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서열번호 1의 염기서열로 이루어진 락토바실러스 존소니 PF01(Lactobacillus johnsonii PF01) 유래 bshA(bile salt hydrolase A) 유전자
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서열번호 2의 염기서열로 이루어진 락토바실러스 존소니 PF01(Lactobacillus johnsonii PF01) 유래 bshB(bile salt hydrolase B) 유전자
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서열번호 3의 염기서열로 이루어진 락토바실러스 존소니 PF01(Lactobacillus johnsonii PF01) 유래 bshC(bile salt hydrolase C) 유전자
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제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 따른 유전자를 포함하는 재조합 벡터
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제 4항의 재조합 벡터로 형질전환된 숙주세포
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제 5항에 있어서,상기 숙주세포는 대장균인 것을 특징으로 하는 숙주세포
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서열번호 7 및 8의 염기서열을 갖는 락토바실러스 존소니 PF01(Lactobacillus johnsonii PF01) 유래 bshA(bile salt hydrolase A) 유전자를 증폭하기 위한 프라이머 세트
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서열번호 9 및 10의 염기서열을 갖는 락토바실러스 존소니 PF01(Lactobacillus johnsonii PF01) 유래 bshB(bile salt hydrolase B) 유전자를 증폭하기 위한 프라이머 세트
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서열번호 11 및 12의 염기서열을 갖는 락토바실러스 존소니 PF01(Lactobacillus johnsonii PF01) 유래 bshC(bile salt hydrolase C) 유전자를 증폭하기 위한 프라이머 세트
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자돈으로부터 분리한 락토바실러스 존소니 PF01(Lactobacillus johnsonii PF01) 균주로부터 bshA, bshB, bshC 유전자에 대응되는 증폭용 프라이머를 사용하여 PCR 방법으로 bshA, bshB, bshC 유전자를 증폭하는 단계; 상기 증폭된 bshA, bshB, bshC 유전자를 각각 벡터와 결합시켜 대장균 균주에 도입하는 클로닝 단계; 상기 클로닝 단계에서 생성된 재조합 플라스미드를 제한효소로 절단하고 인서트 DNA를 회수하는 단계; 상기 회수된 인서트 DNA를 벡터에 결합시켜 서브클로닝 후, 대장균 균주에 도입하여 형질전환하는 단계; 상기 형질전환된 균주에서 재조합 플라스미드를 추출하는 단계; 상기 추출된 재조합 플라스미드를 대량발현을 위해 숙주세포인 대장균에 도입하는 단계; 상기 대장균에 도입된 재조합 플라스미드를 배양하여 침전반응을 보이는 형질전환 효소를 선발하는 단계; 를 포함하여 이루어지는 고콜레스테롤혈증 감소를 위한 락토바실러스 존소니 PF01(Lactobacillus johnsonii PF01) 균주 유래의 담즙산염 가수분해효소 분리방법
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서열번호 4의 아미노산 서열로 이루어진 락토바실러스 존소니 PF01(Lactobacillus johnsonii PF01) 유래 bshA(bile salt hydrolase A)
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서열번호 5의 아미노산 서열로 이루어진 락토바실러스 존소니 PF01(Lactobacillus johnsonii PF01) 유래 bshB(bile salt hydrolase B)
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서열번호 6의 아미노산 서열로 이루어진 락토바실러스 존소니 PF01(Lactobacillus johnsonii PF01) 유래 bshC(bile salt hydrolase C)
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제11항에 있어서,상기 락토바실러스 존소니 PF01(Lactobacillus johnsonii PF01) 유래 bshA(bile salt hydrolase A) 효소는 하기 특징을 갖는 정제된 bshA :(a) 최적온도 50-70℃;(b) 최적 pH 6
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제12항에 있어서,상기 락토바실러스 존소니 PF01(Lactobacillus johnsonii PF01) 유래 bshB(bile salt hydrolase B) 효소는 하기 특징을 갖는 정제된 bshB :(a) 최적온도 55-70℃;(b) 최적 pH 4
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제 13항에 있어서,상기 락토바실러스 존소니 PF01(Lactobacillus johnsonii PF01) 유래 bshC(bile salt hydrolase C) 효소는 하기 특징을 갖는 정제된 bshC 효소 :(a) 최적온도 65-80℃;(b) 최적 pH 5
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서열번호 1, 서열번호 2 및 서열번호 3의 염기서열로 이루어진 bshA, bshB, bshC 유전자가 발현되는 락토바실러스 존소니 PF01(Lactobacillus johnsonii PF01)
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제 17항의 락토바실러스 존소니 PF01(Lactobacillus johnsonii PF01)을 함유하는 콜레스테롤 저하용 식품
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