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각각 서열번호 2, 4, 6 및 8의 아미노산 서열로 이루어진 알파1,3-퓨코실트랜스퍼레이즈 I(α1,3-fucosyltransferase I: FucTa), 알파1,3-퓨코실트랜스퍼레이즈 II(α1,3-fucosyltransferase II: FucTb), 베타1,2-자일로실트랜스퍼레이즈(β1,2-xylosyltransferase: XylT) 및 베타1,2-N-아세틸글루코사미닐트랜스퍼레이즈 II(β1,2-N-acetylglucosaminyltransferase II: GnTII)의 기능이 상실된, 알파1,3-퓨코스(α1,3-fucose) 및 베타1,2-자일로스(β1,2-xylose) 잔기를 포함하지 않는 저-만노스형 엔-당질(N-glycan)을 포함하는 단백질을 생산하는 4중 돌연변이(quadruple mutant: qm) 식물체
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제1항에 있어서, 상기 FucTa, FucTb, XylT 및 GnTII의 기능을 상실한 4중 돌연변이 식물체는 FucTa, FucTb, XylT 및 GnTII 유전자 각각의 염기서열의 일부 또는 전체가 제거되거나 T-DNA를 포함한 외래 유전자가 삽입된 것을 특징으로 하는 4중 돌연변이 식물체
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제1항에 있어서, 상기 FucTa, FucTb, XylT 및 GnTII의 기능 상실은 게놈 변형 (genome modification), 유전자 결실(gene deletion), 유전자 삽입(gene insertion), T-DNA 삽입, 상동 재조합(homologous recombination) 또는 트랜스포존 태깅(transposon tagging)의 방법으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 방법에 의해 수행되는 것을 특징으로 하는 4중 돌연변이 식물체
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삭제
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제1항 내지 제3항 중 어느 한 항의 4중 돌연변이 식물체에 서열번호 10의 아미노산 서열로 이루어진 인간 유래 알파1,6-퓨코실트랜스퍼레이즈(α1,6-fucosyltransferase: FUT8) 단백질을 코딩하는 유전자가 삽입되어, 알파1,3-퓨코스 및 베타1,2-자일로스 잔기를 포함하지 않고 알파1,6-퓨코스(α1,6-fucose) 잔기를 함유하는 저-만노스형 엔-당질(N-glycan)을 포함하는 단백질을 생산하는 형질전환 식물체
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제5항에 있어서, 상기 알파1,3-퓨코스 및 베타1,2-자일로스 잔기를 포함하지 않고 알파1,6-퓨코스(α1,6-fucose) 잔기를 함유하는 저-만노스형 엔-당질(N-glycan)은 Man3GlcNAc[Fuc(α1,6)]GlcNAc 인 것을 특징으로 하는 형질전환 식물체
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7
제5항에 있어서, 상기 FUT8 유전자의 삽입은 서열번호 10의 아미노산 서열로 이루어진 인간 유래 알파1,6-퓨코실트랜스퍼레이즈(α1,6-fucosyltransferase: FUT8) 단백질을 코딩하는 유전자를 포함하는 재조합 벡터로 형질전환시킴으로써 수행되는 것을 특징으로 하는 형질전환 식물체
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제7항에 있어서, 상기 재조합 벡터는 애기장대 유비퀴틴 1 프로모터, 서열번호 10의 아미노산 서열로 이루어진 인간 유래 알파1,6-퓨코실트랜스퍼레이즈(α1,6-fucosyltransferase: FUT8) 단백질을 코딩하는 유전자 및 애기장대 유비퀴틴 1 폴리아데닐화(polyadenylation) 신호를 갖는 뉴클레오타이드를 포함하는 것을 특징으로 하는 형질전환 식물체
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제5항에 있어서, 상기 식물체는 벼, 밀, 보리, 옥수수, 콩, 감자, 팥, 귀리, 수수, 애기장대, 배추, 무, 고추, 딸기, 토마토, 수박, 오이, 양배추, 참외, 호박, 파, 양파, 당근, 인삼, 담백, 목화, 참깨, 사탕수수, 사탕무우, 들깨, 땅콩, 유채, 사과나무, 배나무, 대추나무, 복숭아, 양다래, 포도, 감귤, 감, 자두, 살구, 바나나, 장미, 글라디올러스, 거베라, 카네이션, 국화, 백합, 튤립, 라이그라스, 레드클로버, 오차드그라스, 알파파, 톨페스큐 및 페레니얼라이그라스로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 형질전환 식물체
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제5항에 따른 형질전환 식물체의 캘러스
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제5항에 따른 식물체의 형질전환된 종자
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(1) 각각 서열번호 2, 4, 6 및 8의 아미노산 서열로 이루어진 FucTa, FucTb, XylT 및 GnTII 단백질의 기능이 상실된, 알파1,3-퓨코스 및 베타1,2-자일로스 잔기를 포함하지 않는 저-만노스형 엔-당질(N-glycan)을 포함하는 단백질을 생산하는 4중 돌연변이(quadruple mutant: qm) 식물체를 제조하는 단계; 및(2) 상기 (1)단계에서 제조된 4중 돌연변이 식물체를 서열번호 10의 아미노산 서열로 이루어진 인간 유래 알파1,6-퓨코실트랜스퍼레이즈(α1,6-fucosyltransferase: FUT8) 단백질을 코딩하는 유전자를 포함하는 재조합 벡터로 형질전환하여 FUT8 유전자를 과발현하고, FucTa, FucTb, XylT 및 GnTII 단백질 기능이 상실된 형질전환 식물체를 선발하는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 알파1,3-퓨코스 및 베타1,2-자일로스 잔기를 포함하지 않고 알파1,6-퓨코스(α1,6-fucose) 잔기를 함유하는 저-만노스형 엔-당질(N-glycan)을 포함하는 단백질을 생산하는 형질전환 식물체의 제조 방법
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제12항에 있어서, 상기 (1)단계의 4중 돌연변이(quadruple mutant: qm) 식물체는 FucTa, FucTb, XylT 및 GnTII 단백질의 기능이 각각 상실된 별개의 돌연변이 식물체를 교배하여 알파1,3-퓨코스 및 베타1,2-자일로스 잔기를 포함하지 않는 저-만노스형 엔-당질(N-glycan)을 포함하는 단백질을 생산하는 식물체를 선발하는 단계에 의해 제조되는 것을 특징으로 하는 형질전환 식물체의 제조 방법
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제12항의 방법에 의해 제조된 알파1,3-퓨코스 및 베타1,2-자일로스 잔기를 포함하지 않고 알파1,6-퓨코스(α1,6-fucose) 잔기를 함유하는 저-만노스형 엔-당질(N-glycan)을 포함하는 단백질을 생산하는 형질전환 식물체
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제5항의 식물체 내에서 외래 당단백질 코딩 유전자를 발현시키는 단계를 포함하는 알파1,3-퓨코스 및 베타1,2-자일로스 잔기를 포함하지 않고 알파1,6-퓨코스(α1,6-fucose) 잔기를 함유하는 저-만노스형 엔-당질(N-glycan)을 포함하는 단백질의 생산 방법
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제15항에 있어서, 상기 식물체 내에서 외래 당단백질 코딩 유전자의 발현은 상기 외래 당단백질 코딩 유전자를 포함하는 재조합 벡터로 식물체를 형질전환시킴으로써 수행되는 것을 특징으로 하는 저-만노스형 엔-당질(N-glycan)을 포함하는 단백질의 생산 방법
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제15항에 있어서, 상기 발현된 외래 당단백질을 분리 및 정제하는 단계를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 저-만노스형 엔-당질(N-glycan)을 포함하는 단백질의 생산 방법
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제17항에 있어서, 상기 발현된 외래 당단백질의 정제는 염석법, 투석법, 크로마토그래피법, 전기영동법 및 초원심분리법으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 방법에 의해 수행되는 것을 특징으로 하는 저-만노스형 엔-당질(N-glycan)을 포함하는 단백질의 생산 방법
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제15항의 방법에 의해 생산된 알파1,3-퓨코스 및 베타1,2-자일로스 잔기를 포함하지 않고 알파1,6-퓨코스(α1,6-fucose) 잔기를 함유하는 저-만노스형 엔-당질(N-glycan)을 포함하는 단백질
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