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효소 반응을 이용한 트롬빈의 검출 방법 및 트롬빈 검출 키트(KIT FOR DETECTING THROMBIN AND METHOD FOR DETECTING THROMBIN USING ENZYME REACTION)

  • 기술번호 : KST2016004755
  • 담당센터 : 인천기술혁신센터
  • 전화번호 : 032-420-3580
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 효소 반응을 이용한 트롬빈의 정량적 검출 방법, 트롬빈 검출 키트 및 이의 제조 방법에 관한 것으로, 보다 자세하게는 페로센으로 표지된 피브리노겐을 이용하여 트롬빈을 전기화학적으로 검출하는 방법, 이를 수행하기 위한 트롬빈 검출 키트 및 이러한 검출 키트의 제조 방법에 관한 것이다.본 발명의 트롬빈 검출 키트 및 이를 이용한 트롬빈의 정량적 검출 방법은 단백질을 표면에 고정화하지 않고도 트롬빈을 검출하는 새로운 기술을 제시하는바, 단백질 활성 감소 문제 없이 신속하면서도 정확하게 표적 단백질을 검출할 수 있다.
Int. CL G01N 27/30 (2006.01.01) G01N 27/327 (2006.01.01) G01N 33/53 (2006.01.01) G01N 33/68 (2006.01.01) G01N 33/86 (2006.01.01) C12Q 1/68 (2018.01.01)
CPC G01N 27/30(2013.01) G01N 27/30(2013.01) G01N 27/30(2013.01) G01N 27/30(2013.01) G01N 27/30(2013.01) G01N 27/30(2013.01) G01N 27/30(2013.01)
출원번호/일자 1020140070566 (2014.06.11)
출원인 인천대학교 산학협력단
등록번호/일자 10-1610472-0000 (2016.04.01)
공개번호/일자 10-2015-0142723 (2015.12.23) 문서열기
공고번호/일자 (20160408) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2014.06.11)
심사청구항수 10

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 인천대학교 산학협력단 대한민국 인천광역시 연수구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 김규원 대한민국 인천광역시 연수구
2 고현준 대한민국 인천광역시 연수구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 차준용 대한민국 서울특별시 구로구 디지털로**길 ***(구로동) 제이엔케이디지털타워 ****호(거번국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 인천대학교 산학협력단 대한민국 인천광역시 연수구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2014.06.11 수리 (Accepted) 1-1-2014-0544031-06
2 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.10.14 수리 (Accepted) 4-1-2014-0091252-23
3 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2015.08.10 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2015.10.08 수리 (Accepted) 9-1-2015-0062580-65
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2016.01.07 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0015194-81
6 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2016.03.07 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2016-0217945-09
7 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2016.03.07 수리 (Accepted) 1-1-2016-0217770-16
8 등록결정서
Decision to grant		 2016.03.31 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0238265-43
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2016.06.10 수리 (Accepted) 4-1-2016-5075573-17
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2019.10.14 수리 (Accepted) 4-1-2019-5212872-93
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
피브리노겐이 첨가된 완충 용액에 페로센 용액을 첨가하여 용융시키고 교반시켜 페로센으로 표지된 피브리노겐을 형성시키는 제 (a) 단계;트롬빈을 검출하는 검출용 키트 상에 페로센으로 표지된 피브리노겐 및 표적 물질이 혼합된 혼합 용액을 접촉시키는 제 (b) 단계; 및상기 페로센으로 표지된 피브리노겐 및 표적 물질이 혼합된 혼합 용액이 접촉된 키트의 산화-환원 전류를 측정하는 제 (c) 단계;를 포함하며,상기 제 (b) 단계의 트롬빈을 검출하는 검출용 키트는, 전극; 및 상기 전극 표면 상에 코팅되어 있으며, 페로센으로 표지된 피브리노겐을 응집시키기 위한 피브리노겐 층;을 포함하는 것임을 특징으로 하는,표적 물질 내의 트롬빈의 정량을 측정하는 방법
2 2
제1항에 있어서,상기 전극은 ITO 전극인 것을 특징으로 하는,표적 물질 내의 트롬빈의 정량을 측정하는 방법
3 3
제1항에 있어서,상기 전극은 다수의 하이드록시기가 결합되어 있는 것을 특징으로 하는,표적 물질 내의 트롬빈의 정량을 측정하는 방법
4 4
제1항에 있어서,상기 제 (b) 단계의 트롬빈을 검출하는 검출용 키트는,세척용액으로 처리한 ITO 전극 표면을 증류수를 처리하여 하이드록시기가 결합된 ITO 전극 표면을 제작하는 제 1단계; 및상기 제 1단계에서 제작한 ITO 전극 표면 상에 피브리노겐 용액을 드롭하여 코팅시키는 제 2단계;를 포함하여 제조되는 것을 특징으로 하는,표적 물질 내의 트롬빈의 정량을 측정하는 방법
5 5
제4항에 있어서,상기 제 1단계에서 세척용액은 피라나 용액(Piranha solution)인 것을 특징으로 하는,표적 물질 내의 트롬빈의 정량을 측정하는 방법
6 6
제1항에 있어서,상기 제 (a) 단계에서 피브리노겐이 첨가된 완충 용액은 0
7 7
제1항에 있어서,상기 제 (a) 단계에서 페로센 용액은 무수 조건의 극성용매에 페로센이 용융되어 있는 것임을 특징으로 하는,표적 물질 내의 트롬빈의 정량을 측정하는 방법
8 8
제1항에 있어서,상기 제 (a) 단계 수행 후 페로센으로 표지된 피브리노겐을, 반응에 참여하지 않은 페로센, 표지되지 않은 피브리노겐과 분리시키기 위해 세파덱스 컬럼 크로마토그래피를 수행하는 단계를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는,표적 물질 내의 트롬빈의 정량을 측정하는 방법
9 9
제1항에 있어서,상기 표적 물질은 트롬빈을 포함하고 있는 것을 특징으로 하는,표적 물질 내의 트롬빈의 정량을 측정하는 방법
10 10
제1항에 있어서,상기 제 (c) 단계의 산화-환원 전류를 측정하는 단계는 미분펄스 전압 전류법(Differential Pulse Voltammetry)을 이용하는 것을 특징으로 하는,표적 물질 내의 트롬빈의 정량을 측정하는 방법
11 11
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 미래창조과학부 인천대학교 산학협력단 중견핵심 트롬빈의 효소반응을 이용한 고감도 태겟검출법개발