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MTT염료를 이용한 항균효과 측정방법(Methods for antimicrobial effect of antimicrobial agents using MTT)

  • 기술번호 : KST2016006559
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요약 본 발명은 MTT염료를 이용한 항균효과 측정방법에 관한 것으로, 항균물질을 희석하여 서로 상이한 농도로 마련되는 복수개의 희석액을 마련하는 A단계; 상기 복수개의 희석액을 홈판(well plate)에 마련된 복수개의 웰(well)에 각 열별로 상기 희석액 농도의 내림차순 또는 오름차순으로 구분하여 분주하는 B단계; 상기 희석액이 분주된 모든 웰에 세균 접종액을 분주하는 C단계; 상기 홈판을 고정 및 밀봉 후 배양기를 이용해 배양하는 D단계; 상기 세균 접종액이 분주된 모든 웰에 MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)- 2,5-diphenyltetrazolium bromide)염료를 분주하는 E단계; 및 상기 MTT염료가 분주된 모든 웰 내 색 변화를 관찰하여 상기 항균물질의 최소발육저지농도(MIC, Minimal Inhibitory Concentration)를 판단하는 F단계;를 포함한다.여기서, 본 발명에 의하면 농도 구배를 가지고 항균물질의 희석액이 분주된 홈판 내 웰에 MTT염료를 첨가하여 색 변화를 관찰함으로써, 육안으로 용이하게 항균물질의 최소발육저지농도를 판단 할 수 있다.
Int. CL C12Q 1/04 (2006.01) G01N 33/52 (2006.01)
CPC C12Q 1/04(2013.01) C12Q 1/04(2013.01) C12Q 1/04(2013.01)
출원번호/일자 1020140099877 (2014.08.04)
출원인 충북보건과학대학교 산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2016-0016218 (2016.02.15) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 공개
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2014.08.04)
심사청구항수 1

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 충북보건과학대학교 산학협력단 대한민국 충청북도 청원군

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 홍승복 대한민국 충청북도 청원군

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인태동 대한민국 서울특별시 구로구 가마산로 ***, ***호(구로동, 대림오피스밸리)

최종권리자

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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2014.08.04 수리 (Accepted) 1-1-2014-0736767-83
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2015.01.15 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2015.03.13 수리 (Accepted) 9-1-2015-0016370-61
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2016.05.19 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0361866-25
5 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2016.07.19 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2016-0698144-47
6 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2016.07.19 수리 (Accepted) 1-1-2016-0698143-02
7 거절결정서
Decision to Refuse a Patent
2016.11.24 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0848839-36
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번호 청구항
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항균물질을 희석하여 서로 상이한 농도로 마련되는 복수개의 희석액을 마련하는 A단계;상기 복수개의 희석액을 홈판(Well plate)에 마련된 복수개의 웰(Well)에 각 열별로 상기 희석액 농도의 내림차순 또는 오름차순으로 구분하여 분주하는 B단계;상기 희석액이 분주된 모든 웰에 세균 접종액을 분주하는 C단계;상기 홈판을 고정 및 밀봉 후 배양기를 이용해 배양하는 D단계;상기 세균 접종액이 분주된 모든 웰에 MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)- 2,5-diphenyltetrazolium bromide)염료를 분주하는 E단계; 및상기 MTT염료가 분주된 모든 웰 내 색 변화를 관찰하여 상기 항균물질의 최소발육저지농도(MIC, Minimal Inhibitory Concentration)를 판단하는 F단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 MTT염료를 이용한 항균효과 측정방법
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제1항에 있어서
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제2항에 있어서,상기 복수개의 희석액을 상이한 농도로 마련하기 위한 상기 원액과 상기 액체배지의 혼합 비율은 가장 높은 농도로부터 순차적으로 반감되어 농도가 형성될 수 있도록 각각 마련되는 것을 특징으로 하는 MTT염료를 이용한 항균효과 측정방법
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제1항에 있어서,상기 F단계는 상기 홈판의 웰을 각 열별로 비교하여 상기 열 내에서 MTT염료의 분주를 통해 최초로 색의 변화가 발생하는 웰의 상기 희석액 농도를 상기 접종한 세균에 대해 항균효과를 나타낼 수 있는 상기 항균물질의 최소발육저지농도로 판단하는 것을 특징으로 하는 MTT염료를 이용한 항균효과 측정방법
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제4항에 있어서,상기 MTT염료의 분주를 통해 최초로 색의 변화가 발생하는 웰 내에는 상기 MTT 염료를 분주한 부분을 중심으로 보라색의 발색점이 발생하는 것을 특징으로 하는 MTT염료를 이용한 항균효과 측정방법
6 6
제1항에 있어서,상기 C단계는 상기 희석액이 분주된 모든 웰을 각 열별로 구분하여 각각 종류가 상이한 복수의 세균 접종액을 첨가하는 것을 특징으로 하는MTT염료를 이용한 항균효과 측정방법
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
국가 R&D 정보가 없습니다.