 기재되는 유전자(Transcription initiation factor IIA gamma chain), 서열번호 39로 기재되는 유전자(ATPase, H+ transporting, lysosomal, V1 subunit E isoform 1), 서열번호 40으로 기재되는 유전자(leukocyte elastase inhibitor), 서열번호 41로 기재되는 유전자(Putative transmembrane 4 superfamily member protein), 서열번호 42로 기재되는 유전자(mitogen-activated protein kinase (p38)), 서열번호 43으로 기재되는 유전자(DEAD-box RNA-dependent helicase p68 mRNA), 서열번호 44로 기재되는 유전자(Transforming growth factor-beta-induced protein ig-h3), 서열번호 45로 기재되는 유전자(40S ribosomal protein S19), 서열번호 46으로 기재되는 유전자(alcohol dehydrogenase Class Ⅵ, ADH8), 서열번호 47로 기재되는 유전자(malate dehydrogenase), 서열번호 48로 기재되는 유전자(carboxyl ester lipase, tandem duplicate 2), 서열번호 49로 기재되는 유전자(alpha-2-macroglobulin), 서열번호 50으로 기재되는 유전자(TBT-binding protein), 서열번호 51로 기재되는 유전자(keratin 15), 서열번호 52로 기재되는 유전자(complement component C9), 서열번호 53으로 기재되는 유전자(alpha-2-macroglobulin-2), 서열번호 54로 기재되는 유전자(kelch-like ECH-associated protein 1b), 서열번호 55로 기재되는 유전자(hepcidin-like precursor), 서열번호 56으로 기재되는 유전자(NADH dehydrogenase subunit 4), 서열번호 57로 기재되는 유전자(cyclin Y-like 1), 서열번호 58로 기재되는 유전자(complement regulatory plasma protein), 서열번호 59로 기재되는 유전자(protein kinase C and casein kinase substrate in neurons 2), 서열번호 60으로 기재되는 유전자(choriogenin L), 서열번호 61로 기재되는 유전자(complement factor B/C2-B), 서열번호 62로 기재되는 유전자(Nedd4 family interacting protein 2), 서열번호 63으로 기재되는 유전자(Restin (Cytoplasmic linker protein-170 alpha-2)), 서열번호 64로 기재되는 유전자(ornithine decarboxylase antizyme large isoform ORF1), 서열번호 65로 기재되는 유전자(catalase), 서열번호 66으로 기재되는 유전자(ring finger protein 141), 서열번호 67로 기재되는 유전자(Cytochrome P450 7B1 (Oxysterol 7-alpha-hydroxylase)), 서열번호 68로 기재되는 유전자(hypoxanthine phosphoribosyltransferase 1), 서열번호 69로 기재되는 유전자(cytochrome P450 CYP2Y3), 서열번호 70으로 기재되는 유전자(chymotrypsinogen 2-like protein), 서열번호 71로 기재되는 유전자(Iron-responsive element-binding protein 1), 서열번호 72로 기재되는 유전자(calreticulin), 서열번호 73으로 기재되는 유전자(delta 6-desaturase), 서열번호 74로 기재되는 유전자(kelch domain containing 10), 서열번호 75로 기재되는 유전자(arginyl-tRNA synthetase), 서열번호 76으로 기재되는 유전자(ATP-binding cassette transporter sub-family G member 2b), 서열번호 77로 기재되는 유전자(adult alpha-type globin), 서열번호 78로 기재되는 유전자(GTP cyclohydrolase 1 precursor), 서열번호 79로 기재되는 유전자(Thyroid hormone receptor-associated protein complex 150 kDa component), 서열번호 80으로 기재되는 유전자(sex hormone-binding globulin), 서열번호 81로 기재되는 유전자(protein phosphatase 2A regulatory subunit B' delta isoform), 서열번호 82로 기재되는 유전자(cyclin B2), 서열번호 83으로 기재되는 유전자(Isocitrate dehydrogenase), 서열번호 84로 기재되는 유전자(ATP citrate lyase (ACLY), transcript variant 2), 서열번호 85로 기재되는 유전자(decorin mRNA), 서열번호 86으로 기재되는 유전자(apolipoprotein A- Ⅳ4), 서열번호 87로 기재되는 유전자(Translation initiation factor eIF-2B subunit epsilon), 서열번호 88로 기재되는 유전자(Ribosomal protein S14, transcript variant 4), 서열번호 89로 기재되는 유전자(Transmembrane protein 85), 서열번호 90으로 기재되는 유전자(heat shock protein 84b), 서열번호 91로 기재되는 유전자(warm-temperature-acclimation-related-65 kDa-protein(C79)), 서열번호 92로 기재되는 유전자(glutathione S transferase Rho-class), 서열 번호 93으로 기재되는 유전자(Arylamine N-acetyl transferase), 서열 번호 94로 기재되는 유전자(Apolipoprotein E1), 서열 번호 95로 기재되는 유전자(Basigin), 서열 번호 96으로 기재되는 유전자(Complement component C8 beta), 서열 번호 97로 기재되는 유전자(C1q-like adipose specific protein), 서열 번호 98로 기재되는 유전자(Calcium binding protein P22), 서열 번호 99로 기재되는 유전자(Ceruloplasmin), 서열 번호 100으로 기재되는 유전자(Chitinase), 서열 번호 101로 기재되는 유전자(Choline kinase), 서열 번호 102로 기재되는 유전자(Delta-6 fatty acyl desaturase), 서열 번호 103으로 기재되는 유전자(Glutaminase), 서열 번호 104로 기재되는 유전자(Hepcidin), 서열 번호 105로 기재되는 유전자(Lipoprotein lipase), 서열 번호 106으로 기재되는 유전자(N-acetyltransferase), 서열 번호 107로 기재되는 유전자(Plasminogen), 서열 번호 108로 기재되는 유전자(Retinol binding protein 4), 서열 번호 109로 기재되는 유전자(Transferrin), 서열 번호 110으로 기재되는 유전자(Vitellogenin 1) 및 서열 번호 111로 기재되는 유전자(Warm temperature acclimation related 65 kDa protein(C243))
15 15
제 14항에 있어서, 프라이머 쌍은 프라이머 쌍 1 : 서열번호 112의 정방향 프라이머 및 서열번호 113의 역방향 프라이머;프라이머 쌍 2 : 서열번호 114의 정방향 프라이머 및 서열번호 115의 역방향 프라이머;프라이머 쌍 3 : 서열번호 116의 정방향 프라이머 및 서열번호 117의 역방향 프라이머;프라이머 쌍 4 : 서열번호 118의 정방향 프라이머 및 서열번호 119의 역방향 프라이머;프라이머 쌍 5 : 서열번호 120의 정방향 프라이머 및 서열번호 121의 역방향 프라이머;프라이머 쌍 6 : 서열번호 122의 정방향 프라이머 및 서열번호 123의 역방향 프라이머;프라이머 쌍 7 : 서열번호 124의 정방향 프라이머 및 서열번호 125의 역방향 프라이머;프라이머 쌍 8 : 서열번호 126의 정방향 프라이머 및 서열번호 127의 역방향 프라이머;프라이머 쌍 9 : 서열번호 128의 정방향 프라이머 및 서열번호 129의 역방향 프라이머;프라이머 쌍 10 : 서열번호 130의 정방향 프라이머 및 서열번호 131의 역방향 프라이머;프라이머 쌍 11 : 서열번호 132의 정방향 프라이머 및 서열번호 133의 역방향 프라이머;프라이머 쌍 12 : 서열번호 134의 정방향 프라이머 및 서열번호 135의 역방향 프라이머프라이머 쌍 13 : 서열번호 136의 정방향 프라이머 및 서열번호 137의 역방향 프라이머;프라이머 쌍 14 : 서열번호 138의 정방향 프라이머 및 서열번호 139의 역방향 프라이머;프라이머 쌍 15 : 서열번호 140의 정방향 프라이머 및 서열번호 141의 역방향 프라이머;프라이머 쌍 16 : 서열번호 142의 정방향 프라이머 및 서열번호 143의 역방향 프라이머;프라이머 쌍 17 : 서열번호 144의 정방향 프라이머 및 서열번호 145의 역방향 프라이머;프라이머 쌍 18 : 서열번호 146의 정방향 프라이머 및 서열번호 147의 역방향 프라이머;프라이머 쌍 19 : 서열번호 148의 정방향 프라이머 및 서열번호 149의 역방향 프라이머;프라이머 쌍 20 : 서열번호 150의 정방향 프라이머 및 서열번호 151의 역방향 프라이머;프라이머 쌍 21 : 서열번호 152의 정방향 프라이머 및 서열번호 153의 역방향 프라이머;프라이머 쌍 22 : 서열번호 154의 정방향 프라이머 및 서열번호 155의 역방향 프라이머;프라이머 쌍 23 : 서열번호 156의 정방향 프라이머 및 서열번호 157의 역방향 프라이머;프라이머 쌍 24 : 서열번호 158의 정방향 프라이머 및 서열번호 159의 역방향 프라이머;프라이머 쌍 25 : 서열번호 160의 정방향 프라이머 및 서열번호 161의 역방향 프라이머;프라이머 쌍 26 : 서열번호 162의 정방향 프라이머 및 서열번호 163의 역방향 프라이머;프라이머 쌍 27 : 서열번호 164의 정방향 프라이머 및 서열번호 165의 역방향 프라이머; 및프라이머 쌍 28 : 서열번호 166의 정방향 프라이머 및 서열번호 167의 역방향프라이머인 것을 특징으로 하는 비스페놀 A 노출 여부 검출용 키트
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1 환경부 한국해양연구원 환경융합 신기술 개발사업 생체정보를 이용한 수생태계 주요 유해화학물질 위해성 예측 도구 및 PAH류 검출 랩칩 개발