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하기 단계를 포함하는 마이코플라즈마(Mycoplasma) 오염 유무 확인 방법:(a) 시료(sample)로부터 유전체 DNA(genomic DNA)를 추출하는 단계;(b) 상기 추출된 유전체 DNA, 서열번호 1의 염기서열로 구성되는 전방향 프라이머(forward primer) 및 서열번호 2의 염기서열로 구성되는 역방향 프라이머(reverse primer)를 포함하는 프라이머 세트(Primer set), 및 서열번호 9의 염기서열로 구성되는 프로브(Probe)를 포함하는 실시간 중합효소연쇄반응(Real-Time Polymerase Chain Reaction)액을 제조하는 단계; 및(c) 실시간 중합효소연쇄반응을 수행하는 단계
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제1항에 있어서,상기 (b) 단계의 실시간 중합효소연쇄반응액은 염화마그네슘(MgCl2)을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는, 방법
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제1항에 있어서,상기 프로브는 5` 말단에 형광발색제(fluorescent reporter dye)가 표지되고 3` 말단에는 소광제(quencher)가 표지된 마이코플라즈마에 상보적으로 결합할 수 있는 서열을 가지는 것을 특징으로 하는, 방법
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제4항에 있어서,상기 형광발색제는 carboxyfluorescein (FAM), 2,7-dimethoxy-4,5-dichloro-6-carboxyfluoroscein (JOE), 5-Carboxytetramethylrhodamine (TAMRA), indocarbocyanine-3 (Cy3), indocarbocyanine-5 (Cy5), 및 6-Carboxy-X-rhodamine (Rox) 으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 방법
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제4항에 있어서,상기 소광제는 Black Hole Quencher 1 (BHQ-1), Black Hole Quencher 2 (BHQ-2), Black Hole Quencher 3 (BHQ-3), 5-Carboxytetramethylrhodamine (TAMRA), deep dark Quencher 1 (DDQ1), 및 deep dark Quencher 2 (DDQ2)로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 방법
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제1항에 있어서,상기 마이코플라즈마는 아코레플라즈마 라이드로우이(A
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서열번호 1 및 서열번호 2의 염기서열로 구성되는 프라이머 세트; 및 서열번호 9의 염기서열로 구성되는 프로브(Probe)를 포함하는 마이코플라즈마 오염 유무 확인용 키트
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