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탄화플루오르옥탄술폰산염노출에 대응하는 히드라 유전자 및 이를 이용한 수생태계 환경오염 진단 방법

  • 기술번호 : KST2015196904
  • 담당센터 : 부산기술혁신센터
  • 전화번호 : 051-606-6561
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 탄화플루오르옥탄술폰산염(Perfluorooctane sulfonate, PFOS) 노출에 대응하는 히드라(Hydra magnipapillata) 유래의 유전자 및 이를 이용한 수생생태계 환경오염 진단 방법에 관한 것으로, 구체적으로 히드라로부터 유래한 유전자군 중에서 탄화플루오르옥탄술폰산염의 노출 시간에 따라 특이적으로 발현이 증가 또는 감소하는 유전자들을 확인하였으므로, 이들은 생체 지표로 이용함으로써 탄화플루오르옥탄술폰산염에 대응하는 히드라 유전자를 마이크로어레이, 이를 이용한 진단방법 및 상기 마이크로어레이를 포함하는 키트를 수생생태계의 스트레스 검출 또는 진단에 유용하게 사용할 수 있다.
Int. CL C12Q 1/68 (2006.01) C12N 15/11 (2006.01)
CPC C12N 15/11(2013.01) C12N 15/11(2013.01) C12N 15/11(2013.01) C12N 15/11(2013.01)
출원번호/일자 1020130029282 (2013.03.19)
출원인 한국해양과학기술원
등록번호/일자 10-1475033-0000 (2014.12.15)
공개번호/일자 10-2014-0114663 (2014.09.29) 문서열기
공고번호/일자 (20141222) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2013.03.19)
심사청구항수 11

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국해양과학기술원 대한민국 부산광역시 영도구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 염승식 대한민국 경남 거제시 중곡로*길 **,
2 우선옥 대한민국 경남 거제시 중곡로*길 **,
3 이애경 대한민국 부산 사상구
4 원효경 대한민국 경남 진주시

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이원희 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로 ***, 성지하이츠빌딩*차 ***호 (역삼동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국해양과학기술원 대한민국 부산광역시 영도구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2013.03.19 수리 (Accepted) 1-1-2013-0237293-93
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2013.12.09 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2014.01.10 수리 (Accepted) 9-1-2014-0004103-27
4 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2014.07.11 수리 (Accepted) 4-1-2014-5084020-12
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2014.08.25 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2014-0578740-35
6 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2014.09.30 수리 (Accepted) 1-1-2014-0932772-54
7 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2014.09.30 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2014-0932773-00
8 등록결정서
Decision to grant
2014.11.03 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2014-0752014-44
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2017.06.28 수리 (Accepted) 4-1-2017-0034176-95
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2018.01.23 수리 (Accepted) 4-1-2018-5013167-10
11 출원인정보변경(경정)신고서
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2018.07.10 수리 (Accepted) 4-1-2018-5131202-66
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.02.25 수리 (Accepted) 4-1-2020-5042665-74
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.10.20 수리 (Accepted) 4-1-2020-5235797-63
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번호 청구항
1 1
하기의 모든 유전자의 핵산 서열의 올리고뉴클레오티드 또는 그의 상보가닥 분자가 모두 직접된, 탄화플루오르옥탄술폰산염(Perfluorooctane sulfonate, PFOS) 노출 여부 확인용 마이크로어레이(microarray):서열번호 1로 기재되는 유전자(8(R)-lipoxygenase), 서열번호 2로 기재되는 유전자(PPOD2 peroxidase), 서열번호 3으로 기재되는 유전자(chondroItin 4-sulfotransferase), 서열번호 4로 기재되는 유전자(NIDogen(basement membrane protein family member(nid-1)), 서열번호 5로 기재되는 유전자(Maltase-glucoamylase, intestinal), 서열번호 6으로 기재되는 유전자(putative sulfate transporter of the SLC26A11 family), 서열번호 7로 기재되는 유전자(Rh type B glycoprotein-like protein), 서열번호 8로 기재되는 유전자(hydra Na channel 2), 서열번호 9로 기재되는 유전자(solute carrier family 16 (monocarboxylic acid transporters), member 10), 서열번호 10으로 기재되는 유전자(HyTSR1 protein), 서열번호 11로 기재되는 유전자(complement component C3-like protein), 서열번호 12로 기재되는 유전자(hemicentin 1), 서열번호 13으로 기재되는 유전자(Glucosamine--fructose-6-phosphate aminotransferase 1), 서열번호 14로 기재되는 유전자(Transmembrane protein 104), 서열번호 15로 기재되는 유전자(POD2 peroxidase-like mRNA P), 서열번호 16으로 기재되는 유전자(bactericidal/permeability-increasing protein), 서열번호 17로 기재되는 유전자(glutamine-fructose-6-phosphate transaminase 2), 서열번호 18로 기재되는 유전자(TIP120 protein), 서열번호 19로 기재되는 유전자(Hexosaminidase domain-containing protein), 서열번호 20으로 기재되는 유전자(antistasin), 서열번호 21로 기재되는 유전자(putative peroxidase PPOD1), 서열번호 22로 기재되는 유전자(EGF-like module-containing mucin-like hormone receptor-like 1), 서열번호 23으로 기재되는 유전자(nucleoporin 214kDa), 서열번호 24로 기재되는 유전자(plastin 3), 서열번호 25로 기재되는 유전자(Protein sel-1 homolog 1), 서열번호 26으로 기재되는 유전자(ornithine, aminotransferase, mitochondrial), 서열번호 27로 기재되는 유전자(hippocampus abundant gene transcript 1), 서열번호 28로 기재되는 유전자(DNA-directed RNA polymerase III subunit RPC2), 서열번호 29로 기재되는 유전자(signal recognition particle 54kDa), 서열번호 30으로 기재되는 유전자(solute carrier family 40 (iron-regulated transporter), member 1), 서열번호 31로 기재되는 유전자(Methionine synthase reductase, mitochondrial), 서열번호 32로 기재되는 유전자(sp4 protein), 서열번호 33으로 기재되는 유전자(PAPS synthetase), 서열번호 34로 기재되는 유전자(tubulin, beta, 2), 서열번호 35로 기재되는 유전자(cathepsin L), 서열번호 36으로 기재되는 유전자(Actin, non-muscle 6
2 2
제 1항에 있어서, 상기 유전자는 히드라(Hydra magnipalillata)로부터 유래된 것을 특징으로 하는 탄화플루오르옥탄술폰산염 노출 여부 확인용 마이크로어레이
3 3
제 1항에 있어서, 서열번호 1로 기재되는 유전자(8(R)-lipoxygenase), 서열번호 2로 기재되는 유전자(PPOD2 peroxidase), 서열번호 3으로 기재되는 유전자(chondroItin 4-sulfotransferase), 서열번호 4로 기재되는 유전자(NIDogen(basement membrane protein family member(nid-1)), 서열번호 5로 기재되는 유전자(Maltase-glucoamylase, intestinal), 서열번호 6으로 기재되는 유전자(putative sulfate transporter of the SLC26A11 family), 서열번호 7로 기재되는 유전자(Rh type B glycoprotein-like protein), 서열번호 8로 기재되는 유전자(hydra Na channel 2), 서열번호 9로 기재되는 유전자(solute carrier family 16 (monocarboxylic acid transporters), member 10), 서열번호 10으로 기재되는 유전자(HyTSR1 protein), 서열번호 11로 기재되는 유전자(complement component C3-like protein), 서열번호 12로 기재되는 유전자(hemicentin 1), 서열번호 13으로 기재되는 유전자(Glucosamine--fructose-6-phosphate aminotransferase 1), 서열번호 14로 기재되는 유전자(Transmembrane protein 104), 서열번호 15로 기재되는 유전자(POD2 peroxidase-like mRNA P), 서열번호 16으로 기재되는 유전자(bactericidal/permeability-increasing protein), 서열번호 17로 기재되는 유전자(glutamine-fructose-6-phosphate transaminase 2), 서열번호 18로 기재되는 유전자(TIP120 protein), 서열번호 19로 기재되는 유전자(Hexosaminidase domain-containing protein), 서열번호 20으로 기재되는 유전자(antistasin), 서열번호 21로 기재되는 유전자(putative peroxidase PPOD1), 서열번호 22로 기재되는 유전자(EGF-like module-containing mucin-like hormone receptor-like 1), 서열번호 23으로 기재되는 유전자(nucleoporin 214kDa), 서열번호 24로 기재되는 유전자(plastin 3), 서열번호 25로 기재되는 유전자(Protein sel-1 homolog 1), 서열번호 26으로 기재되는 유전자(ornithine, aminotransferase, mitochondrial), 서열번호 27로 기재되는 유전자(hippocampus abundant gene transcript 1), 서열번호 28로 기재되는 유전자(DNA-directed RNA polymerase III subunit RPC2), 서열번호 29로 기재되는 유전자(signal recognition particle 54kDa), 서열번호 30으로 기재되는 유전자(solute carrier family 40 (iron-regulated transporter), member 1), 서열번호 31로 기재되는 유전자(Methionine synthase reductase, mitochondrial), 서열번호 32로 기재되는 유전자(sp4 protein), 서열번호 33으로 기재되는 유전자(PAPS synthetase), 서열번호 34로 기재되는 유전자(tubulin, beta, 2), 서열번호 35로 기재되는 유전자(cathepsin L), 서열번호 36으로 기재되는 유전자(Actin, non-muscle 6
4 4
제 1항에 있어서, 서열번호 41로 기재되는 유전자(novel EGF domain containing protein), 서열번호 43으로 기재되는 유전자 (AHNAK nucleoprotein), 서열번호 44로 기재되는 유전자(ADAM metallopeptidase domain 22 isoform 5 preproprotein), 서열번호 45로 기재되는 유전자(Uromodulin), 서열번호 46으로 기대되는 유전자(viral A-type inclusion protein), 서열번호 47로 기재되는 유전자(Transmembrane cell adhesion receptor mua-3), 서열번호 48로 기재되는 유전자(Latrophilin-2), 서열번호 49로 기재되는 유전자(Mucin-12), 서열번호 50으로 기재되는 유전자(235 kDa rhoptry protein), 서열번호 51로 기재되는 유전자(thymidylate kinase family protein), 서열번호 52로 기재되는 유전자(thrombospondin type 1 repeat-containing protein 2), 서열번호 53으로 기재되는 유전자(egf-like module containing, mucin-like, hormone receptor-like sequence 1), 서열번호 54로 기재되는 유전자(endozepine), 서열번호 55로 기재되는 유전자(6-phosphogluconate dehydrogenase), 서열번호 56으로 기재되는 유전자(ankyrin 2,3/unc44), 서열번호 57로 기재되는 유전자(ankyrin repeat protein), 서열번호 58로 기재되는 유전자(Ks1 protein), 서열번호 59로 기재되는 유전자, 서열번호 60으로 기재되는 유전자(KSI), 서열번호 61로 기재되는 유전자(interferon regulatory factor 1), 서열번호 62로 기재되는 유전자(tyrosine kinase receptor), 서열번호 63으로 기재되는 유전자(tuftelin interacting protein 11), 서열번호 64로 기재되는 유전자(DNA recombination/repair protein), 서열번호 65로 기재되는 유전자(NOP14 nucleolar protein homolog), 서열번호 66으로 기재되는 유전자(utrophin), 서열번호 67로 기재되는 유전자(Ks1-3 protein), 서열번호 68로 기재되는 유전자(TNF receptor-associated factor 3 interacting protein 1), 서열번호 69로 기재되는 유전자(contactin 5), 서열번호 70으로 기재되는 유전자(Protein FAM151A, transcript variant 1), 서열번호 71로 기재되는 유전자(carnitine acetyltransferase), 서열번호 72로 기재되는 유전자(Stretchin-Mlck) 및 서열번호 73으로 기재되는 유전자(RAB18B, member RAS oncogene family)는 탄화플루오르옥탄술폰산염 24 시간 및 48 노출에 의해 정상 대조군에 비해 발현량이 4배 이상 감소되는 유전자인 것을 특징으로 하는 탄화플루오르옥탄술폰산염 노출 여부 확인용 마이크로어레이
5 5
1) 실험군인 히드라와 대조군인 히드라에서 각각 RNA를 분리하는 단계;2) 단계 1)의 실험군 및 대조군의 RNA로부터 cDNA를 합성하면서 실험군과 대조군을 각기 다른 형광물질로 표지하는 단계;3) 단계 2)의 각기 다른 형광물질로 표지된 cDNA를 제 1항의 마이크로어레이와 혼성화시키는 단계;4) 반응한 마이크로어레이를 분석하는 단계; 및5) 분석한 데이터에서 제 1항의 마이크로어레이에 모두 집적된 유전자 발현 정도를 대조군과 비교하여 확인하는 단계를 포함하는 탄화플루오르옥탄술폰산염에 대한 노출 여부 확인 방법
6 6
제 5항에 있어서, 상기 단계 2)의 형광물질은 Cy3, Cy5, FITC(poly L-lysine-fluorescein isothiocyanate), RITC(rhodamine-B-isothiocyanate) 및 로다민(rhodamine)으로 이루어진 군으로부터 선택되어지는 것을 특징으로 탄화플루오르옥탄술폰산염에 대한 노출 여부 확인 방법
7 7
1) 피검시료에 노출된 실험군의 히드라와, 정상 대조군의 히드라에서 각각 RNA를 분리하는 단계;2) 단계 1)의 RNA를, 하기 각각의 유전자에 상보적이고 유전자를 증폭할 수 있는 모든 프라이머 쌍을 사용하여 정량 실시간 RT-PCR(Quantitative real-time reverse transcript polymerase chain reaction, qRT-PCR)을 수행하는 단계; 및서열번호 1로 기재되는 유전자(8(R)-lipoxygenase), 서열번호 2로 기재되는 유전자(PPOD2 peroxidase), 서열번호 3으로 기재되는 유전자(chondroItin 4-sulfotransferase), 서열번호 4로 기재되는 유전자(NIDogen(basement membrane protein family member(nid-1)), 서열번호 5로 기재되는 유전자(Maltase-glucoamylase, intestinal), 서열번호 6으로 기재되는 유전자(putative sulfate transporter of the SLC26A11 family), 서열번호 7로 기재되는 유전자(Rh type B glycoprotein-like protein), 서열번호 8로 기재되는 유전자(hydra Na channel 2), 서열번호 9로 기재되는 유전자(solute carrier family 16 (monocarboxylic acid transporters), member 10), 서열번호 10으로 기재되는 유전자(HyTSR1 protein), 서열번호 11로 기재되는 유전자(complement component C3-like protein), 서열번호 12로 기재되는 유전자(hemicentin 1), 서열번호 13으로 기재되는 유전자(Glucosamine--fructose-6-phosphate aminotransferase 1), 서열번호 14로 기재되는 유전자(Transmembrane protein 104), 서열번호 15로 기재되는 유전자(POD2 peroxidase-like mRNA P), 서열번호 16으로 기재되는 유전자(bactericidal/permeability-increasing protein), 서열번호 17로 기재되는 유전자(glutamine-fructose-6-phosphate transaminase 2), 서열번호 18로 기재되는 유전자(TIP120 protein), 서열번호 19로 기재되는 유전자(Hexosaminidase domain-containing protein), 서열번호 20으로 기재되는 유전자(antistasin), 서열번호 21로 기재되는 유전자(putative peroxidase PPOD1), 서열번호 22로 기재되는 유전자(EGF-like module-containing mucin-like hormone receptor-like 1), 서열번호 23으로 기재되는 유전자(nucleoporin 214kDa), 서열번호 24로 기재되는 유전자(plastin 3), 서열번호 25로 기재되는 유전자(Protein sel-1 homolog 1), 서열번호 26으로 기재되는 유전자(ornithine, aminotransferase, mitochondrial), 서열번호 27로 기재되는 유전자(hippocampus abundant gene transcript 1), 서열번호 28로 기재되는 유전자(DNA-directed RNA polymerase III subunit RPC2), 서열번호 29로 기재되는 유전자(signal recognition particle 54kDa), 서열번호 30으로 기재되는 유전자(solute carrier family 40 (iron-regulated transporter), member 1), 서열번호 31로 기재되는 유전자(Methionine synthase reductase, mitochondrial), 서열번호 32로 기재되는 유전자(sp4 protein), 서열번호 33으로 기재되는 유전자(PAPS synthetase), 서열번호 34로 기재되는 유전자(tubulin, beta, 2), 서열번호 35로 기재되는 유전자(cathepsin L), 서열번호 36으로 기재되는 유전자(Actin, non-muscle 6
8 8
제 1항의 마이크로어레이를 포함하는 탄화플루오르옥탄술폰산염(Perfluorooctane sulfonate, PFOS) 노출 여부 확인용 키트
9 9
제 8항에 있어서, 스트렙타비딘-알칼리 탈인화효소 접합물질(strepavidin -like phosphatease conjugate), 화학형광물질(chemiflurorensce) 및 화학발광물질(chemiluminescent)로 이루어진 형광물질군으로부터 선택되는 어느 하나를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 탄화플루오르옥탄술폰산 노출 여부 확인용 키트
10 10
제 8항에 있어서, 혼성화에 사용되는 완충용액, RNA로부터 cDNA를 합성하기 위한 역전사효소, dNTPs 및 rNTP(사전 혼합형 또는 분리 공급형), 표식시약, 및 세척 완충용액으로 이루어진 반응시약군으로부터 선택되는 어느 하나를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 탄화플루오르옥탄술폰산 노출 여부 확인용 키트
11 11
하기 각각의 유전자에 상보적이고 유전자를 증폭할 수 있는 프라이머 쌍을 모두 포함하는 탄화플루오르옥탄술폰산염(Perfluorooctane sulfonate, PFOS) 노출 여부 확인용 키트:서열번호 1로 기재되는 유전자(8(R)-lipoxygenase), 서열번호 2로 기재되는 유전자(PPOD2 peroxidase), 서열번호 3으로 기재되는 유전자(chondroItin 4-sulfotransferase), 서열번호 4로 기재되는 유전자(NIDogen(basement membrane protein family member(nid-1)), 서열번호 5로 기재되는 유전자(Maltase-glucoamylase, intestinal), 서열번호 6으로 기재되는 유전자(putative sulfate transporter of the SLC26A11 family), 서열번호 7로 기재되는 유전자(Rh type B glycoprotein-like protein), 서열번호 8로 기재되는 유전자(hydra Na channel 2), 서열번호 9로 기재되는 유전자(solute carrier family 16 (monocarboxylic acid transporters), member 10), 서열번호 10으로 기재되는 유전자(HyTSR1 protein), 서열번호 11로 기재되는 유전자(complement component C3-like protein), 서열번호 12로 기재되는 유전자(hemicentin 1), 서열번호 13으로 기재되는 유전자(Glucosamine--fructose-6-phosphate aminotransferase 1), 서열번호 14로 기재되는 유전자(Transmembrane protein 104), 서열번호 15로 기재되는 유전자(POD2 peroxidase-like mRNA P), 서열번호 16으로 기재되는 유전자(bactericidal/permeability-increasing protein), 서열번호 17로 기재되는 유전자(glutamine-fructose-6-phosphate transaminase 2), 서열번호 18로 기재되는 유전자(TIP120 protein), 서열번호 19로 기재되는 유전자(Hexosaminidase domain-containing protein), 서열번호 20으로 기재되는 유전자(antistasin), 서열번호 21로 기재되는 유전자(putative peroxidase PPOD1), 서열번호 22로 기재되는 유전자(EGF-like module-containing mucin-like hormone receptor-like 1), 서열번호 23으로 기재되는 유전자(nucleoporin 214kDa), 서열번호 24로 기재되는 유전자(plastin 3), 서열번호 25로 기재되는 유전자(Protein sel-1 homolog 1), 서열번호 26으로 기재되는 유전자(ornithine, aminotransferase, mitochondrial), 서열번호 27로 기재되는 유전자(hippocampus abundant gene transcript 1), 서열번호 28로 기재되는 유전자(DNA-directed RNA polymerase III subunit RPC2), 서열번호 29로 기재되는 유전자(signal recognition particle 54kDa), 서열번호 30으로 기재되는 유전자(solute carrier family 40 (iron-regulated transporter), member 1), 서열번호 31로 기재되는 유전자(Methionine synthase reductase, mitochondrial), 서열번호 32로 기재되는 유전자(sp4 protein), 서열번호 33으로 기재되는 유전자(PAPS synthetase), 서열번호 34로 기재되는 유전자(tubulin, beta, 2), 서열번호 35로 기재되는 유전자(cathepsin L), 서열번호 36으로 기재되는 유전자(Actin, non-muscle 6
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1 환경부 한국해양과학기술원 환경융합 신기술 개발사업 생체정보를 이용한 수생태계 주요 유해화학물질 위해성 예측 도구 및 PAH류 검출 랩칩 개발