1 |
1
a) 목적하는 유전자 부위에 대한 프로브를 디자인하는 단계;b) 상기 디자인된 프로브를 이용하여 마이크로어레이를 제작하는 단계;c) 상기 마이크로어레이로부터 프로브를 분리하는 단계; 및d) 상기 분리된 프로브를 주형(template)으로 유액 중합효소연쇄반응(emulsion polymerase chain reaction)을 실시하는 단계를 포함하고,상기 프로브는 유액 중합효소연쇄반응을 위한 프라이머 결합 서열인 칩 측면 부위(chip flanking site), 제한효소부위(enzyme cut site), 연장 암 부위(extension arm site), 중앙 기반 부위(middle backbone site), 프로브 특정 태그 서열(probe specific tag sequence), 전방 증폭용 서열(amplification F sequence), 말단 기반 부위(last backbone site), 후방 증폭용 서열(amplification R sequence), 프로브 특정 태그 서열, 중앙 기반 부위(middle backbone site), 연결 암 서열(ligation arm sequence), 제한효소부위(enzyme cut site), 및 칩 측면 부위(chip flanking site) 순서로 이루어진 분자 도치 프로브(molecular inversion probe)인, 마이크로어레이 기반 프로브 증폭 방법에 있어서,프로브 특정 태그 서열은 증폭 편향을 방지하기 위한 프로브 특이적인 서열이며, 중앙 기반 부위 및 말단 기반 부위는 프로브의 길이를 유지하기 위한 서열인 것을 특징으로 하는, 방법
|
2 |
2
제 1 항에 있어서,분자 도치 프로브(Molecular inversion probe)의 연장 암 서열(extension arm sequence) 또는 연결 암 서열(ligation arm sequence)의 용융 온도(melting point)를 측정하여 증폭된 프로브의 효율을 확인하는 단계를 추가로 포함하는, 마이크로어레이 기반 프로브 증폭 방법
|
3 |
3
제 2 항에 있어서,상기 용융 온도가 55 내지 62
|
4 |
4
제 1 항에 있어서, 상기 (d) 단계에서 증폭된 프로브는 이중 가닥인 것을 특징으로 하는, 마이크로어레이 기반 프로브 증폭 방법
|
5 |
5
제 1 항에 있어서,상기 마이크로어레이로부터 프로브를 분리하는 단계는 pH를 조절하여 프로브를 분리하는 것을 특징으로 하는, 마이크로어레이 기반 프로브 증폭 방법
|
6 |
6
a) 목적하는 유전자 부위에 대한 프로브를 디자인하는 단계;b) 상기 디자인된 프로브를 이용하여 마이크로어레이를 제작하는 단계;c) 상기 마이크로어레이로부터 프로브를 분리하는 단계;d) 상기 분리된 프로브를 주형(template)으로 1차 유액 중합효소연쇄반응(emulsion polymerase chain reaction)을 실시하는 단계; 및e) 상기 (d) 단계에서 증폭된 프로브를 주형(template)으로 이용하여 2차 유액 중합효소연쇄반응을 수행하는 단계를 포함하고,상기 프로브는 유액 중합효소연쇄반응을 위한 프라이머 결합 서열인 칩 측면 부위(chip flanking site), 제한효소부위(enzyme cut site), 연장 암 부위(extension arm site), 중앙 기반 부위(middle backbone site), 프로브 특정 태그 서열(probe specific tag sequence), 전방 증폭용 서열(amplification F sequence), 말단 기반 부위(last backbone site), 후방 증폭용 서열(amplification R sequence), 프로브 특정 태그 서열, 중앙 기반 부위(middle backbone site), 연결 암 서열(ligation arm sequence), 제한효소부위(enzyme cut site), 및 칩 측면 부위(chip flanking site) 순서로 이루어진 분자 도치 프로브(molecular inversion probe)인, 마이크로어레이 기반 프로브 증폭 방법에 있어서,프로브 특정 태그 서열은 증폭 편향을 방지하기 위한 프로브 특이적인 서열이며, 중앙 기반 부위 및 말단 기반 부위는 프로브의 길이를 유지하기 위한 서열인 것을 특징으로 하는, 방법
|
7 |
7
제 6 항에 있어서,분자 도치 프로브(Molecular inversion probe)의 연장 암 서열(extension arm sequence) 또는 연결 암 서열(ligation arm sequence)의 용융 온도(melting point)를 측정하여 증폭된 프로브의 효율을 확인하는 단계를 추가로 포함하는, 마이크로어레이 기반 프로브 증폭 방법
|
8 |
8
제 7 항에 있어서,상기 용융 온도가 55 내지 62
|
9 |
9
제 6 항에 있어서, 상기 증폭된 프로브는 이중 가닥인 것을 특징으로 하는, 마이크로어레이 기반 프로브 증폭 방법
|
10 |
10
제 6 항에 있어서, 상기 마이크로어레이로부터 프로브를 분리하는 단계는 pH를 조절하여 프로브를 분리하는 것을 특징으로 하는, 마이크로어레이 기반 프로브 증폭 방법
|
11 |
11
제 6 항에 있어서, 상기 프로브 증폭 방법은 2차 유액 중합효소연쇄반응 후에 제한효소를 처리하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 마이크로어레이 기반 프로브 증폭 방법
|
12 |
12
제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 하나의 프로브 증폭 방법에 의하여 증폭된 프로브
|