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대장균을 이용한 프로스타그란딘 E2 합성효소의 대량합성방법

  • 기술번호 : KST2015201681
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 프로스타그란딘 E의 합성효소인 mPGES-1를 코딩하는 돌연변이 유전자 및 대장균을 이용한 프로스타그란딘 E2 합성효소의 대량 합성방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 프로스타그란딘 E의 합성효소인 mPGES-1를 코딩하는 유전자의 40, 73, 122번째 아미노산인 아르기닌의 CGG 코돈이 CGC 코돈으로 치환된 서열번호 1로 기재되는 돌연변이 유전자 및 인간 mPGES-1 효소를 코딩하는 유전자를 대장균 1차 발현벡터에 삽입하는 단계; 상기 발현벡터에서 상기 mPGES-1 유전자를 돌연변이 시켜 2차 발현벡터를 제조하는 단계; 상기 2차 발현벡터를 대장균에 삽입하여 형질전환체를 제조하는 단계; 및 상기 형질전환체로부터 mPGES-1 유전자를 발현시키고, 상기 형질전환체로부터 mPGES-1 효소를 분리 및 정제하는 단계를 포함하는 mPGES-1 효소의 대량 합성방법에 관한 것이다. 본 발명은 PGE2의 합성 효소인 mPGES-1의 유전자를 변형하여 단백질 서열은 변화하지 않고 대장균에서의 발현도를 높인 유전자를 개발하고, 이를 이용하여 mPGES-1 단백질을 효과적으로 대량 합성할 수 있으므로, 종래보다 mPGES-1을 보다 용이하게 제조할 수 있다. 항염증 질환, mPGES-1, 과발현(overexpression), E. coli
Int. CL C12N 15/09 (2006.01) C12N 15/52 (2006.01) C12N 15/64 (2006.01)
CPC C12N 9/90(2013.01) C12N 9/90(2013.01) C12N 9/90(2013.01) C12N 9/90(2013.01) C12N 9/90(2013.01) C12N 9/90(2013.01) C12N 9/90(2013.01)
출원번호/일자 1020080077036 (2008.08.06)
출원인 국민대학교산학협력단
등록번호/일자 10-1049925-0000 (2011.07.11)
공개번호/일자 10-2010-0018321 (2010.02.17) 문서열기
공고번호/일자 (20110715) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2008.08.06)
심사청구항수 11

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 국민대학교산학협력단 대한민국 서울특별시 성북구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 유연규 대한민국 서울특별시 노원구
2 최경아 대한민국 강원도 철원군

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 박용민 대한민국 서울특별시 강남구 역삼로 ***, ***호 코디특허법률사무소 (역삼동, 한빛빌딩)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 국민대학교산학협력단 대한민국 서울특별시 성북구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2008.08.06 수리 (Accepted) 1-1-2008-0565285-14
2 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2010.10.13 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2010-0456083-70
3 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2010.12.10 수리 (Accepted) 1-1-2010-0816754-06
4 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2011.01.05 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2011-0008489-50
5 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2011.01.05 수리 (Accepted) 1-1-2011-0008478-58
6 등록결정서
Decision to grant
2011.07.06 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2011-0376535-96
7 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2016.03.14 수리 (Accepted) 4-1-2016-5032192-73
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
프로스타그란딘 E의 합성효소인 mPGES-1를 코딩하는 유전자의 40, 73, 122번째 아미노산인 아르기닌의 CGG 코돈이 CGC 코돈으로 치환된 서열번호 1로 기재되는 돌연변이 유전자
2 2
제 1항의 유전자가 포함된 발현벡터
3 3
제 2항에 있어서, 상기 발현벡터는 pPGES-2인 것을 특징으로 하는 발현벡터
4 4
제 2항 또는 제 3항의 발현벡터로 형질전환된 대장균
5 5
제 4항에 있어서, 상기 형질전환된 대장균은 BL21(DE3) 또는 Rosetta(DE3) 균주인 것을 특징으로 하는 대장균
6 6
ⅰ) 인간 mPGES-1 효소를 코딩하는 유전자를 대장균 1차 발현벡터에 삽입하는 단계; ⅱ) 상기 발현벡터에서 상기 mPGES-1 유전자를 서열번호 1로 기재되는 유전자로 돌연변이 시켜 2차 발현벡터를 제조하는 단계; ⅲ) 상기 2차 발현벡터를 대장균에 삽입하여 형질전환체를 제조하는 단계; 및 ⅳ) 상기 형질전환체로부터 mPGES-1 유전자를 발현시키고, 상기 형질전환체로부터 mPGES-1 효소를 분리 및 정제하는 단계를 포함하는 mPGES-1 효소의 대량 합성방법
7 7
제 6항에 있어서, 상기 1차 발현벡터는 pET28a 벡터인 것을 특징으로 하는 mPGES-1 효소의 대량 합성방법
8 8
삭제
9 9
삭제
10 10
제 6항에 있어서, 상기 ⅱ) 단계의 2차 발현벡터는 pPGES-2인 것을 특징으로 하는 mPGES-1 효소의 대량 합성방법
11 11
제 6항에 있어서, 상기 ⅲ) 단계의 대장균은 BL21(DE3) 또는 Rosetta(DE3) 균주인 것을 특징으로 하는 mPGES-1 효소의 대량 합성방법
12 12
제 6항에 있어서, 상기 ⅳ) 단계의 mPGES-1의 발현은 형질전환된 대장균에 IPTG로 유도하는 것을 특징으로 하는 mPGES-1 효소의 대량 합성방법
13 13
제 6항에 있어서, 상기 ⅳ) 단계의 mPGES-1의 정제는 Ni-NTA 컬럼과 이온교환 컬럼을 통하여 이루어지는 것을 특징으로 하는 mPGES-1 효소의 대량 합성방법
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 교육과학기술부 국민대학교 산학협력단 프로테오믹스이용기술개발사업 질환 표적 막 단백질의 조절물질 발굴 및 결정구조 분석