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PNA 프로브를 이용한 표적 미생물 종의 증폭 억제를 통한 메타지놈 라이브러리 제작 방법(Method of preparing metagenomic library by inhibiting amplification of target microbial species using PNA probe)

  • 기술번호 : KST2015226204
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 우점하는 미생물 종의 증폭을 억제하기 위한 펩티드 핵산(PNA) 세트 및 이를 이용한 메타지놈 라이브러리 제작 방법에 관한 것으로, 더욱 구체적으로는 일반적인 메타지놈 분석을 통해 얻어진 상위 3개 미생물 종의 고유한 염기서열을 포함하여 이루어진 하나 이상의 PNA 프로브를 라이브러리 제작에 첨가하고 제작 조건을 변화시켜 표적 미생물 종의 증폭을 억제하는 것이 특징이다. 본 발명은 DNA와의 결합력이 우수한 PNA 프로브를 이용하여 우점하는 미생물 종이 차지하는 비율을 줄여줌으로써, 새로운 미생물 종의 발견과 메타지놈 분석을 간편하고 정확하게 판별할 수 있는 효과가 있다.
Int. CL C40B 40/06 (2006.01.01) C12Q 1/68 (2018.01.01)
CPC C40B 40/06(2013.01) C40B 40/06(2013.01) C40B 40/06(2013.01)
출원번호/일자 1020140056745 (2014.05.12)
출원인 주식회사 시선바이오머티리얼스, 배재대학교 산학협력단
등록번호/일자 10-1609295-0000 (2016.03.30)
공개번호/일자 10-2015-0129554 (2015.11.20) 문서열기
공고번호/일자 (20160406) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2014.05.12)
심사청구항수 7

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 주식회사 시선바이오머티리얼스 대한민국 대전광역시 유성구
2 배재대학교 산학협력단 대한민국 대전광역시 서구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 송민식 대한민국 대전광역시 유성구
2 박희경 대한민국 대전광역시 유성구
3 허덕회 대한민국 강원도 평창군
4 박재신 대한민국 대전광역시 유성구
5 채순기 대한민국 대전광역시 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인 플러스 대한민국 대전광역시 서구 한밭대로 ***번지 (둔산동, 사학연금회관) **층

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 주식회사 시선바이오머티리얼스 대전광역시 유성구
2 배재대학교 산학협력단 대전광역시 서구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2014.05.12 수리 (Accepted) 1-1-2014-0444801-22
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2014.10.07 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2014.11.12 수리 (Accepted) 9-1-2014-0089529-88
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2015.10.19 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2015-0715915-99
5 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2015.12.15 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2015-1225285-05
6 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2015.12.15 수리 (Accepted) 1-1-2015-1225293-60
7 [대리인선임]대리인(대표자)에 관한 신고서
[Appointment of Agent] Report on Agent (Representative)
2015.12.15 수리 (Accepted) 1-1-2015-1225154-22
8 등록결정서
Decision to grant
2016.02.29 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0154483-42
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.09.05 수리 (Accepted) 4-1-2019-5185262-28
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.09.17 수리 (Accepted) 4-1-2019-5194541-73
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.03.12 수리 (Accepted) 4-1-2020-5059428-57
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
하기 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 인간 장내 미생물 검출용 메타지놈 라이브러리 제작 방법: (a) 표적 핵산이 포함되어 있는 검체 시료에 표적 핵산과 상보적으로 결합하는 PNA 프로브 및 프라이머를 혼합시켜, 표적 핵산의 증폭을 억제시키는 단계; 및 (b) 상기 증폭된 산물을 정제한 후, 차세대 염기서열 분석(Next Generation Sequencing; NGS)을 위한 라이브러리를 제작하는 단계; 및(c) 차세대 염기서열 분석방법으로 상기 메타지놈 라이브러리를 분석하는 단계;에 있어서,상기 PNA 프로브는 서열번호 11 내지 13으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나; 서열번호 14 또는 15; 및 서열번호 16 내지 18로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 조합을 포함하고,상기 프라이머는 서열번호 1의 염기서열을 갖는 정방향 프라이머와 서열번호 2 내지 10으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 염기서열을 갖는 역방향 프라이머인 인간 장내 미생물 검출용 메타지놈 라이브러리 제작 방법
2 2
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3 3
삭제
4 4
제 1항에 있어서, (a) 단계는 PNA 프로브와 표적 핵산과 완전히 혼성화(perfect match)를 이루면 표적 핵산의 증폭이 억제되고, PNA 프로브와 표적 핵산이 불완전 혼성화(mismatch)를 이루면 표적 핵산의 증폭 산물이 생성되는 단계인 것을 특징으로 하는 메타지놈 라이브러리 제작 방법
5 5
제 1항에 있어서, 상기 PNA 프로브는 1~1000 nM의 농도로 첨가되는 것을 특징으로 하는 메타지놈 라이브러리 제작 방법
6 6
제 1항에 있어서, 상기 표적 핵산의 억제 및 증폭은 PCR(polymerase chain reaction)을 통해 수행하는 것을 특징으로 하는 메타지놈 라이브러리 제작 방법
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삭제
8 8
표적 핵산과 상보적으로 결합하여 표적 핵산의 증폭을 억제하는 PNA 프로브 및 프라이머를 포함하는 핵산 증폭용 조성물을 포함하는 인간 장내 미생물 검출용 메타지놈 라이브러리 제작 키트
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제 8항에 있어서, 상기 키트는 PNA 프로브와 표적 핵산과 완전히 혼성화(perfect match)를 이루면 표적 핵산의 증폭 산물이 생성되지 않고, PNA 프로브와 표적 핵산이 불완전 혼성화(mismatch)를 이루면 표적 핵산의 증폭 산물이 생성되는 것을 특징으로 하는 메타지놈 라이브러리 제작 키트
10 10
제 8항 또는 제 9항에 있어서, 상기 PNA 프로브는 1~1000 nM의 농도로 첨가되는 것을 특징으로 하는 메타지놈 라이브러리 제작 키트
11 11
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