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세포 주입구 및 비드 고정부를 구비하는 미세 유체 칩; 및
내부에 특정 약물이 함유되는 공간을 구비하며, 상기 비드 고정부에 고정되는 적어도 하나의 다공성 비드;
를 포함하는 세포 기반 주화성 키트
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제1항에서,
상기 미세 유체 칩은 서로 결합된 상부 몰드 및 하부 몰드로 이루어지는 세포 기반 주화성 키트
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제1항 또는 제2항에서,
상기 다공성 비드는 실리카로 이루어지는 세포 기반 주화성 키트
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제3항에서,
상기 다공성 실리카 비드의 내부에 채워지는 상기 특정 약물은 상기 세포 주입구를 통해 주입된 세포를 성장시키기 위한 성장인자의 주화성 약물로 이루어지는 세포 기반 주화성 키트
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5
제3항에서,
상기 미세 유체 칩은 주 채널, 미세 채널, 용액 주입구 및 용액 배출구를 더 구비하는 세포 기반 주화성 키트
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6
세포 주입구 및 비드 고정부를 구비하는 미세 유체 칩을 제조하는 단계;
내부가 비어 있는 다공성 비드를 제조하는 단계;
상기 세포 주입구를 통해 세포를 주입하는 단계; 및
상기 다공성 비드를 상기 미세 유체 칩의 비드 고정부에 배치하는 단계
를 포함하는 세포 기반 주화성 키트의 제조 방법
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7
제6항에서,
상기 다공성 비드의 내부에는 주화성 약물이 주입된 것을 특징으로 하는 세포 기반 주화성 키트의 제조 방법
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8
제6항에서, 상기 미세 유체 칩을 제조하는 단계는,
실리콘 웨이퍼 위에 감광제를 일정 두께로 도포하는 단계;
주 채널 및 미세 채널을 형성하기 위한 패턴이 형성된 마스크를 이용하여 거푸집을 제작하는 단계;
폴리디메틸실록산(PDMS, polydimethylsiloxane)을 거푸집에 부어 몰딩한 후, 소정 온도로 소정 시간 동안 경화하는 단계;
경화된 PDMS 몰드를 거푸집에서 분리한 후, 세포 주입구, 용액 주입구 및 용액 배출구 중에서 필요한 적어도 하나를 형성하는 단계; 및
2개의 PDMS 몰드를 플라즈마 처리하여 산화시킨 후 결합하는 단계
를 포함하는 세포 기반 주화성 키트의 제조 방법
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제6항에서, 상기 다공성 비드를 제조하는 단계는,
옥틸아민(octylamine)과 테트라에틸 오르토 실리케이트(tetraethyl-ortho-silicate, TEOS)를 교반하여 균일한 용액을 형성하는 단계;
상기 용액에 염산 수용액을 첨가하여 속은 유기물로 이루어지고 겉은 무기물로 이루어지는 비드를 형성하는 단계;
원심 분리하여 얻어진 비드 전구체를 세정 및 건조하는 단계;
600℃의 온도에 도달할 때까지 상기 비드 전구체를 분당 온도(℃/min)의 선형 함수로 승온시키는 단계; 및
상기 비드를 소성하는 단계
를 포함하는 세포 기반 주화성 키트의 제조 방법
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삭제
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제9항에서,
600℃의 온도에 도달할 때까지 상기 비드 전구체를 분당 온도(℃/min)의 선형 함수로 승온시키는 단계에서 분당 승온되는 온도 조건을 조절하여 상기 다공성 비드의 미세 세공의 크기를 결정하는 세포 기반 주화성 키트의 제조 방법
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제6항 내지 제9항 및 제 11항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 다공성 비드를 상기 미세 유체 칩의 비드 고정부에 배치하는 단계는 자기조립단분자막(Self-assembled monolayers, SAMs)을 이용한 화학적 결합을 이용하여 다공성 비드를 고정하는 방법을 포함하는 세포 기반 주화성 키트의 제조 방법
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13
제12항에서,
상기 자기조립단분자막(Self-assembled monolayers, SAMs)을 이용한 화학적 결합을 이용하여 다공성 비드를 고정하는 방법은,
(3-아미노프로필)트리메톡시실란((3-aminopropyl)trimethoxysilane, APTMS)을 에탄올에 소정 비율로 희석한 용액을 준비하는 단계;
미세 유체 칩과 다공성 비드를 상기 용액에 소정 시간동안 담가 잔기가 아민(amine)인 상기 자기조립단분자막을 상기 미세 유체 칩과 다공성 비드에 결합시키는 단계;
상기 미세 유체 칩과 다공성 비드를 세정하는 단계;
플라즈마 식각을 실시하여 일부 영역의 아민 잔기를 제거하는 단계; 및
상기 아민 잔기와 화학 결합을 할 수 있는 1,4-페닐렌 디이소티오시아네이트(1,4-phenylene diisothiocynate)를 이용하여 상기 화학 결합에 의해 미세 유체 칩의 비드 고정부에 비드 고정 패턴을 형성하는 단계;
를 포함하는 세포 기반 주화성 키트의 제조 방법
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제6항 내지 제 9항 및 제 11항 중 어느 한 항에서,
상기 다공성 비드를 상기 미세 유체 칩의 비드 고정부에 배치하는 단계는 세포가 배양된 미세 유체의 단차에 의해 상기 다공성 비드를 고정하는 방법을 포함하는 세포 기반 주화성 키트의 제조 방법
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제14항에서,
상기 세포가 배양된 미세 유체의 단차에 의해 상기 다공성 비드를 고정하는 방법은,
미세 채널 내에서 세포를 배양하는 단계;
혈장이 없는 배지로 교체하는 단계;
소정 시간 동안 인큐베이터에서 보관하는 단계; 및
특정 약물이 주입된 다공성 비드를 주입구를 통해 흘려보내어 상기 다공성 비드를 비드 고정부에 고정하는 단계
를 포함하는 세포 기반 주화성 키트의 제조 방법
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