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당으로부터 UDP-글루코오스를 생합성하는 경로를 가지고 있는 대장균에 플라본-3-수산화효소(flavanone-3-hydroxylase)를 코딩하는 유전자, 플라본 생성효소(flavonone synthase)를 코딩하는 유전자, 포스포글루코무타아제(phosphoglucomutase)를 코딩하는 유전자, 포도당-1-인산 우리딜일전달효소(glucose-1-phosphate uridylyltransferase)를 코딩하는 유전자 및 UDP-글리코실전달효소(UDP-glycosyltransferase, UGT)를 코딩하는 유전자가 도입되어 있고 나린제린을 기질로 하여 하기 화학식 1로 표현되는 아스트라갈린 생성능을 가지는 재조합 대장균
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제1항에 있어서, 플라본-3-수산화효소(flavanone-3-hydroxylase)를 코딩하는 유전자, 플라본 생성효소(flavonone synthase)를 코딩하는 유전자, 포스포글루코무타아제(phosphoglucomutase)를 코딩하는 유전자, 및 포도당-1-인산 우리딜일전달효소(glucose-1-phosphate uridylyltransferase)를 코딩하는 유전자는 각각 Atf3h, Atfls1, nfa44530, 및 galU인 것을 특징으로 하는 재조합 대장균
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제1항에 있어서, UDP-글리코실전달효소(UDP-glycosyltransferase, UGT)를 코딩하는 유전자는 UGT78K1 또는 At5g17050인 것을 특징으로 하는 재조합 대장균
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제1항에 있어서, 상기 UDP-글리코실전달효소(UDP-glycosyltransferase, UGT)는 애기장대풀(Arabidopsis thaliana) 유래인 것을 특징으로 하는 재조합 대장균
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제1항 내지 제3항 및 제5항 중 어느 한 항의 재조합 대장균을 이용하여, 나린제닌으로부터 아스트라갈린을 제조하는 방법
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제6항에 있어서, 다음 단계를 거치는 것을 특징으로 하는 아스트라갈린의 제조방법:(a) 나린제닌을 플라본-3-수산화효소(flavanon-3-hydroxylase) 및 플라본 생성효소(flavonone synthase)에 의해, 캄페롤으로 전환시키는 단계: 및(b) 상기 전환된 캄페롤을 UDP-글루코실전달효소(UDP-glycosyltransferase, UGT)로 글루코실화하여 아스트라갈린으로 전환시키는 단계
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당으로부터 UDP-글루코오스를 생합성하는 경로를 가지고 있는 대장균에서 글루코오스 인산 이성질화효소(glucose phosphate isomerase), D-글루코오스-6-인산 탈수소효소(D-glucose-6-phosphate dehydrogenase), 및 UDP-글루코오스 가수분해효소(UDP-glucose hydrolase)를 코딩하는 유전자 중 하나 이상이 결실되어 있고, 플라본-3-수산화효소(flavanone-3-hydroxylase)를 코딩하는 유전자, 플라본 생성효소(flavonone synthase)를 코딩하는 유전자, 포스포글루코무타아제(phosphoglucomutase)를 코딩하는 유전자, 포도당-1-인산 우리딜일전달효소(glucose-1-phosphate uridylyltransferase)를 코딩하는 유전자 및 UDP-글리코실전달효소(UDP-glycosyltransferase, UGT)를 코딩하는 유전자가 도입되어 있으며, 나린제린을 기질로 하여 아스트라갈린 생성능을 가지는 대장균 변이체
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제8항에 있어서, 글루코오스 인산 이성질화효소(glucose phosphate isomerase), D-글루코오스-6-인산 탈수소효소(D-glucose-6-phosphate dehydrogenase), 및 UDP-글루코오스 가수분해효소(UDP-glucose hydrolase)를 코딩하는 유전자는 각각 pgi, zwf, 및 ushA인 것을 특징으로 하는 대장균 변이체
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제8항에 있어서, 플라본-3-수산화효소(flavanone-3-hydroxylase)를 코딩하는 유전자, 플라본 생성효소(flavonone synthase)를 코딩하는 유전자, 포스포글루코무타아제(phosphoglucomutase)를 코딩하는 유전자, 및 포도당-1-인산 우리딜일전달효소(glucose-1-phosphate uridylyltransferase)를 코딩하는 유전자는 각각 Atf3h, Atfls1, nfa44530, 및 galU인 것을 특징으로 하는 대장균 변이체
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제8항에 있어서, UDP-글리코실전달효소(UDP-glycosyltransferase, UGT)를 코딩하는 유전자는 UGT78K1 또는 At5g17050인 것을 특징으로 하는 대장균 변이체
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제8항에 있어서, 상기 UDP-글리코실전달효소(UDP-glycosyltransferase)는 애기장대풀(Arabidopsis thaliana) 유래인 것을 특징으로 하는 대장균 변이체
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제8항 내지 제11항 및 제13항 중 어느 한 항의 대장균 변이체를 이용하여, 나린제닌으로부터 아스트라갈린의 제조방법
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제14항에 있어서, 다음 단계를 거치는 것을 특징으로 하는 아스트라갈린의 제조방법:(a) 나린제닌을 플라본-3-수산화효소(flavanon-3-hydroxylase) 및 플라본 생성효소(flavonone synthase)에 의해, 캄페롤으로 전환시키는 단계: 및(b) 상기 전환된 캄페롤을 UDP-글루코실전달효소(UDP-glycosyltransferase, UGT)로 글루코실화하여 아스트라갈린으로 전환시키는 단계
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제14항에 있어서, 상기 대장균 변이체를 1%의 만노스(mannose), 1%의 과당(fructose), 1%의 글리세롤(glycerol), 및 1%의 글루코오스(glucose)가 포함된 TB 배지에서 배양하는 것을 특징으로 하는 아스트라갈린의 제조방법
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