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HLA (human leukocyte antigen)-A, HLA-B 및 HLA-DR 중 하나 이상의 면역적합항원 유전자가 이형접합 (heterozygous) 유전형인 분리된 세포에서, 이형접합 유전형인 상기 유전자의 대립 유전자 하나 또는 둘을 유전자 결손을 통하여 교정하는 단계를 포함하고,상기 유전자 결손은 HLA-A 특이적인 유전자 가위, HLA-B 특이적인 유전자 가위, 및 HLA-DR 특이적인 유전자 가위로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 이용하여 수행되는 것인,면역적합형 (immune-compatible) 세포의 제조 방법
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제1항에 있어서,상기 제조 방법은 면역적합항원 유전자인 HLA-A, 또는 HLA-B가 이형접합 (heterozygous) 유전형인 분리된 세포에서, 이형접합 유전형인 상기 유전자의 대립 유전자 하나 또는 둘을 HLA-A 특이적인 유전자 가위, HLA-B 특이적인 유전자 가위, 또는 이들 모두를 이용하는 유전자 결손을 통하여 교정하는 단계를 포함하는, 면역적합형 세포의 제조 방법
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제1항에 있어서,상기 유전자 결손은 유전자 제거(knock-out)를 통하여 수행되는 것인, 면역적합형 세포의 제조 방법
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제1항에 있어서,상기 제조 방법은 면역적합항원 유전자인 HLA-A 및 HLA-B가 모두 이형접합 (heterozygous) 유전형인 분리된 세포에서, 이형접합 유전형인 상기 유전자의 대립 유전자 하나를 HLA-A 특이적인 유전자 가위 및 HLA-B 특이적인 유전자 가위를 이용하는 유전자 결손을 통하여 교정하는 단계를 포함하는 것인, 면역적합형 세포의 제조 방법
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삭제
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제1항에 있어서,상기 유전자 가위는 ZFN(zinc finger nuclease), TALEN(transcription activator-like effector nuclease), 및 RGEN(RNA-guided engineered nuclease)으로 이루어진 군에서 선택된 것인, 면역적합형 세포의 제조 방법
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제6항에 있어서,상기 RGEN은 HLA-A, HLA-B 또는 HLA-DR 유전자의 특정 서열에 특이적으로 결합하는 가이드 RNA 및 Cas 단백질을 포함하는 것인, 면역적합형 세포의 제조 방법
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제7항에 있어서,유전자 교정은 HLA-A, HLA-B 또는 HLA-DR 유전자의 특정 서열에 특이적으로 결합하는 가이드 RNA 또는 상기 가이드 RNA를 암호화하는 DNA; 및 Cas 단백질을 암호화하는 핵산 또는 Cas 단백질을 세포에 도입하여 수행되는 것인, 면역적합형 세포의 제조 방법
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제8항에 있어서, 상기 가이드 RNA는 crRNA 및 tracrRNA를 포함하는 이중 RNA (dualRNA) 또는 단일-사슬 가이드 RNA (sgRNA) 형태인, 면역적합형 세포의 제조 방법
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제8항에 있어서, 상기 Cas 단백질은 Cas9 단백질인, 면역적합형 세포의 제조 방법
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제8항에 있어서, Cas 단백질은 스트렙토코커스 (Streptococcus) 속 유래인, 면역적합형 세포의 제조 방법
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제1항에 있어서, 상기 면역적합형 세포는 면역적합항원 유전자가 동형접합 유사 (homozygous-like 또는 hemizygous)인 것인, 면역적합형 세포의 제조 방법
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제1항에 있어서,HLA-A, HLA-B 및 HLA-DR 유전자 모두가 이형접합(heterozygous) 유전형인 분리된 세포에서, HLA-A, HLA-B 및 HLA-DR 유전자 각각의 대립 유전자 하나 또는 둘을 유전자 교정으로 제거(knockout)하는 단계를 포함하고,상기 유전자 교정은 HLA-A 특이적인 유전자 가위, HLA-B 특이적인 유전자 가위, 및 HLA-DR 특이적인 유전자 가위로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 이용하여 수행되는 것인,면역적합형 세포의 제조 방법
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제1항에 있어서,HLA-DR 유전자의 대립 유전자 한 쌍 모두가 제거 (knock-out)되고, HLA-A 또는 HLA-B 유전자 하나 이상이 이형접합인 분리된 세포에서 HLA-A 또는 HLA-B 유전자 각각의 대립 유전자 하나 또는 둘을 HLA-A 특이적인 유전자 가위 또는 HLA-B 특이적인 유전자 가위를 이용하는 유전자 교정으로 제거하는 단계를 포함하는, 면역적합형 세포의 제조 방법
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제1항에 있어서,상기 세포는 줄기세포 또는 체세포인 것인, 면역적합형 세포의 제조 방법
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제15항에 있어서, 상기 줄기세포는 유도만능줄기세포, 배아줄기세포, 핵치환기술 유래 배아줄기세포 또는 성체줄기세포인 것인, 면역적합형 세포의 제조 방법
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제1항에 있어서,상기 제조 방법은 HLA-C, HLA-DP 및 HLA-DQ 중 하나 이상의 유전자의 대립 유전자를 표적 특이적 유전자 가위를 이용하는 유전자 교정으로 제거하는 단계를 추가로 포함하는 것인, 면역적합형 세포의 제조 방법
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제1항에 있어서,상기 방법은 면역적합형 세포를 포함하는 세포 집단을 제조하기 위한 것인, 면역적합형 세포의 제조 방법
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제1항에 있어서,상기 방법은 제조된 세포에서 HLA형을 분석하는 단계를 추가로 포함하는 것인, 면역적합성 세포의 제조 방법
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제1항 내지 제4항 및 제6항 내지 제19항 중 어느 한 항의 방법으로 제조되고, HLA(human leukocyte antigen)-A, HLA-B 및 HLA-DR 중 하나 이상의 유전자의 대립 유전자 하나 또는 둘이 유전자 가위를 이용하여 결손된 면역적합형 세포를 포함하는, 면역적합형 세포 집단
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(a) HLA(human leukocyte antigen)-A, HLA-B 및 HLA-DR 중 하나 이상의 면역적합항원 유전자가 이형접합(heterozygous) 유전형인 분리된 세포에서, 이형접합 유전형인 상기 유전자의 대립 유전자 하나 또는 둘을 HLA-A 특이적인 유전자 가위, HLA-B 특이적인 유전자 가위, 및 HLA-DR 특이적인 유전자 가위로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 이용하는 유전자 결손을 통하여 교정하는 단계; 및 (b) 상기 (a) 단계에서 제조된 세포를 수집하는 단계를 포함하는, 면역적합형 세포 집단의 제조 방법
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제21항에 있어서,상기 제조 방법은 (a) 단계 수행 후 (b) 단계 수행 전에,(a') 상기 (a) 단계의 교정하는 단계를 수행하여 수득된 분리된 세포의 HLA 유전자 형을 확인하는 단계를 추가로 포함하는 것인, 면역적합형 세포 집단의 제조 방법
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HLA (human leukocyte antigen)-A, HLA-B 및 HLA-DR 중 하나 이상의 면역적합항원 유전자를 포함하는 분리된 세포에서, 상기 유전자의 대립 유전자 하나 또는 둘을 HLA-A 특이적인 유전자 가위, HLA-B 특이적인 유전자 가위, 및 HLA-DR 특이적인 유전자 가위로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 이용하는 유전자 결손을 통하여 교정하는 단계를 포함하는, 면역적합형 (immune-compatible) 세포의 제조 방법
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제23항에 있어서, 상기 분리된 세포는 면역적합항원 유전자가 이형접합 (heterozygous) 또는 동형접합 (homozygous)인 것인, 면역적합형 세포의 제조 방법
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제23항에 있어서, 상기 교정하는 단계는 상기 유전자의 대립 유전자 둘을 HLA-A 특이적인 유전자 가위, HLA-B 특이적인 유전자 가위, 및 HLA-DR 특이적인 유전자 가위로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 이용하여 교정하는 것인, 면역적합형 세포의 제조 방법
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