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전기화학적 면역센서를 사용하여 샌드위치 ELISA(Sandwich Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) 방법으로 표적 항원을 검출하는 전기화학적 면역분석법(Electrochemical immunoassay)으로서,상기 전기화학적 면역센서는, 전극; 상기 전극 표면 상에 형성된 수산화기-풍부 환원된 그래핀 산화물(HRGO); 및 상기 수산화기-풍부 환원된 그래핀 산화물(HRGO) 상에 코팅 및 결합된 트라이메톡시실레인-폴리에틸렌글라이콜-엔석신이미딜에스터 폴리머(Poly(TMSMA-r-PEGMA-r-NAS))를 포함하는 것이며,상기 전기화학적 면역센서의 수산화기-풍부 환원된 그래핀 산화물(HRGO)은, 그래핀 산화물(GO) 용액에 K2S2O8 또는 (NH4)2S2O8 산화제를 가한 뒤, 50 ~ 100℃ 하에서 1 ~ 12시간 동안 가열하여 수산화기를 도입하는 단계; 및 상기 수산화기가 도입된 그래핀 산화물(HGO)에 pH가 8 ~ 11이 되도록 N2H4, NaOH 또는 NaBH4 환원제를 가한 뒤, 60 ~ 100℃로 2 ~ 6시간 동안 가열하여 환원시키는 단계;를 통해 합성된 것이고,상기 전기화학적 면역분석법은, (s1) 1차 항체(Primary antibody)로서 Anti-Mouse IgG를 상기 전기화학적 면역센서에 노출시켜 전기화학적 면역센서의 트라이메톡시실레인-폴리에틸렌글라이콜-엔석신이미딜에스터 폴리머(Poly(TMSMA-r-PEGMA-r-NAS))에 고정시킨 후, 고정되지 않은 것을 PBST로 닦아주고, 다시 물로 세척하는 단계; (s2) 표적 항원으로서 Mouse IgG specific antigen을 상기 1차 항체가 고정된 전기화학적 면역센서에 노출시켜 1차 항체에 고정시킨 후, 고정되지 않은 것을 PBST로 닦아주고, 다시 물로 세척하는 단계; (s3) 2차 항체(Secondary antibody)로서 HRP(Horseradish peroxidase)로 표지된 Anti-Mouse IgG(Anti-Mouse IgG-HRP)를 상기 표적 항원이 고정된 전기화학적 면역센서에 노출시켜 표적 항원에 고정시킨 후, 고정되지 않은 것을 PBST로 닦아주고, 다시 물로 세척하는 단계; 및 (s4) 전해질로서 과산화수소(H2O2) 및 하이드로퀴논(HQ) 용액을 준비된 전기화학적 면역센서의 전극에 노출시켜 효소에 의한 화학적 촉매반응을 일으킨 후, 생성된 벤조퀴논(BQ)의 양을 순환전압전류법을 이용해 검출해내는 단계;를 포함하는 것이며,상기 전기화학적 면역분석법은, 표적 항원의 검출한계(Limit of detection; LOD)가 100 ag/mL인 것을 특징으로 하는,전기화학적 면역분석법
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제1항에 있어서,상기 전기화학적 면역센서의 전극은 ITO(Indium Tin Oxide) 전극인 것을 특징으로 하는 전기화학적 면역분석법
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제1항에 있어서,상기 전기화학적 면역센서의 전극 표면은 PEI(Polyethyleneimine)에 의해 전처리된 것을 특징으로 하는 전기화학적 면역분석법
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제1항에 있어서,상기 전기화학적 면역센서는, (a) 피라나 용액(Piranha solution)으로 세척한 ITO 전극을 다시 물로 세척하여 전극 표면에 (-) 전하를 형성하는 단계; (b) 상기 (-) 전하가 형성된 전극을 (+) 전하를 띄는 PEI 수용액에 딥핑(Dipping)한 후, 물로 세척하는 단계; (c) 상기 세척된 전극을 수산화기-풍부 환원된 그래핀 산화물(HRGO) 수용액에 딥핑한 후 물로 세척하여, 전극 표면에 수산화기-풍부 환원된 그래핀 산화물(HRGO)을 형성하는 단계; 및 (d) 상기 수산화기-풍부 환원된 그래핀 산화물(HRGO)이 형성된 전극 표면에 트라이메톡시실레인-폴리에틸렌글라이콜-엔석신이미딜에스터 폴리머(Poly(TMSMA-r-PEGMA-r-NAS))를 코팅한 후, 어닐링(Annealing)하는 단계;를 포함하여 제조되는 것을 특징으로 하는 전기화학적 면역분석법
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제4항에 있어서,상기 (d) 단계에서, 상기 어닐링은 100℃에서 5분 동안 수행되는 것을 특징으로 하는 전기화학적 면역분석법
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제1항에 있어서,상기 (s4) 단계에서, 상기 준비된 전기화학적 면역센서의 전극을 작업전극으로, 백금전극을 상대전극으로, Ag/AgCl 전극을 기준전극으로 사용하는 것을 특징으로 하는 전기화학적 면역분석법
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