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S1) 미생물 발효를 통해 히알루론산을 포함하는 미생물 배양액을 제조하는 단계;S2) 상기 히알루론산을 포함하는 미생물 배양액에 염화나트륨 수용액 및 수산화나트륨 수용액을 첨가하는 단계;S3) 상기 수산화나트륨 수용액이 첨가된 미생물 배양액으로부터 균체 및 부유 불순물을 제거하는 단계;S4) 상기 균체가 제거된 미생물 배양액을 여과 및 투석하여 정제된 히알루론산 수용액을 얻는 단계; 및S5) 상기 정제된 히알루론산 수용액에 유기용매를 첨가하여 히알루론산을 침전시키고 건조하여 분말형태의 히알루론산 나트륨을 얻는 단계;를 포함하되, 상기 S2)단계의 상기 수산화나트륨 수용액은 상기 미생물 배양액의 pH가 12 내지 14가 되도록 첨가되고, 상기 S5)단계의 히알루론산 나트륨은 분자량이 300 내지 500kDa인 것을 특징으로 하는 저분자량 히알루론산 나트륨의 제조방법
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제1항에 있어서,상기 S1)단계의 미생물은 스트렙토코커스 이퀴, 스트렙토코커스 주에피데미커스 및 스트렙토코커스 파이오젠 중 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 저분자량 히알루론산 나트륨의 제조방법
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제1항에 있어서,상기 S1)단계의 미생물은 히알루론산 생산균인 스트렙토코커스 주에피데미커스(streptococcus equi subsp
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제1항에 있어서,상기 S1)단계의 미생물 발효는 종배양 단계, 계대배양 단계 및 본배양 단계를 통해 수행되는 것을 특징으로 하는 저분자량 히알루론산 나트륨의 제조방법
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제1항에 있어서,상기 S2)단계의 염화나트륨 수용액은 미생물 배양액에 1:0
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제1항에 있어서,상기 S3)단계의 고속원심분리는 8,000 내지 15,000rpm에서 30~60분 동안 수행되는 것을 특징으로 하는 저분자량 히알루론산 나트륨의 제조방법
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제1항에 있어서,상기 S4)단계의 여과는 제균필터를 사용하여 수행되며, 투석은 MWCO(molecular weight cut off) 12,000 내지 14,000Da인 투석막을 사용하여 24 내지 40시간 동안 수행되는 것을 특징으로 하는 저분자량 히알루론산 나트륨의 제조방법
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제1항에 있어서,상기 S5)단계의 유기용매는 에탄올, 메탄올, 아세톤 및 이소프로필알코올 중 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 저분자량 히알루론산 나트륨의 제조방법
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