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상피―중간엽 전이(epithelial―mesenchymal transition; EMT) 유도용 세포 배양 기재, 이의 용도 및 제조방법(Cell culture substrate for inducing epithelial―mesenchymal transition, use thereof and preparing the same)

  • 기술번호 : KST2015228702
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 상피-중간엽 전이(epithelial-mesenchymal transition; EMT) 유도용 세포 배양 기재로서, 상부에 세포가 부착하여 배양될 수 있는 편평한 면을 포함하는 일정한 평균직경을 갖는 기둥형태의 구조물이 일정한 간격으로 배열되고, 상기 기둥형태의 구조물은 하나의 기둥의 중심으로부터 인접한 기둥의 중심까지의 거리는 4 μm 이상 30 μm 이하로 조절된 것인 세포 배양 기재; 상기 세포 배양 기재를 이용한 약물 스크리닝 방법; 상기 세포 배양 기재에 환자의 암조직으로부터 분리한 세포를 항암제 후보물질을 처리 또는 비처리하여 부착배양하는 단계를 포함하는 환자맞춤형 항암제 및 섬유화증 치료제의 스크리닝 방법; 및 복수의 기둥형태의 구조물이 음각으로 패턴화된 탄성고분자를 포함하는 중간체 주형(intermediate mold)을 준비하는 단계를 포함하는 상기 세포 배양 기재의 제조방법에 관한 것이다.
Int. CL C12M 3/00 (2006.01) G01N 33/574 (2006.01)
CPC C12M 3/00(2013.01) C12M 3/00(2013.01) C12M 3/00(2013.01) C12M 3/00(2013.01) C12M 3/00(2013.01) C12M 3/00(2013.01) C12M 3/00(2013.01) C12M 3/00(2013.01)
출원번호/일자 1020140063801 (2014.05.27)
출원인 한국화학연구원
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2015-0136688 (2015.12.08) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 거절
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호 1020160066676;
심사청구여부/일자 Y (2014.05.27)
심사청구항수 13

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국화학연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 이정오 대한민국 대전시 유성구
2 김성환 대한민국 대전광역시 유성구
3 최원진 대한민국 서울시 은평구
4 문성희 대한민국 경상남도 고성군
5 정종진 대한민국 경기도 고양시 일산
6 박정규 대한민국 대전광역시 서구
7 김지연 대한민국 대전광역시 중구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 손민 대한민국 서울특별시 송파구 법원로 ***, *층(문정동)(특허법인한얼)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2014.05.27 수리 (Accepted) 1-1-2014-0500824-75
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2015.03.10 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2015.04.28 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-6-2015-0044892-44
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2016.01.15 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0038852-09
5 거절결정서
Decision to Refuse a Patent
2016.03.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0237360-15
6 [법정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Extension of Legal Period] Request for Extension of Period (Reduction, Expiry Reconsideration)
2016.05.02 수리 (Accepted) 7-1-2016-0027066-19
7 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2016.05.30 수리 (Accepted) 1-1-2016-0520140-92
8 [명세서등 보정]보정서(재심사)
Amendment to Description, etc(Reexamination)
2016.05.30 보정승인 (Acceptance of amendment) 1-1-2016-0520167-13
9 [분할출원]특허출원서
[Divisional Application] Patent Application
2016.05.30 수리 (Accepted) 1-1-2016-0520070-94
10 거절결정서
Decision to Refuse a Patent
2016.06.29 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0470997-21
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2017.09.14 수리 (Accepted) 4-1-2017-5149242-13
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2017.09.14 수리 (Accepted) 4-1-2017-5149265-52
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
상피-중간엽 전이(epithelial-mesenchymal transition; EMT) 유도용 세포 배양 기재로서,상부에 세포가 부착하여 배양될 수 있는 편평한 면을 포함하는 일정한 평균직경을 갖는 기둥형태의 구조물이 일정한 간격으로 배열되고, 상기 기둥형태의 구조물은 하나의 기둥의 중심으로부터 인접한 기둥의 중심까지의 거리는 4 μm 이상 30 μm 이하로 조절된 것인 세포 배양 기재
2 2
제1항에 있어서,상기 기둥형태의 구조물은 1 μm 내지 5 μm의 평균직경 을 갖는 것인 세포 배양 기재
3 3
제1항에 있어서,상기 상피-중간엽 전이 유도는 EMT 유도를 위한 사이토카인을 추가로 포함하지 않는 배지를 이용하여 세포를 부착배양하여 달성되는 것인 세포 배양 기재
4 4
제3항에 있어서,상기 EMT 유도를 위한 사이토카인은 TGF-β, BMP-7, EGF, HGF, PDGF 또는 Wnt-3a인 것인 세포 배양 기재
5 5
제1항에 있어서,상기 EMT 유도는 α-SMA, FAK, N-카데린(N-cadherin), DDR2, 데스민(desmin), 파이브로넥틴(fibronectin), 라미닌-5(laminin-5), MMP-2, MMP-3, MMP-9, S100A4, 신데칸-1/CD138(syndecan-1/CD138), 비멘틴(vimentin) 및 비트로넥틴(vitronectin)으로 구성된 군으로부터 선택되는 중간엽 마커 또는 Src, Smad2, Smad2/3, Smad3, Smad7, Snail, STAT3, Twist-1, Akt, Dsh-1, Dsh-2, Dsh-3, Dkk-1, Dkk-2, Dkk-3, Dkk-4, EOMES, FoxC2, ILK, JAG1, JAG2, JNK, 노긴(noggin), p38 MAP 키나아제, p300 및 Ras로 구성된 군으로부터 선택되는 EMT 신호전달분자의 발현 증가에 의해 나타나는 것인 세포 배양 기재
6 6
제1항에 있어서,상기 EMT 유도는 액틴, ALCAM, β-카테닌(β-catenin), E-카데린(E-cadherin), 콜라겐 I, 사이토케라틴 8(cytokeratin 8), 사이토케라틴 14, 사이토케라틴 19, EpCAM, 히알루로난(hyaluronan), JAM-A, JAM-B/VE-JAM, JAM-C, JAM-4/IGSF5, 라미닌 I(laminin I), 넥틴-1(nectin-1), 넥틴-2/CD112, 넥틴-3 및 넥틴-4로 구성된 군으로부터 선택되는 상피마커의 발현 감소에 의해 나타나는 것인 세포 배양 기재
7 7
제1항에 있어서,상기 세포는 암세포 또는 피부, 입, 코, 항문관, 호흡기계통, 소화기계통, 심혈관계통 및 림프계통으로 구성된 군으로부터 선택되는 조직세포 또는 이의 전구체세포인 것인 세포 배양 기재
8 8
제1항에 있어서,세포 종류별 EMT 유도가능한 기둥형태의 구조물의 평균직경 및 중심 간의 최단 거리의 규격을 예시한 설명서를 별도로 구비한 것인 세포 배양 기재
9 9
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 기재된 세포 배양 기재에 세포를 12 내지 48시간 동안 부착배양하는 제1단계;약물 후보물질을 처리 또는 비처리하여, 상기 세포 배양 기재에 세포를 추가로 12시간 내지 72시간 동안 부착배양하는 제2단계;약물 후보물질 처리 세포 및 비처리 세포의 국소부착 관련 단백질 발현수준을 확인하여 비교하는 제3단계; 및약물 후보물질 비처리 세포에 비해 약물 후보물질을 처리하여 배양한 세포에서 국소부착 관련 단백질 발현수준이 증가 또는 감소한 경우 약물 후보물질을 해당 세포에 대한 약효를 갖는 것으로 판단하는 제4단계;를 포함하는 약물 스크리닝 방법
10 10
제9항에 있어서,상기 약물은 항암제, 조직 섬유화(tissue fibrosis) 억제제 또는 상처치료제(wound healing agent)인 것인 약물 스크리닝 방법
11 11
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 기재된 세포 배양 기재에 환자의 암조직으로부터 분리된 세포를 12 내지 48시간 동안 부착배양하는 제1단계;항암제 후보물질을 처리 또는 비처리하여, 상기 세포 배양 기재에 세포를 추가로 12시간 내지 72시간 동안 부착배양하는 제2단계;항암제 후보물질 처리 세포 및 비처리 세포의 국소부착 관련 단백질 발현수준을 확인하여 비교하는 제3단계; 및항암제 후보물질 비처리 세포에 비해 항암제 후보물질을 처리하여 배양한 세포에서 국소부착 관련 단백질 발현수준이 낮아진 경우 항암제 후보물질을 해당 세포에 대한 항암제로 판단하는 제4단계;를 포함하는 환자맞춤형 항암제의 스크리닝 방법
12 12
제11항에 있어서,상기 항암제는 암세포의 전이를 억제하는 것인 스크리닝 방법
13 13
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 기재된 세포 배양 기재에 환자의 섬유화증 조직으로부터 분리된 세포를 12 내지 48시간 동안 부착배양하는 제1단계;섬유화증 치료제 후보물질을 처리 또는 비처리하여, 상기 세포 배양 기재에 세포를 추가로 12시간 내지 72시간 동안 부착배양하는 제2단계;섬유화증 치료제 후보물질 처리 세포 및 비처리 세포의 국소부착 관련 단백질 발현수준을 확인하여 비교하는 제3단계; 및섬유화증 치료제 후보물질 비처리 세포에 비해 섬유화증 치료제 후보물질을 처리하여 배양한 세포에서 국소부착 관련 단백질 발현수준이 낮아진 경우 섬유화증 치료제 후보물질을 해당 세포에 대한 섬유화증 치료제로 판단하는 제4단계;를 포함하는 환자맞춤형 섬유화증 치료제의 스크리닝 방법
14 14
상부에 일정한 평균직경을 갖는 편평한 면을 포함하고, 일정한 간격으로 배열된, 복수의 기둥형태의 구조물이 음각으로 패턴화된 탄성고분자를 포함하는 중간체 주형(intermediate mold)을 준비하는 제1단계;상기 중간체 주형을 광경화성 수지 상에 각인시키고 30초 내지 5분 동안 빛을 조사하는 제2단계;광경화된 수지로부터 중간체 주형을 제거하는 제3단계;를 포함하는 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 기재된 세포 배양 기재의 제조방법
15 15
제14항에 있어서,상기 탄성고분자는 PDMS(polydimethylsiloxane), 폴리스티렌계 고분자, 폴리올레핀계 고분자, 폴리염화비닐계 고분자, 폴리우레탄계 고분자, 폴리에스테르계 고분자, 폴리아미드계 고분자, 콜라겐, 하이드로겔, 고형화 가능한 탄소 및 실리콘러버로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 제조방법
16 16
제14항에 있어서,상기 기둥형태의 구조물은 평균직경 1 μm 내지 5 μm 의 기둥들이 하나의 기둥의 중심으로부터 인접한 기둥의 중심까지 4 μm 이상 30 μm 이하의 일정한 간격으로 배열된 것인 제조방법
17 17
제14항에 있어서,제1단계로부터 준비한 중간체 주형을 반복하여 사용하는 것이 특징인 제조방법
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 미래창조과학부 한국화학연구원 협동연구사업 NT 기반 세포신호측정계 구축