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서열번호 1로 표시되는 발현 카세트(expression cassette)
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제1항에 있어서, 상기 발현 카세트는 (a) T7 프로모터, (b) Lac 오퍼레이터(operator), (c) 리보좀 결합부위(Ribosome binding site, RBS), (d) 멀티 클로닝 부위(multiple cloning site), (e) T7 전사종결부위(T7 transcription terminator, TT), (f) BamHI 절단부위, 및 (g) XhoI 절단부위가 순차적으로 구성된 것을 특징으로 하는 발현 카세트
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제2항에 있어서, 상기 멀티 클로닝 부위에는 SpeI 및 HindIII 절단부위가 포함된 것을 특징으로 하는 발현 카세트
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제1항의 발현 카세트에 외래 유전자가 삽입되어 있는 발현 카세트
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제4항의 외래 유전자가 삽입되어 있는 발현 카세트를 복수 개 함유하는 멀티-모노시스트로닉 발현벡터(multi-monocistronic vector)
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제5항의 멀티-모노시스트로닉 발현벡터가 도입되어 있는 재조합 미생물
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제1항의 발현 카세트에 2-데옥시스트렙타민(2-deoxystreptamine)의 생합성에 필요한 효소의 유전자가 삽입되어 있는 발현 카세트
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제7항에 있어서, 상기 효소는 2-디옥시-실로-이노소스 합성효소(2-deoxy-D-scyllo-inosose synthase, DOI synthase)인 것을 특징으로 하는 발현 카세트
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제7항에 있어서, 상기 효소는 아미노트렌스퍼레이즈(Aminotransferase)인 것을 특징으로 하는 발현 카세트
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제7항에 있어서, 상기 효소는 디하이드로게네이즈(dehydrogenase)인 것을 특징으로 하는 발현 카세트
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제8항 내지 제10항의 발현 카세트가 모두 삽입되어 있는 2-데옥시스트렙타민(2-deoxystreptamine) 제조용 멀티-모노시스트로닉 발현벡터(multi-monocistronic vector)
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제11항의 멀티-모노시스트로닉(Multi-monocistroric) 발현벡터가 도입되어 있고, 2-데옥시스트렙타민(2-deoxystreptamine) 생성능을 가지는 재조합 미생물
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제12항에 있어서, 상기 미생물은 대장균인 것을 특징으로 하는 재조합 미생물
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제13항에 있어서, 상기 대장균은 글루코즈-6-포스페이트 아이소머레이즈(glucose-phosphate isomerase, pgi)가 결실되어 있는 것임을 특징으로 하는 재조합 미생물
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제14항에 있어서, 추가로 GroESL 차페론(chaperone)이 도입된 것임을 특징으로 하는 재조합 미생물
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제8항에 있어서, 상기 효소를 코딩하는 유전자는 btrC인 것을 특징으로 하는발현 카세트
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제9항에 있어서, 상기 효소를 코딩하는 유전자는 btrS인 것을 특징으로 하는 발현 카세트
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제10항에 있어서, 상기 효소를 코딩하는 유전자는 btrN인 것을 특징으로 하는 발현 카세트
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다음의 단계를 포함하는 2-데옥시스트렙타민(2-deoxystreptamine)의 제조방법:(a) 제12항의 재조합 미생물을 배양하여 2-데옥시스트렙타민(2-deoxystreptamine)를 생성시키는 단계; 및(b) 상기 미생물 배양액으로부터 2-데옥시스트렙타민(2-deoxystreptamine)를 회수하는 단계
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제19항에 있어서, 배양온도는 15℃인 것을 특징으로 하는 2-데옥시스트렙타민(2-deoxystreptamine)의 제조방법
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제19항에 있어서, 상기 미생물은 대장균인 것을 특징으로 하는 2-데옥시스트렙타민(2-deoxystreptamine)의 제조방법
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제21항에 있어서, 상기 대장균은 글루코즈-6-포스페이트 아이소머레이즈(glucose-phosphate isomerase, pgi)가 결실되어 있는 것임을 특징으로 하는 2-데옥시스트렙타민(2-deoxystreptamine)의 제조방법
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제22항에 있어서, 추가로 GroESL 차페론(chaperone)이 도입되어 있는 것임을 특징으로 하는 2-데옥시스트렙타민(2-deoxystreptamine)의 제조방법
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