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병원성 대장균의 병원성 저해 물질 탐색방법 및 그에 이용되는 재조합 대장균(High-throughput screening system for inhibitor against pathogenicity of enterohemorrhagic or enteropathogenic Escherichia coli and recombinant Escherichia coli being used for the same)

  • 기술번호 : KST2016005660
  • 담당센터 : 경기기술혁신센터
  • 전화번호 : 031-8006-1570
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 Ler 단백질을 특이적으로 저해하는 물질의 탐색을 통해 병원성 대장균의 병원성 저해 물질을 탐색할 수 있는 고속탐색시스템, 그 고속탐색시스템에 이용되는 재조합 대장균 및 그 제조방법에 관한 것으로, 본 발명을 이용할 경우 병원성 대장균의 생육은 저해하지 않으면서 생물막 형성능, 사람 결장세포 부착능과 같은 병원성만을 선택적으로 저해함으로써, 내성균의 발생률을 최소화 시킬 수 있는 병원성 대장균의 병원성 저해 물질을 종래 배양법에 비하여 고속으로 탐색하는 것이 가능하다.
Int. CL C12N 1/21 (2006.01) G01N 33/52 (2006.01) C12N 15/70 (2006.01)
CPC C12N 1/20(2013.01) C12N 1/20(2013.01) C12N 1/20(2013.01) C12N 1/20(2013.01)
출원번호/일자 1020140089116 (2014.07.15)
출원인 한국식품연구원
등록번호/일자 10-1650098-0000 (2016.08.16)
공개번호/일자 10-2016-0008839 (2016.01.25) 문서열기
공고번호/일자 (20160823) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2014.07.15)
심사청구항수 19

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국식품연구원 대한민국 전라북도 완주군

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 김승민 대한민국 서울특별시 서초구
2 김현정 대한민국 서울특별시 서초구
3 구옥경 대한민국 경기도 성남시 분당구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인충현 대한민국 서울특별시 서초구 동산로 **, *층(양재동, 베델회관)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국식품연구원 전라북도 완주군
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2014.07.15 수리 (Accepted) 1-1-2014-0664119-06
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2014.12.05 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2015.01.09 수리 (Accepted) 9-1-2015-0002911-90
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2016.01.14 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0032816-25
5 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2016.02.12 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2016-0139805-18
6 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2016.02.12 수리 (Accepted) 1-1-2016-0139796-84
7 등록결정서
Decision to grant		 2016.08.16 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0583501-27
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2017.09.25 수리 (Accepted) 4-1-2017-5155082-90
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2019.07.08 수리 (Accepted) 4-1-2019-5135028-45
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2019.09.02 수리 (Accepted) 4-1-2019-5176835-79
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2020.02.11 수리 (Accepted) 4-1-2020-5030341-61
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2020.06.04 수리 (Accepted) 4-1-2020-5124131-17
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2020.09.08 수리 (Accepted) 4-1-2020-5203003-57
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
LEE(locus of enterocyte effacement) 오페론 프로모터 및 리포터 유전자를 포함하는 제1 재조합 벡터; 및 Ler(LEE operon master regulator) 단백질을 코딩하는 서열을 포함하는 제2 재조합 벡터를 대장균에 공동 형질전환시킨 재조합 대장균
2 2
제 1 항에 있어서, 상기 제2 재조합 벡터는 특정 기질이 존재하는 경우에만 Ler 단백질을 발현시키는 것을 특징으로 하는 재조합 대장균
3 3
제 2 항에 있어서, 상기 특정 기질은 아라비노스인 것을 특징으로 하는 재조합 대장균
4 4
제 1 항에 있어서, 상기 LEE 오페론 프로모터는 LEE2 오페론 프로모터, LEE3 오페론 프로모터, LEE4 오페론 프로모터 및 LEE5 오페론 프로모터 중에서 선택된 어느 하나 이상의 프로모터인 것을 특징으로 하는 재조합 대장균
5 5
제 1 항에 있어서, 상기 리포터 유전자는 루시퍼라제(luciferase), HRP(horse raddish peroxidase) 또는 알칼리 포스파타아제(alkaline phosphatase)를 코딩하는 유전자인 것을 특징으로 하는 재조합 대장균
6 6
제 1 항에 있어서, 상기 대장균은 대장균(E
7 7
제 1 항에 있어서, Ler 단백질에 의한 LEE 전사 억제 확인을 위해 이용되는 것을 특징으로 하는 재조합 대장균
8 8
제 1 항에 있어서, 상기 재조합 대장균은 대장균(Escherichia coli) KS02[기탁번호 KCCM11527P]인 것을 특징으로 하는 재조합 대장균
9 9
리포터 유전자를 포함하는 벡터에 LEE(locus of enterocyte effacement) 오페론 프로모터를 삽입하는 제1 재조합 벡터의 제조단계;특정 기질이 존재하는 경우에만 단백질을 발현시키는 기질 의존성 벡터에 Ler(LEE operon master regulator) 단백질을 코딩하는 서열을 삽입하는 제2 재조합 벡터의 제조단계; 및상기 제1 재조합 벡터 및 제2 제조합 벡터를 대장균에 공동형질전환시키는 재조합 대장균의 제조단계;를 포함하는 재조합 대장균의 제조방법
10 10
제 9 항에 있어서, 상기 리포터 유전자를 포함하는 벡터는 프로모터리스 루시퍼라아제 오페론(Promoterless lux operon)을 포함하는 pBBR-lux 벡터인 것을 특징으로 하는 재조합 대장균의 제조방법
11 11
제 9 항에 있어서, 상기 기질 의존성 벡터는 아라비노스의 농도에 따라 프로모터의 활성이 바뀜으로써 발현양이 조절되는 pBAD24인 것을 특징으로 하는 재조합 대장균의 제조방법
12 12
제 9 항에 있어서, 상기 리포터 유전자를 포함하는 벡터 및 기질 의존성 벡터는 각기 다른 항생제 내성을 가진 것을 특징으로 하는 재조합 대장균의 제조방법
13 13
제 9 항에 있어서, 상기 리포터 유전자를 포함하는 벡터 및 기질 의존성 벡터는 각기 다른 복제단위를 가져 하나의 숙주 세포 내에서 공존할 수 있는 것을 특징으로 하는 재조합 대장균의 제조방법
14 14
청구항 제2항 또는 제3항의 재조합 대장균, 또는 청구항 제9항 내지 제13항 중에서 선택되는 어느 하나의 방법으로 제조된 재조합 대장균을 (ⅰ) 상기 재조합 대장균에 형질전환된 제2 재조합 벡터에서 Ler 단백질을 발현시킬 수 있는 기질 및 (ⅱ) 병원성 대장균의 병원성 저해 후보물질을 첨가한 배지에서 배양하는 단계; 및리포터 유전자의 발현양을 통해 Ler 단백질의 발현양을 확인하는 단계;를 포함하는 병원성 대장균의 병원성 저해 물질 탐색방법
15 15
제 14 항에 있어서, 상기 병원성 대장균은 장출혈성 대장균(enterohemorrhagic E
16 16
제 14 항에 있어서, 상기 병원성 저해 후보물질이 저해하는 병원성은 생물막 형성능, 사람 결장세포 부착능 또는 이들 둘 모두인 것을 특징으로 하는 병원성 대장균의 병원성 저해 물질 탐색방법
17 17
제 14 항에 있어서, 상기 리포터 유전자의 발현양은 루시퍼라아제의 형광 분석을 통해 확인하는 것을 특징으로 하는 병원성 대장균의 병원성 저해 물질 탐색방법
18 18
제 14 항에 있어서, 상기 Ler 단백질의 발현양은 상기 재조합 대장균의 생장능에 따른 영향을 보정하는 것을 특징으로 하는 병원성 대장균의 병원성 저해 물질 탐색방법
19 19
대장균(Escherichia coli) KS02[기탁번호 KCCM11527P]을 아라비노스 및 병원성 대장균의 병원성 저해 후보물질을 첨가한 배지에서 배양하는 단계; 및Ler 단백질의 발현양을 루시퍼라아제의 형광 분석을 통해 확인하는 단계;를 포함하는 병원성 대장균의 병원성 저해 물질 탐색방법
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
순번, 연구부처, 주관기관, 연구사업, 연구과제의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 국가R&D 연구정보 정보 표입니다.
순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 미래창조과학부 한국식품연구원 한국식품연구원 자체사업 독성분석, 위해평가 및 발현조절을 통한 병원성 대장균 제어 기반기술 개발