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ⅰ) 아미노카프론산으로부터 ε-카프로락탐으로 전환하는 카프로락탐 전환 효소를 코딩하는 유전자;ⅱ) ε-카프로락탐을 인지하는 NitR(nitrilase regulator) 단백질을 코딩하는 nitR 유전자, 및 상기 nitR 유전자와 상호 작동가능하게 연결되어 상기 nitR 유전자의 발현을 조절하는 프로모터를 포함하는 제1 유전자 컨스트럭트; 및ⅲ) 형광 단백질을 코딩하는 유전자 및 항생제 저항성 유전자로 구성된 군에서 선택된 하나 이상의 리포터 유전자, 및 상기 리포터 유전자와 상호 작동가능하게 연결되어, ε-카프로락탐을 인지한 NitR 단백질이 결합하면 상기 리포터 유전자의 발현을 유도하는 nitA 프로모터(aliphatic nitrilase promoter, PnitA)를 포함하는 제2 유전자 컨스트럭트;를 포함하는 아미노카프론산 감지용 재조합 미생물
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ⅰ) 아미노카프론산으로부터 ε-카프로락탐으로 전환하는 효소를 코딩하는 유전자;ⅱ) ε-카프로락탐을 인지하는 NitR(nitrilase regulator) 단백질을 코딩하는 nitR 유전자, 및 상기 nitR 유전자와 상호 작동가능하게 연결되어 상기 nitR 유전자의 발현을 조절하는 프로모터를 포함하는 제1 유전자 컨스트럭트;ⅲ) T7 RNA 폴리머라아제를 코딩하는 유전자, 및 상기 T7 RNA 폴리머라아제를 코딩하는 유전자와 상호 작동가능하게 연결되어, ε-카프로락탐을 인지한 NitR 단백질이 결합하면, 하기 리포터 유전자의 발현을 유도하는 nitA 프로모터(aliphatic nitrilase promoter, PnitA)를 포함하는 제2 유전자 컨스트럭트; 및iv) 형광 단백질을 코딩하는 유전자 및 항생제 저항성 유전자로 구성된 군에서 선택된 하나 이상의 리포터 유전자, 및 상기 리포터 유전자와 상호 작동가능하게 연결되어, T7 RNA 폴리머라아제에 의해 활성화되면, 상기 리포터 유전자의 발현을 유도하는 T7 프로모터를 포함하는 제3 유전자 컨스트럭트;를 포함하는 아미노카프론산 감지용 재조합 미생물
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청구항 1 또는 청구항 2에 있어서,상기 아미노카프론산으로부터 ε-카프로락탐으로 전환하는 효소를 코딩하는 유전자는 서열번호 1의 염기 서열 또는 서열번호 28의 염기 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 아미노카프론산 감지용 재조합 미생물
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청구항 1 또는 청구항 2에 있어서,상기 아미노카프론산으로부터 ε-카프로락탐으로 전환하는 효소는 서열번호 29의 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 아미노카프론산 감지용 재조합 미생물
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청구항 1 또는 청구항 2에 있어서,상기 nitR 유전자 및 nitA 프로모터는 나이트릴레이즈(nitrilase) 활성이 있는 균주 유래의 nitR 유전자 및 nitA 프로모터인 것을 특징으로 하는 아미노카프론산 감지용 재조합 미생물
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청구항 5에 있어서,상기 나이트릴레이즈(nitrilase) 활성이 있는 균주는 Aeribacillus pallidus, A
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청구항 1 또는 청구항 2에 있어서,상기 nitR 유전자는 서열번호 2의 염기서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 아미노카프론산 감지용 재조합 미생물
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청구항 1 또는 청구항 2에 있어서,상기 nitA 프로모터는 서열번호 3의 염기서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 아미노카프론산 감지용 재조합 미생물
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청구항 1 또는 청구항 2에 있어서,상기 리포터 유전자는 형광 단백질을 코딩하는 유전자 및 항생제 저항성 유전자로 구성된 이중 리포터 유전자인 것을 특징으로 하는 아미노카프론산 감지용 재조합 미생물
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청구항 1에 있어서,상기 재조합 미생물 내에는 상기 ⅰ) 아미노카프론산으로부터 ε-카프로락탐으로 전환하는 효소를 코딩하는 유전자가 클로닝된 벡터, 상기 ⅱ) 제1 유전자 컨스트럭트가 클로닝된 벡터 및 상기 ⅲ) 제2 유전자 컨스트럭트가 클로닝된 벡터가 포함되어 있는 것을 특징으로 하는 아미노카프론산 감지용 재조합 미생물
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청구항 1에 있어서,상기 재조합 미생물 내에는 상기 ⅰ) 아미노카프론산으로부터 ε-카프로락탐으로 전환하는 효소를 코딩하는 유전자가 클로닝된 벡터, 및 상기 ⅱ) 제1 유전자 컨스트럭트와 상기 ⅲ) 제2 유전자 컨스트럭트가 함께 클로닝된 벡터가 포함되어 있는 것을 특징으로 하는 아미노카프론산 감지용 재조합 미생물
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청구항 1에 있어서,상기 ⅰ) 아미노카프론산으로부터 ε-카프로락탐으로 전환하는 효소를 코딩하는 유전자는 상기 미생물의 염색체 내에 삽입되어 있고,상기 재조합 미생물 내에는 상기 ⅱ) 제1 유전자 컨스트럭트와 상기 ⅲ) 제2 유전자 컨스트럭트가 함께 클로닝된 벡터가 포함되어 있는 것을 특징으로 하는 아미노카프론산 감지용 재조합 미생물
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청구항 2에 있어서,상기 재조합 미생물 내에는 상기 ⅰ) 아미노카프론산으로부터 ε-카프로락탐으로 전환하는 효소를 코딩하는 유전자가 클로닝된 벡터, 상기 ⅱ) 제1 유전자 컨스트럭트가 클로닝된 벡터, 상기 ⅲ) 제2 유전자 컨스트럭트가 클로닝된 벡터, 및 상기 iv) 제3 유전자 컨스트럭트가 클로닝된 벡터가 포함되어 있는 것을 특징으로 하는 아미노카프론산 감지용 재조합 미생물
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청구항 2에 있어서,상기 ⅲ) 제2 유전자 컨스트럭트는 상기 미생물의 염색체 내에 삽입되어 있고,상기 재조합 미생물 내에는 상기 ⅰ) 아미노카프론산으로부터 ε-카프로락탐으로 전환하는 효소를 코딩하는 유전자가 클로닝된 벡터, 및 상기 ⅱ) 제1 유전자 컨스트럭트와 상기 iv) 제3 유전자 컨스트럭트가 함께 클로닝된 벡터가 포함되어 있는 것을 특징으로 하는 아미노카프론산 감지용 재조합 미생물
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청구항 1 또는 청구항 2의 아미노카프론산 감지용 재조합 미생물과 아미노카프론산 함유 가능성 있는 샘플을 접촉시키는 단계; 및아미노카프론산을 감지하여 발현이 유도된 리포터 단백질의 활성을 분석하는 단계;를 포함하는 아미노카프론산의 감지 또는 정량 분석 방법
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청구항 17에 있어서,상기 리포터 단백질의 활성은 미생물 콜로니 이미지 분석, 형광스펙트럼 분석, 형광유세포분석 (FACS) 및 항생제 내성 측정법으로 구성된 군에서 선택되는 방법을 이용하여 분석하는 것을 특징으로 하는 아미노카프론산의 감지 또는 정량 분석 방법
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청구항 1 또는 청구항 2의 아미노카프론산 감지용 재조합 미생물과 메타게놈 라이브러리 샘플을 접촉시키는 단계;상기 샘플 내에 존재하는 아미노카프론산에 의해 발현이 유도된 리포터 단백질의 활성을 분석하여 샘플 내에 아미노카프론산을 정량하는 단계; 및아미노카프론산이 함유된 샘플에 함유된 균주를 아미노카프론산 생산 균주로 선별하는 단계;를 포함하는 아미노카프론산 생산 균주의 스크리닝 방법
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