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가축의 체외 수정 시 사용되는 정자의 처리방법으로서,정자동결용 용액을 포함하여 동결된 가축의 동결 정액을 제1 정자처리 용액으로 융해하여 정자융해액을 준비하는 단계;상기 정자융해액을 1차 원심 분리하여 정자를 포함하는 제1 침전층을 형성하는 단계;상기 제1 침전층 상에 상기 제1 정자처리 용액을 공급하여 상기 정자를 활성화 시키는 제1 스윔업(swim-up) 단계;제 1 스윔업이 이루어진 용액에, 제2 정자처리 용액을 상기 제1 스윔업이 이루어진 용액과 동일한 양으로 첨가하여 배양하는 단계;상기 배양된 용액을 2차 원심 분리하여 정자를 포함하는 제2 침전층을 형성하는 단계;상기 제2 침전층 상에 제2 정차처리 용액을 공급하여 상기 정자를 활성화 시키는 제2 스윔업 단계; 및제2 스윔업이 이루어진 정자 배양층을 분리 회수하는 단계를 포함하는, 가축의 체외 수정용 정자 처리방법
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제1항에 있어서,상기 정자 동결용 용액은,정자 동결용 희석액 10 내지 30 v/v%;난황 10 내지 30 v/v%; 및물 40 내지 80 v/v%를 포함하는 것을 특징으로 하는, 정자 처리방법
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제1항에 있어서,상기 제1 정자 처리용액은, 정자 동결용 희석액 10 내지 30 v/v%; 및 물 70 내지 90 v/v%를 포함하는 것을 특징으로 하는, 정자 처리방법
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제2항 또는 제3항에 있어서,상기 정자 동결용 희석액은, 하이드록시메틸(hydroxymethyl), 시트르산(citric acid), 당(sugar), 완충제(buffers), 글리세롤(glycerol) 및 항생제로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 물질을 포함하는 동결액을 3 내지 5 배 부피의 물로 희석한 용액인 것을 특징으로 하는, 정자 처리방법
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제4항에 있어서,상기 하이드록시메틸은 트리스-(하이드록시메틸)-아미노메탄(tris-(hydroxymethyl)-aminomethane;TRIS)인, 정자 처리방법
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제4항에 있어서,상기 항생제는 타이로신(Tylosin), 겐타마이신(Gentamycin), 스펙티노마이신(Spectinomycin) 및 린코마이신(Lincomycin)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상인 것을 특징으로 하는, 정자 처리방법
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제1항에 있어서,상기 정자 동결용 용액 및 상기 제1 정자 처리용액의 삼투압이 동일한 것을 특징으로 하는, 정자 처리방법
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제7항에 있어서,상기 삼투압은 940 내지 970 mOsm/L인 것을 특징으로 하는, 정자 처리방법
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제1항에 있어서, 상기 정자 동결용 용액 및 상기 제1 정자 처리용액의 pH 가 6
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제1항에 있어서,상기 제2 정자 처리용액은, 상기 정자 동결용 용액 및 상기 제1 정자 처리용액 보다 pH 가 높고, 삼투압이 낮은 것을 특징으로 하는, 정자 처리방법
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제1항에 있어서, 상기 제 1 스윔업 단계 및 제 2 스윔업 단계는 36℃ 내지 39℃ 사이의 온도에서 수행되는 것을 특징으로 하는 정자 처리방법
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