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１７β－에스트라디올(１７β－ｅｓｔｒａｄｉｏｌ, Ｅ２) 노출에 대응하는 바다송사리 유전자 및 이를 이용한 환경 오염 진단 방법

  • 기술번호 : KST2015196400
  • 담당센터 : 부산기술혁신센터
  • 전화번호 : 051-606-6561
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 17β-에스트라디올(17β-estradiol, E2)의 노출에 대응하는 바다송사리의 유전자 및 이를 이용한 환경 오염 진단방법에 관한 것으로, 구체적으로, 바다송사리를 대상으로 해양환경오염에 대응하는 생체지표의 발굴을 시도하였으며, 17β-에스트라디올 노출에 대한 특이 유전자 후보의 확보 및 검출을 위해 HazChem Fish Array를 활용하여 17β-에스트라디올 노출 여부를 확인할 수 있는 생체지표 및 이들 유전자 생체지표들의 발현량 변화를 규명하였으므로, 이를 환경오염 진단 방법에 이용할 수 있다.
Int. CL C12Q 1/68 (2006.01) G01N 33/74 (2006.01) G01N 33/52 (2006.01)
CPC G01N 33/74(2013.01) G01N 33/74(2013.01) G01N 33/74(2013.01) G01N 33/74(2013.01) G01N 33/74(2013.01)
출원번호/일자 1020110107570 (2011.10.20)
출원인 한국해양과학기술원
등록번호/일자 10-1276733-0000 (2013.06.13)
공개번호/일자 10-2013-0043439 (2013.04.30) 문서열기
공고번호/일자 (20130619) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2011.10.20)
심사청구항수 15

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국해양과학기술원 대한민국 부산광역시 영도구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 염승식 대한민국 경남 거제시
2 우선옥 대한민국 경남 거제시
3 원효경 대한민국 경상남도 진주시

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이원희 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로 ***, 성지하이츠빌딩*차 ***호 (역삼동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국해양과학기술원 부산광역시 영도구
번호, 서류명, 접수/발송일자, 처리상태, 접수/발송일자의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 행정처리 표입니다.
번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2011.10.20 수리 (Accepted) 1-1-2011-0822292-34
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2012.06.07 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2012.07.20 수리 (Accepted) 9-1-2012-0058372-11
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2012.11.20 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2012-0701692-15
5 [출원인변경]권리관계변경신고서
[Change of Applicant] Report on Change of Proprietary Status		 2012.12.20 수리 (Accepted) 1-1-2012-1061616-19
6 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2013.01.10 수리 (Accepted) 1-1-2013-0026706-65
7 [대리인선임]대리인(대표자)에 관한 신고서
[Appointment of Agent] Report on Agent (Representative)		 2013.01.10 수리 (Accepted) 1-1-2013-0026591-01
8 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2013.01.10 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2013-0026707-11
9 등록결정서
Decision to grant		 2013.05.31 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2013-0376996-99
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.07.11 수리 (Accepted) 4-1-2014-5084020-12
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2017.06.28 수리 (Accepted) 4-1-2017-0034176-95
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2018.01.23 수리 (Accepted) 4-1-2018-5013167-10
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2018.07.10 수리 (Accepted) 4-1-2018-5131202-66
14 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2020.02.25 수리 (Accepted) 4-1-2020-5042665-74
15 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2020.10.20 수리 (Accepted) 4-1-2020-5235797-63
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
하기의 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 유전자의 핵산 서열이 집적된, 시료내 17β-에스트라디올(17β-estradiol, E2) 노출 여부 검출용 마이크로어레이 칩:서열번호 1로 기재되는 유전자(Dimethylglycine dehydrogenase), 서열번호 2로 기재되는 유전자(Fructose-bisphosphate aldolase B), 서열번호 3으로 기재되는 유전자(Fatty acid binding protein 10 liver basic), 서열번호 4로 기재되는 유전자(Claudin), 서열번호 5로 기재되는 유전자(Cytochrome P450 2P3), 서열번호 6으로 기재되는 유전자(Aldolase B), 서열번호 7로 기재되는 유전자(Cytochrome c-1, cyc1), 서열번호 8로 기재되는 유전자(Selenoprotein M), 서열번호 9로 기재되는 유전자(ATPase H+ transporting V1 subunit F, atp6v1f), 서열번호 10으로 기재되는 유전자(Cytochrome oxidase subunit Ⅰ, COⅠ), 서열번호 11로 기재되는 유전자(ATP citrate lyase isoform 2), 서열번호 12로 기재되는 유전자(Ribosomal protein L13a, rpl13a), 서열번호 13으로 기재되는 유전자(Cytochrome c oxidase subunit Ⅰ), 서열번호 14로 기재되는 유전자(Pyrroline-5-carboxylate reductase 1, pycr1), 서열번호 15로 기재되는 유전자(Exs-related protein), 서열번호 16로 기재되는 유전자(Cysteine-rich with EGF-like domains 2, creld2), 서열번호 17로 기재되는 유전자(Selenoprotein 15), 서열번호 18로 기재되는 유전자(Beta-galactoside-binding lectin), 서열번호 19로 기재되는 유전자(hv1 gene for histone H2 variant), 서열번호 20으로 기재되는 유전자(LAG1 longevity assurance 2), 서열번호 21로 기재되는 유전자(Inositol oxygenase), 서열번호 22로 기재되는 유전자(Acyl-CoA synthetase long-chain family member 1), 서열번호 23으로 기재되는 유전자(Tetraspanin-3), 서열번호 24로 기재되는 유전자(Microsomal triglyceride transfer protein), 서열번호 25로 기재되는 유전자(Amino-terminal enhancer of split), 서열번호 26으로 기재되는 유전자(non-classical MHC class Ⅰ antigen), 서열번호 27로 기재되는 유전자(NADH-cytochrome b5 reductase 3), 서열번호 28로 기재되는 유전자(rRNA 2-O-methyltransferase fibrillarin), 서열번호 31로 기재되는 유전자(Adenylosuccinate synthetase isozyme 2), 서열번호 32로 기재되는 유전자(Mannose-P-dolichol utilization defect 1b, mpdu1b), 서열번호 33으로 기재되는 유전자(RAB3 GTPase activating protein subunit 2 (non-catalytic)), 서열번호 34로 기재되는 유전자(Tax1 (human T-cell leukemia virus type Ⅰ) binding protein 1b), 서열번호 35로 기재되는 유전자(40S ribosomal protein S24-like protein), 서열번호 36으로 기재되는 유전자(Exosome complex exonuclease RRP4), 서열번호 37로 기재되는 유전자(Iduronate 2-sulfatase precursor), 서열번호 39로 기재되는 유전자(Oligosaccharyltransferase complex subunit, ostc), 서열번호 40로 기재되는 유전자(Abhydrolase domain containing 11), 서열번호 41로 기재되는 유전자(B-cell antigen receptor complex-associated protein alpha-chain precursor), 서열번호 42로 기재되는 유전자(Alpha-2,3-sialyltransferase ST3Gal Ⅰ), 서열번호 43으로 기재되는 유전자(Glutathione reductase (mitochondrial)), 서열번호 45로 기재되는 유전자(Integral membrane protein 1), 서열번호 46으로 기재되는 유전자(Complement control protein factor Ⅰ-B), 서열번호 47로 기재되는 유전자(Glutamate receptor, ionotropic, delta 1, GRID1), 서열번호 48로 기재되는 유전자(Dolichyl-alpha-1,6-mannosyltransferase (alg12)), 서열번호 49로 기재되는 유전자(Macrosialin precursor), 서열번호 50으로 기재되는 유전자(Metalloreductase STEAP4), 서열번호 51로 기재되는 유전자(14-alpha demethylase (CYP51)) 서열번호 52로 기재되는 유전자(Bromodomain containing 2 (RING3)), 서열 번호 53으로 기재되는 유전자(Apolipoprotein B), 서열 번호 54로 기재되는 유전자(Glutamate dehydrogenase 1b), 서열 번호 55로 기재되는 유전자(Glucose-6-phosphate dehydrogenase) 및 서열 번호 56으로 기재되는 유전자(Transferrin)
2 2
제 1항에 있어서, 상기 유전자는 바다송사리(Oryzias javanicus)로부터 유래되는 것을 특징으로 하는 17β-에스트라디올 노출 여부 검출용 마이크로어레이 칩
3 3
삭제
4 4
제 1항에 있어서, 서열번호 7로 기재되는 유전자(Cytochrome c-1, cyc1), 서열번호 8로 기재되는 유전자(Selenoprotein M), 서열번호 9로 기재되는 유전자(ATPase H+ transporting V1 subunit F, atp6v1f), 서열번호 10으로 기재되는 유전자(Cytochrome oxidase subunit Ⅰ, COⅠ), 서열번호 11로 기재되는 유전자(ATP citrate lyase isoform 2), 서열번호 12로 기재되는 유전자(Ribosomal protein L13a, rpl13a), 서열번호 13으로 기재되는 유전자(Cytochrome c oxidase subunit Ⅰ), 서열번호 14로 기재되는 유전자(Pyrroline-5-carboxylate reductase 1, pycr1), 서열번호 15로 기재되는 유전자(Exs-related protein), 서열번호 16로 기재되는 유전자(Cysteine-rich with EGF-like domains 2, creld2), 서열번호 17로 기재되는 유전자(Selenoprotein 15), 서열번호 18로 기재되는 유전자(Beta-galactoside-binding lectin), 서열번호 19로 기재되는 유전자(hv1 gene for histone H2 variant), 서열번호 20으로 기재되는 유전자(LAG1 longevity assurance 2), 서열번호 21로 기재되는 유전자(Inositol oxygenase), 서열번호 22로 기재되는 유전자(Acyl-CoA synthetase long-chain family member 1), 서열번호 23으로 기재되는 유전자(Tetraspanin-3), 서열번호 24로 기재되는 유전자(Microsomal triglyceride transfer protein), 서열번호 25로 기재되는 유전자(Amino-terminal enhancer of split), 서열번호 26으로 기재되는 유전자(non-classical MHC class Ⅰ antigen, 서열번호 27로 기재되는 유전자(NADH-cytochrome b5 reductase 3), 서열번호 28로 기재되는 유전자(rRNA 2-O-methyltransferase fibrillarin), 서열번호 31로 기재되는 유전자(Adenylosuccinate synthetase isozyme 2), 서열번호 32로 기재되는 유전자(Mannose-P-dolichol utilization defect 1b, mpdu1b), 서열번호 33으로 기재되는 유전자(RAB3 GTPase activating protein subunit 2 (non-catalytic)), 서열번호 34로 기재되는 유전자(Tax1 (human T-cell leukemia virus type Ⅰ) binding protein 1b), 서열번호 35로 기재되는 유전자(40S ribosomal protein S24-like protein), 서열번호 36으로 기재되는 유전자(Exosome complex exonuclease RRP4), 서열번호 37로 기재되는 유전자(Iduronate 2-sulfatase precursor), 서열번호 41로 기재되는 유전자(B-cell antigen receptor complex-associated protein alpha-chain precursor), 서열번호 42로 기재되는 유전자(Alpha-2,3-sialyltransferase ST3Gal Ⅰ), 서열번호 43으로 기재되는 유전자(Glutathione reductase (mitochondrial)), 서열번호 45로 기재되는 유전자(Integral membrane protein 1), 서열번호 46으로 기재되는 유전자(Complement control protein factor Ⅰ-B), 서열번호 47로 기재되는 유전자(Glutamate receptor, ionotropic, delta 1 , GRID1), 서열번호 48로 기재되는 유전자(Dolichyl-alpha-1,6-mannosyltransferase (alg12)), 서열번호 49로 기재되는 유전자(Macrosialin precursor), 서열번호 50으로 기재되는 유전자(Metalloreductase STEAP4), 서열번호 51로 기재되는 유전자(14-alpha demethylase (CYP51)) 및 서열번호 52로 기재되는 유전자(Bromodomain containing 2 (RING3))는 17β-에스트라디올 노출에 대응하여 발현이 증가하는 것을 특징으로 하는 17β-에스트라디올 노출 여부 검출용 마이크로어레이 칩
5 5
제 1항에 있어서, 서열번호 1로 기재되는 유전자(Dimethylglycine dehydrogenase), 서열번호 2로 기재되는 유전자(Fructose-bisphosphate aldolase B), 서열번호 3으로 기재되는 유전자(Fatty acid binding protein 10 liver basic), 서열번호 4로 기재되는 유전자(Claudin), 서열번호 5로 기재되는 유전자(Cytochrome P450 2P3), 서열번호 6으로 기재되는 유전자(Aldolase B), 서열번호 39로 기재되는 유전자(Oligosaccharyltransferase complex subunit, ostc) 및 서열번호 40로 기재되는 유전자(Abhydrolase domain containing 11)는 17β-에스트라디올 노출에 대응하여 발현이 감소하는 것을 특징으로 하는 17β-에스트라디올 노출 여부 검출용 마이크로어레이 칩
6 6
제 1항에 있어서, 상기 마이크로어레이 칩은 하기의 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 외부 스트레스에 대한 자기 방어적 기작에 관련된 유전자의 핵산 서열이 집적된 것을 특징으로 하는 17β-에스트라디올 노출 여부 검출용 마이크로어레이 칩:서열 번호 5로 기재되는 유전자(Cytochrome P450 1A, CYP1A)), 서열 번호 8로 기재되는 유전자(Selenoprotein M), 서열 번호 53으로 기재되는 유전자(Apolipoprotein B), 서열 번호 54로 기재되는 유전자(Glutamate dehydrogenase 1b), 서열 번호 55로 기재되는 유전자(Glucose-6-phosphate dehydrogenase) 및 서열 번호 56으로 기재되는 유전자(Transferrin)
7 7
1) 17β-에스트라디올 노출 여부를 확인하고자 하는 피검 시료를 처리한 실험군의 바다송사리와, 17β-에스트라디올이 포함되지 않은 피검 시료를 처리한 대조군의 바다송사리에서 각각 RNA를 분리하는 단계;2) 단계 1)의 실험군 및 대조군의 RNA로부터 cDNA를 합성하면서 실험군과 대조군을 각기 다른 형광물질로 표지하는 단계;3) 단계 2)의 각기 다른 형광물질로 표지된 cDNA를 제 1항의 마이크로어레이 칩과 혼성화시키는 단계;4) 반응한 마이크로어레이 칩을 분석하는 단계; 및 5) 분석한 데이터에서 제 1항의 마이크로어레이 칩에 집적된 유전자 발현 정도를 대조군과 비교하여 확인하는 단계를 포함하는, 시료내 17β-에스트라디올 노출 여부 검출 방법
8 8
제 7항에 있어서, 상기 시료는 생체시료, 식품시료, 화학시료, 공업시료, 임상시료 및 환경시료로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 17β-에스트라디올 노출 여부 검출 방법
9 9
삭제
10 10
제 7항에 있어서, 단계 2)의 형광물질은 Cy3, Cy5, 폴리 L-라이신-플루오레세인 이소티오시아네이트(poly L-lysine-fluorescein isothiocyanate, FITC), 로다민-B-이소티오시아네이트(rhodamine-B-isothiocyanate, RITC) 및 로다민(rhodamine)으로 이루어진 군으로부터 선택되어지는 것을 특징으로 하는 17β-에스트라디올 노출 여부 검출 방법
11 11
1) 17β-에스트라디올 노출 여부를 확인하고자 하는 피검시료를 처리한 실험군의 바다송사리와, 17β-에스트라디올이 포함되지 않은 피검 시료를 처리한 대조군의 바다송사리에서 각각 RNA를 분리하는 단계;2) 단계 1)의 RNA를, 제 1항의 유전자에 상보적이고 유전자를 증폭할 수 있는 프라이머 쌍을 사용하여 실시간 RT-PCR(Real-time reverse transcript polymerase chain reaction)을 수행하는 단계; 및3) 단계 2)의 유전자 산물을 대조군과 비교하여 발현 정도를 확인하는 단계를 포함하는, 시료내 17β-에스트라디올 노출 여부 검출 방법
12 12
제 11항에 있어서, 상기 시료는 생체시료, 식품시료, 화학시료, 공업시료, 임상시료 및 환경시료로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 17β-에스트라디올 노출 여부 검출 방법
13 13
삭제
14 14
제 1항의 마이크로어레이 칩을 포함하는, 17β-에스트라디올 노출 여부 검출용 키트
15 15
삭제
16 16
제 14항에 있어서, 스트렙타비딘-알칼리 탈인화효소 접합물질(strepavidin-like phosphatease conjugate), 화학형광물질(chemiflurorensce) 및 화학발광물질(chemiluminescent)로 이루어진 형광물질군으로부터 선택되는 어느 하나를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 17β-에스트라디올 노출 여부 검출용 키트
17 17
제 14항에 있어서, 혼성화에 사용되는 완충용액, RNA로부터 cDNA를 합성하기 위한 역전사효소, dNTPs 및 rNTP(사전 혼합형 또는 분리 공급형), 표식시약, 및 세척 완충용액으로 이루어진 반응시약군으로부터 선택되는 어느 하나를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 17β-에스트라디올 노출 여부 검출용 키트
18 18
제 1항의 유전자에 상보적이고 상기 유전자를 증폭할 수 있는 프라이머 쌍을 포함하는, 17β-에스트라디올 노출 여부 검출용 키트
19 19
삭제
20 20
제 18항에 있어서, RNA로부터 cDNA를 합성하기 위한 역전사효소, cNTPs 및 rNTP(사전 혼합형 또는 분리 공급형), DNA 중합효소 및, 세척 완충용액으로 구성된 반응시약군으로부터 선택되는 어느 하나 이상을 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 17β-에스트라디올 노출 여부 검출용 키트
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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 KR101379314 KR 대한민국 FAMILY
2 US20140315738 US 미국 FAMILY
3 WO2013058448 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY

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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 국토해양부 한국해양연구원 해양생명공학기술개발사업 해양극한생물분자유전체연구