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신규 재조합 배큘로바이러스 발현벡터 및 이를 이용한효소의 제조방법

  • 기술번호 : KST2015218468
  • 담당센터 : 서울서부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-6124-6930
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 곤충세포를 숙주로 하는 재조합 배큘로바이러스 발현벡터 및 이를 이용한 다양한 효소의 제조방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 배큘로바이러스의 다각체 프로모터, 상기 프로모터의 다운스트림에 위치한 시그널 펩타이드를 암호화하는 서열, 상기 시그널 펩타이드를 암호화하는 서열의 다운스트림에 위치한 IgG 결합 도메인을 암호화하는 서열, 상기 IgG 결합 도메인을 암호화하는 서열의 다운스트림에 위치한 제한효소 자리가 있는 클로닝 부위, 상기 클로닝 부위의 다운스트림에 위치한 전사 종결 서열, 상기 배큘로바이러스의 다각체 프로모터의 업스트림에 위치한 트랜스포존의 양 말단 반복서열 중 한 서열, 상기 전사 종결 서열의 다운스트림에 위치한 트랜스포존의 양 말단 반복서열 중 다른 서열 및 선택표지로서의 항생제 내성 유전자를 포함하는 재조합 배큘로바이러스 발현벡터 및 이를 이용한 효소의 제조방법에 관한 것이다.배큘로바이러스, 발현벡터, 시알산전이효소, 곤충세포
Int. CL C12N 15/866 (2006.01)
CPC C12N 15/866(2013.01) C12N 15/866(2013.01) C12N 15/866(2013.01) C12N 15/866(2013.01)
출원번호/일자 1020010024788 (2001.05.08)
출원인 학교법인 서강대학교
등록번호/일자 10-0446010-0000 (2004.08.17)
공개번호/일자 10-2002-0085326 (2002.11.16) 문서열기
공고번호/일자 (20040825) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2001.05.08)
심사청구항수 19

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 학교법인 서강대학교 대한민국 서울특별시 마포구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 양재명 대한민국 서울특별시강남구
2 김형구 대한민국 서울특별시노원구
3 최용주 대한민국 서울특별시서초구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 최홍순 대한민국 서울특별시 금천구 가산디지털*로 *** (가산동, 월드메르디앙벤처센터II)(특허법인세신)
2 김경철 대한민국 서울특별시 금천구 가산디지털*로 *** (가산동, 월드메르디앙벤처센터II)(특허법인세신)
3 양부현 대한민국 서울특별시 송파구 오금로 **, 태원빌딩 **층, 특허팀(주식회사씨젠)
4 특허법인세신 대한민국 서울특별시 금천구 가산디지털*로 *** (가산동, 월드메르디앙벤처센터II)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 서강대학교산학협력단 서울특별시 마포구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 특허출원서
Patent Application
2001.05.08 수리 (Accepted) 1-1-2001-0105383-72
2 전자문서첨부서류제출서
Submission of Attachment to Electronic Document
2001.05.10 수리 (Accepted) 1-1-2001-5133835-47
3 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2002.02.05 수리 (Accepted) 4-1-2002-0013061-88
4 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2003.01.15 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
5 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2003.02.24 수리 (Accepted) 9-1-2003-0007075-71
6 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2003.11.28 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2003-0477338-12
7 명세서 등 보정서
Amendment to Description, etc.
2004.01.28 보정승인 (Acceptance of amendment) 1-1-2004-0032737-55
8 의견서
Written Opinion
2004.01.28 수리 (Accepted) 1-1-2004-0032738-01
9 등록결정서
Decision to grant
2004.05.17 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2004-0190867-90
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2005.05.02 수리 (Accepted) 4-1-2005-5043440-79
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1

배큘로바이러스의 다각체 프로모터, 상기 프로모터의 다운스트림에 위치한 IgM 시그널 펩타이드를 암호화하는 서열, 상기 IgM 시그널 펩타이드를 암호화하는 서열의 다운스트림에 위치한 IgG 결합 도메인을 암호화하는 서열, 상기 IgG 결합 도메인을 암호화하는 서열의 다운스트림에 위치한 제한효소 자리가 있는 클로닝 부위, 상기 클로닝 부위의 다운스트림에 위치한 전사 종결 서열, 상기 배큘로바이러스의 다각체 프로모터의 업스트림에 위치한 트랜스포존의 양 말단 반복서열 중 한 서열, 상기 전사 종결 서열의 다운스트림에 위치한 트랜스포존의 양 말단 반복서열 중 다른 서열 및 선택표지로서의 항생제 내성 유전자를 포함하는 재조합 배큘로바이러스 발현벡터

2 2

제 1 항에 있어서, 상기 시그널 펩타이드를 암호화하는 서열은 IgM 시그널 펩타이드, GP64 시그널 펩타이드 및 꿀벌의 멜리틴 시그널 펩타이드로 구성된 그룹으로부터 선택되는 시그널 펩타이드를 암호화하는 서열인 것을 특징으로 하는 재조합 배큘로바이러스 발현벡터

3 3

제 1 항에 있어서, 상기 IgG 결합 도메인은 스태파이로코커스 오리우스 (Staphylococcus aureus)의 단백질 A에서 유래된 것임을 특징으로 하는 재조합 배큘로바이러스 발현벡터

4 4

제 1 항에 있어서, 상기 트랜스포존의 반복서열은 Tn1, Tn2, Tn3, Tn4, Tn5, Tn7, Tn9 및 Tn10으로 구성된 그룹으로부터 선택되는 트랜스포존으로부터 유래된 것임을 특징으로 하는 재조합 배큘로바이러스 발현벡터

5 5

제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 발현벡터는 상기 클로닝 부위에 당전이효소, 사이토카인 및 바이러스 구조 당단백질로 구성된 그룹으로부터 선택되는 효소를 암호화하는 외래 유전자가 추가적으로 포함되어 있는 것을 특징으로 하는 재조합 배큘로바이러스 발현벡터

6 6

제 5 항에 있어서, 상기 당전이효소를 암호화 하는 외래 유전자는 시알산전이효소를 암호화 하는 외래 유전자인 것을 특징으로 하는 재조합 배큘로바이러스 발현벡터

7 7

제 6 항에 있어서, 상기 시알산전이효소를 암호화 하는 외래 유전자는 시그널 펩타이드, 세포질 꼬리 부위 및 막통과 도메인이 제거된 활성 도메인만을 암호하는 유전자인 것을 특징으로 하는 재조합 배큘로바이러스 발현벡터

8 8

다음과 같은 단계를 포함하는 곤충세포에서 외래 효소의 발현방법:

(ⅰ) 배큘로바이러스의 다각체 프로모터, 상기 프로모터의 다운스트림에 위치한 시그널 펩타이드를 암호화하는 서열, 상기 시그널 펩타이드를 암호화하는 서열의 다운스트림에 위치한 IgG 결합 도메인을 암호화하는 서열, 상기 IgG 결합 도메인을 암호화하는 서열의 다운스트림에 위치한 특정 효소를 암호화하는 외래 유전자, 상기 외래 유전자의 다운스트림에 위치한 전사 종결 서열, 상기 배큘로바이러스의 다각체 프로모터의 업스트림에 위치한 트랜스포존의 양 말단 반복서열 중 한 서열, 상기 전사 종결 서열의 다운스트림에 위치한 트랜스포존의 양 말단 반복서열 중 다른 서열 및 선택표지로서의 항생제 내성 유전자를 포함하는 재조합 배큘로바이러스 발현벡터로 배큘로바이러스 지놈 DNA 및 상기 트랜스포존의 반복서열과 동종의 트랜스포존 활성서열을 갖는 백미드를 포함하고 있는 세포를 형질전환시켜 재조합 백미드를 형성시키는 단계;

(ⅱ) 상기 재조합 백미드를 세포로부터 분리하는 단계;

(ⅲ) 상기 분리된 재조합 백미드를 곤충세포에 형질감염시키는 단계; 및

(ⅳ) 상기 형질감염된 곤충세포를 배양하는 단계

9 9

제 8 항에 있어서, 상기 발현방법은 (ⅴ) 형질감염된 곤충세포로부터 재조합 배큘로바이러스를 분리하고 이를 곤충세포에 2차로 형질감염시키는 단계; 및 (ⅵ) 형질감염된 곤충세포를 배양하는 단계를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 곤충세포에서 외래 효소의 발현방법

10 10

제 8 항에 있어서, 상기 시그널 펩타이드를 암호화하는 서열은 IgM 시그널 펩타이드, GP64 시그널 펩타이드 및 꿀벌의 멜리틴 시그널 펩타이드로 구성된 그룹으로부터 선택되는 시그널 펩타이드를 암호화하는 서열인 것을 특징으로 하는 곤충세포에서 외래 효소의 발현방법

11 11

제 8 항에 있어서, 상기 IgG 결합 도메인은 스태파이로코커스 오리우스 (Staphylococcus aureus)의 단백질 A에서 유래된 것임을 특징으로 하는 곤충세포에서 외래 효소의 발현방법

12 12

제 8 항에 있어서, 상기 재조합 배큘로바이러스 발현벡터내에 삽입되어 있는 외래 유전자는 당전이효소, 사이토카인 및 바이러스 구조 당단백질로 구성된 그룹으로부터 선택되는 효소를 암호화하는 유전자인 것을 특징으로 하는 곤충세포에서 외래 효소의 발현방법

13 13

제 12 항에 있어서, 상기 당전이효소를 암호화 하는 유전자는 시알산전이효소를 암호화 하는 유전자인 것을 특징으로 하는 곤충세포에서 외래 효소의 발현방법

14 14

제 13 항에 있어서, 상기 시알산전이효소를 암호화 하는 외래 유전자는 시그널 펩타이드, 세포질 꼬리 부위 및 막통과 도메인이 제거된 활성 도메인만을 암호하는 유전자인 것을 특징으로 하는 곤충세포에서 외래 효소의 발현방법

15 15

제 8 항에 있어서, 상기 트랜스포존의 반복서열은 Tn1, Tn2, Tn3, Tn4, Tn5, Tn7, Tn9 및 Tn10으로 구성된 그룹으로부터 선택되는 트랜스포존으로부터 유래된 것임을 특징으로 하는 곤충세포에서 외래 효소의 발현방법

16 16

제 8 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 곤충세포는 SF-9, SF-21, 하이 파이브 세포, Tn-368 및 Tn-368A로 구성된 그룹으로부터 선택되는 세포인 것을 특징으로 하는 곤충세포에서 외래 효소의 발현방법

17 17

상기 제 8 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 따른 곤충세포에서의 발현방법에 의해 발현된 외래 효소를 함유하는 배양물을 정제하는 단계를 포함하는 외래 효소의 제조방법

18 18

제 17 항에 있어서, 상기 곤충세포는 SF-9, SF-21, 하이 파이브 세포, Tn-368 및 Tn-368A로 구성된 그룹으로부터 선택되는 세포인 것을 특징으로 하는 곤충세포에서 외래 효소의 외래 효소의 제조방법

19 19

제 17 항에 있어서, 상기 정제 단계는 상기 발현된 외래 효소에 결합되어 있는 IgG 결합 도메인에 대하여 친화성을 나타내는 IgG가 결합된 레진으로 충진된 컬럼을 이용하여 실시되는 것을 특징으로 하는 외래 효소의 제조방법

지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
국가 R&D 정보가 없습니다.