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다음 단계들을 포함하는 항원제시세포인 성숙수지상세포(Dendritic cells)를 제조하는 방법:a) 혈액의 백혈구로 부터 말초혈액단핵세포(PBMC)를 분리하는 단계;b) 상기 말초혈액단핵세포로부터 단세포(monocyte)를 분리하는 단계;c) 상기 단세포를 배양하여 미성숙 수지상세포로 분화시키는 단계;d) 상기 미성숙 수지상세포에 전기천공법(electroporation)으로 종양항원(단백질)을 탑재시키는 단계; 및e) 상기 항원이 탑재된 미성숙 수지상세포를 하이드로젤(Hydrogel)이 코팅된 배양용기에 넣고 배양하여 성숙 수지상세포로 분화시키는 단계
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제 1항에 있어서, 상기 a) 단계의 말초혈액단핵세포의 분리는 원심분리를 이용하는 것을 특징으로 하는 항원제시세포인 성숙 수지상세포를 제조하는 방법
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제 1항에 있어서, 상기 b) 단계의 단세포의 분리는 배양용기 부착법(plastic-adherent), 맥스 마이크로비드법(MACS MicroBeads), 또는 밀도구배법(Density Gradient)을 이용하는 것을 특징으로 하는 항원제시세포인 성숙 수지상세포를 제조하는 방법
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제 1항에 있어서, 상기 c) 단계의 배양은 rhIL-4 및 rhGM-CSF가 첨가된 무동물혈청 배지에서 배양하는 것을 특징으로 하는 항원제시세포인 성숙 수지상세포를 제조하는 방법
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제 1항에 있어서, 상기 d) 단계의 전기천공법은 미성숙 수지상세포와 종양항원(단백질)을 혼합한 후 스퀘어웨이브 펄스(square wave pulse)을 이용하는 것을 특징으로 하는 항원제시세포인 성숙 수지상세포를 제조하는 방법
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제 1항에 있어서, 상기 e) 단계의 하이드로젤 코팅은 PolyHEMA (poly(2-hydroxyethyl metacrylate)) 하이드로젤 코팅 물질을 이용하는 것을 특징으로 하는 항원제시세포인 성숙 수지상세포를 제조하는 방법
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제 1항에 있어서, 상기 e) 단계의 배양은 성숙유도인자를 첨가하여 배양하는 것을 특징으로 하는 항원제시세포인 성숙 수지상세포를 제조하는 방법
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제 7항에 있어서, 상기 성숙유도인자는 TNF-α, IL-1β, IL-6 및 PGE2인 것을 특징으로 하는 항원제시세포인 성숙 수지상세포를 제조하는 방법
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제 1항에 있어서, 상기 하이드로젤 코팅은 하이드로젤 코팅을 하지 않은 것에 비해 성숙 수지상세포의 제조 수율(yield)를 향상시키는 것을 특징으로 하는 항원제시세포인 성숙 수지상세포를 제조하는 방법
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제 1항에 있어서, 상기 하이드로젤 코팅은 하이드로젤 코팅을 하지 않은 것에 비해 수지상세포의 성숙 마커인 CD83 표면항원의 발현을 향상시키는 것을 특징으로 하는 항원제시세포인 성숙 수지상세포를 제조하는 방법
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제 1항에 있어서, 상기 하이드로젤 코팅은 하이드로젤 코팅을 하지 않은 것에 비해 수지상세포의 기능을 나타내는 사이토카인(IL-12 및 IFN-r)의 생성을 향상시키는 것을 특징으로 하는 항원제시세포인 성숙 수지상세포를 제조하는 방법
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제 1항에 있어서, 상기 전기천공법은 전기천공법은 하지 않은 것에 비해 수지상세포의 성숙 마커인 CD83 표면항원의 발현을 향상시키고, 수지상세포의 기능을 나타내는 사이토카인(IL-12 및 IFN-r)의 생성을 향상시키는 것을 특징으로 하는 항원제시세포인 성숙 수지상세포를 제조하는 방법
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제 1항에 따른 제조방법으로 분화시킨 성숙수지상세포를 유효성분으로 함유하는 암 면역세포치료제 조성물
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