| 1 |
1
1) BLT2 단백질 또는 BLT2의 세포내 루프(intracellular loop) 부위를 포함하는 단백질을 준비하는 단계;2) G-단백질의 αi3 또는 αq 소단위체 단백질을 준비하는 단계;3) 단계 1)과 2)의 단백질을 피검 화합물의 존재하에서 반응시키고 단백질간의 상호반응 정도를 측정하는 단계; 및4) 단계 3)의 상호반응 정도를 피검 화합물이 존재하지 않는 대조군의 상호반응 정도 비교하여 BLT2 신호전달 조절에 영향을 미치는 피검 화합물을 선별하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 BLT2 신호전달 조절물질의 검색방법
|
| 2 |
2
제 1항에 있어서, 단계 3)의 피검 화합물은 단계 1)의 BLT2 단백질 또는 BLT2의 세포내 루프 부위를 포함하는 단백질에 대해 G-단백질의 αi3 소단위체 단백질 또는 αq 소단위체 단백질을 처리하기 전, 후 또는 동시에 반응시키는 것을 특징으로 하는 BLT2 신호전달 조절물질의 검색방법
|
| 3 |
3
제 1항에 있어서, 단계 1)의 BLT2 단백질은 단백질의 정제를 용이하게 하는 부위와 BLT2 부위로 구성되는 BLT2 융합 단백질인 것을 특징으로 하는 BLT2 신호전달 조절물질의 검색방법
|
| 4 |
4
제 3항에 있어서, 상기 BLT2 융합 단백질의 정제를 용이하게 하는 부위는 N-말단의 T7-표지(tag) 및 C-말단의 His-tag인 것을 특징으로 하는 BLT2 신호전달 조절물질의 검색방법
|
| 5 |
5
제 1항에 있어서, 단계 1)의 BLT2의 세포내 루프(intracellular loop) 부위를 포함하는 단백질은 BLT2의 세포 내 루프 3(intracellular loop, iL3) 부위를 포함하는 단백질인 것을 특징으로 하는 BLT2 신호전달 조절물질의 검색방법
|
| 6 |
6
제 5항에 있어서, 상기 BLT2의 iL3 부위를 포함하는 단백질은 단백질의 정제를 용이하게 하는 부위와 iL3 부위로 구성되는 BLT2의 iL3 부위를 포함하는 융합 단백질인 것을 특징으로 하는 BLT2 신호전달 조절물질의 검색방법
|
| 7 |
7
제 6항에 있어서, 상기 BLT2의 iL3 부위를 포함하는 융합 단백질의 정제를 용이하게 하는 부위는 GST(Glutathione-S-Transferase)인 것을 특징으로 하는 BLT2 신호전달 조절물질의 검색방법
|
| 8 |
8
제 1항에 있어서, 상기 Gαq 단백질은 정제를 용이하게 하는 부위 및 Gαq로 구성되는 Gαq 융합 단백질인 것을 특징으로 하는 BLT2 신호전달 조절물질의 검색방법
|
| 9 |
9
삭제
|
| 10 |
10
삭제
|
| 11 |
11
제 1항에 있어서 , 상기 Gαi3 단백질은 정제를 용이하게 하는 부위 및 Gαi3로 구성되는 Gαi3 융합 단백질인 것을 특징으로 하는 BLT2 신호전달 조절물질의 검색방법
|
| 12 |
12
제 11항에 있어서, 상기 Gαi3 융합 단백질의 정제를 용이하게 하는 부위는 N-말단의 6 개의 히스티딘 표지(tag)인 것을 특징으로 하는 BLT2 신호전달 조절물질의 검색방법
|
| 13 |
13
제 11항에 있어서, 상기 Gαi3 융합 단백질은 형광 물질, 발색 물질, 방사능 물질 또는 펩티드의 접합으로 표지된 Gαi3 융합 단백질인 것을 특징으로 하는 BLT2 신호전달 조절물질의 검색방법
|
| 14 |
14
제 1항에 있어서, 단계 3)의 피검 화합물은 항체, 리간드, 천연화합물, 추출물, 합성 펩타이드, 신약 후보물질 또는 단백질인 것을 특징으로 하는 BLT2 신호전달 조절물질의 검색방법
|
| 15 |
15
제 1항에 있어서, 단계 3)의 상호 반응 정도는 제 1항의 단계 1)의 BLT2 단백질 또는 BLT2의 iL3 부위를 포함하는 단백질과 제 1항의 단계 2)의 Gαi3 또는 Gαq 단백질간의 결합에 의한 형광 표지자, 발색 표지자, 방사능 표지자 또는 펩티드 표지자의 측정으로 확인되는 것을 특징으로 하는 BLT2 신호전달 조절물질의 검색방법
|
| 16 |
16
a) BLT2 단백질 또는 BLT2의 세포내 루프(intracellular loop) 부위를 포함하는 단백질;b)G단백질의 αi3 또는 αq 소단위체 단백질 ; c) 표지자; 및d) 반응 정지 용액을 포함하는 BLT2 신호전달 조절물질의 검색키트
|
| 17 |
17
제 16항에 있어서, 추가적으로e) 지지대; 및f) 고정자를 포함하는 BLT2 신호전달 조절물질의 검색키트
|
| 18 |
18
제 16항에 있어서, a)의 BLT2 단백질은 단백질의 정제를 용이하게 하는 부위와 BLT2 부위로 구성되는 BLT2 융합 단백질인 것을 특징으로 하는 BLT2 신호전달 조절물질의 검색키트
|
| 19 |
19
제 18항에 있어서, 상기 BLT2 융합 단백질의 정제를 용이하게 하는 부위는 N-말단의 T7-표지(tag) 및 C-말단의 His-tag인 것을 특징으로 하는 BLT2 신호전달 조절물질의 검색키트
|
| 20 |
20
제 16항에 있어서, a)의 BLT2의 세포내 루프(intracellular loop) 부위를 포함하는 단백질은 BLT2의 세포내 루프 3(intracellular loop, iL3) 부위를 포함하는 단백질인 것을 특징으로 하는 BLT2 신호전달 조절물질의 검색키트
|
| 21 |
21
제 20항에 있어서, 상기 BLT2의 iL3 부위를 포함하는 단백질은 단백질의 정제를 용이하게 하는 부위와 iL3 부위로 구성되는 BLT2의 iL3 부위를 포함하는 융합 단백질인 것을 특징으로 하는 BLT2 신호전달 조절물질의 검색키트
|
| 22 |
22
제 21항에 있어서, 상기 BLT2의 iL3 부위를 포함하는 융합 단백질의 정제를 용이하게 하는 부위는 GST(Glutathione-S-Transferase)인 것을 특징으로 하는 BLT2 신호전달 조절물질의 검색키트
|
| 23 |
23
제 16항에 있어서, 상기 Gαq 단백질은 정제를 용이하게 하는 부위 및 Gαq로 구성되는 Gαq융합 단백질인 것을 특징으로 하는 BLT2 신호전달 조절물질의 검색키트
|
| 24 |
24
제 23항에 있어서, 상기 Gαq 융합 단백질의 정제를 용이하게 하는 부위는 N-말단의 6 개의 히스티딘 표지(tag)인 것을 특징으로 하는 BLT2 신호전달 조절물질의 검색키트
|
| 25 |
25
제 16항에 있어서, 상기 Gαi3 단백질은 정제를 용이하게 하는 부위 및 Gαi3로 구성되는 Gαi3융합 단백질인 것을 특징으로 하는 BLT2 신호전달 조절물질의 검색키트
|
| 26 |
26
제 25항에 있어서, 상기 Gαi3 융합 단백질의 정제를 용이하게 하는 부위는 N-말단의 6 개의 히스티딘 표지(tag)인 것을 특징으로 하는 BLT2 신호전달 조절물질의 검색키트
|
| 27 |
27
제 17항에 있어서, e)의 지지대는 플라스틱, 센서칩, 폴리프로필렌, 니트로셀룰로오즈 막, 폴리비닐(Polyvinyl) 수지로 합성된 96 웰 플레이트(96 well plate), 폴리스티렌(Polystyrene) 수지로 합성된 96 웰 플레이트 및 유리로 된 슬라이드글라스 등으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 BLT2 신호전달 조절물질의 검색키트
|
| 28 |
28
제 17항에 있어서, f)의 고정자는 항체, 화합물, 리간드, 또는 합성 펩티드 인 것을 특징으로 하는 BLT2 신호전달 조절물질의 검색키트
|
