도 1로 표시되며, 삽입될 외래 유전자를 E3(early region 3) 프로모터 또는 메이져 래이트 프로모터(major late promoter)하에서 발현시키기 위한 재조합 발현벡터 pHAVE3에 있어서,

상기 발현벡터 pHAVE3는 사람아데노바이러스 2형 유래의 E3 유전자 위치에서 5'영역에 해당하는 pVⅢ유전자와 E3 유전자의 19kd 오픈 리딩 프레임(open reading frame)의 ATG전까지(27,100∼28,811bp)를 포함하며, 크기가 1,689base인 제한 효소 SpeⅠ-BamHⅠ 단편의 pVⅢ와, 사람 아데노바이러스 2형 유래의 E3 유전자 위치에서 3'영역의 E3-2 폴리아데닐레이션 시그널(polyadenylation signal)부위 이후(30,851∼32,760bp)에 해당하며, 크기가 1,797base인 제한 효소 BamHⅠ-SpeⅠ단편의 Fiber를 순서대로 포함함을 특징으로 하는 벡터 pHAVE3

제 1항에 있어서, 외래 유전자는 발현벡터 pHAVE3의 1764bp의 BamHⅠ사이트에 삽입되며, 상기 외래 유전자는 돼지 오제스키병 바이러스의 중요 방어 항원을 코딩하는 gp50 유전자임을 특징으로 하는 벡터

제 1항에 있어서, 상기 pVⅢ는 프라이머 pVⅢF; 5'-ATACTGCGCGCTGACTCTTA-3'와 프라이머 pVⅢR; 5'-CGGGATCCCTTGGATGTTGCCCCCAGCGTT -3'를 사용하여 폴리머라제 연쇄반응(polymerase chain reaction; PCR)으로 증폭시킨 것이며, 도 2의 서열로 표시되는 것임을 특징으로 하는 벡터

제 1항에 있어서, 상기 Fiber 는 프라이머 FibF; 5'-CGGGATCCCTTACTTAAAAT CAGTCAGC-3'와 프라이머 FibR; 5'-GGAGAAGGTGTAAGAGTTGG -3'를 사용하여 PCR 반응으로 증폭시킨 것이며, 도 3의 서열로 표시되는 것임을 특징으로 하는 벡터

(1) 제 2항에 기재된 발현벡터의 pVⅢ-돼지 오제스키병 바이러스 gp50 유전자-Fiber 부위를 SpeⅠ으로 절단하는 단계;

(2) 플라스미드 p5-3E를 NcoⅠ으로 절단한 것과 사람아데노바이러스 2형 게놈 유전자를 대장균내에서 동질성 재조합(homologous recombination)하여 제작한 pHAVW의 E3 위치를 SwaI으로 절단하여 선형화 DNA를 얻는 단계;

(3) 상기 (1)단계의 유전자와 상기 (2) 단계의 선형화 DNA를 대장균내에서 동질성 재조합하여 재조합 사람아데노바이러스 2형을 클로닝하는 단계; 및

(4) 클로닝된 재조합 사람아데노바이러스 2형을 SanBⅠ으로 절단한 후, 이를 포유동물세포에 형질도입시켜 gp50 유전자 재조합 사람아데노바이러스 2형을 선발하는 단계;

를 포함함을 특징으로 하는 gp50 유전자 재조합 사람아데노바이러스 2형의 선발방법

제 5항에 있어서, 플라스미드 p5-3E는 사람아데노바이러스 2형 게놈 유전자의 왼쪽 말단 ITR 영역에 해당하는 2,256bp 부위와 오른쪽 말단 ITR영역에 해당하는 2,220bp부위를 각각 PCR 반응으로 증폭한 후 pPOLYsn14에 삽입한 것임을 특징으로 하는 선발방법