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표적 생체분자의 비형광 검출방법에 있어서,상기 표적 생체분자에 특이적으로 결합하는 포획분자가 고정된 제1금속-나노패턴된 기판을 포함하는 바이오칩을 준비하는 제1단계;분석시료를 제2금속 함유 비형광 나노입자로 표지하는 제2단계;상기 바이오칩을 분석시료와 반응시키는 제3단계; 특정 파장의 레이저를 기판의 하부에 장착된 프리즘 또는 전반사형 대물렌즈에 입사시켜 소산장층(evanescent field layer)을 형성하는 제4단계; 및제4단계에 의해 발생된 상기 제2금속 함유 비형광 나노입자의 전반사 산란(total internal reflection scattering; TIRS) 신호를 검출하는 제5단계를 포함하며, 광학적 간섭을 제거하기 위하여, 상기 제1금속 나노패턴과 상기 제2금속 나노입자는 각각 다른 파장에서 산란 성질을 가져, 제2금속 함유 비형광 나노입자의 산란 스펙트럼이 제1금속-나노패턴의 산란 스펙트럼과 중첩되지 않는 것인 검출방법
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제1항에 있어서,제2금속 함유 비형광 나노입자는 분석시료 중의 표적 생체분자에 직접 표지되거나 상기 표적 생체분자에 특이적으로 결합하는 검출분자에 결합되어 이를 통해 표지되는 것인 검출방법
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제1항에 있어서,상기 소산장층에 위치한 비형광 나노입자에 의한 신호를 검출하여, 검출 경로 상에 있는 먼지나 벌크 시료 내의 다른 입자에 의한 신호를 최소화함으로써 신호-대-잡음비를 높인 것이 특징인 것인 검출방법
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제1항에 있어서,상기 산란 신호의 검출은 선택적 대역통과필터(bandpass filter)를 통해 수행되는 것인 검출방법
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제1항에 있어서,상기 표적 생체분자, 포획분자 및 검출분자는 각각 독립적으로 DNA, RNA, 앱타머, 항원, 항체, 리간드, 킬레이트, 수용체, 폴리머, 화합물, 지질, 세포, 금속이온 및 폴리펩티드로 구성된 군으로부터 선택되며, 표적 생체분자는 독립적으로 포획분자 및 검출분자와 특이적으로 결합하는 것인 검출방법
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제1항에 있어서,상기 기판은 실리콘, 유리(glass), 용융 실리카(fused silica), 석영(quartz), 폴리디메틸실록산(polydimethylsiloxane; PDMS), 폴리메틸메타크릴레이트(poly(methyl methacrylate); PMMA)로 구성된 군으로부터 선택되는 투명한 고체인 것인 검출방법
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제7항에 있어서,상기 기판은 10 nm 내지 1 mm의 두께를 갖는 빛의 투과가 가능한 것인 검출방법
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제1항에 있어서,상기 제1금속 또는 제2금속은 각각 독립적으로 금(Au), 은(Ag), 백금(Pt) 및 팔라듐(Pd)으로 이루어진 군에서 선택된 것인 검출방법
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제1항에 있어서,표적 생체분자의 정량분석을 위하여,기지 농도로 표준 생체분자를 포함하는 일련의 표준시료에 대해 전반사 산란 신호를 검출하여 작성된, 농도에 따른 전반사 산란 신호의 검정곡선을 준비하는 단계; 및미지의 시료에 대해 측정된 전반사 산란 신호를 상기 표준시료로부터 작성한 검정곡선에 대입하여 농도를 유추하는 단계를 추가로 포함하는 검출방법
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전반사 산란을 이용한 표적 생체분자의 비형광 검출을 위한 시스템으로서,광원으로서 특정 파장의 레이저;제1면을 통해 소정의 각도로 입사된 상기 광원으로부터 조사된 빛이 제2면에서 전반사되면서 제2면에서 소산장을 형성하는 프리즘 또는 전반사형 대물렌즈;분석하고자 하는 표적 생체분자에 특이적으로 결합하는 포획분자가 고정된 제1금속-나노패턴을 포함하여, 상기 프리즘 또는 전반사형 대물렌즈로부터 형성된 소산장층에 의해 상기 제1금속-나노패턴으로부터 제1 전반사 산란신호를 발생하는 바이오칩;상기 바이오칩의 상부에 소정의 간격으로 이격되어 위치하여 바이오칩으로부터 발생된 산란신호를 수집하는 대물렌즈; 및상기 수집된 신호를 분석하는 검출부를 구비하며, 분석시료 및 제2금속 함유 비형광 나노입자로 표지되고 상기 표적 생체분자에 특이적으로 결합하는 검출분자를 상기 바이오칩에 가하여, 상기 소산장에 의해 제2금속 함유 비형광 나노입자로부터 발생하는 제2 전반사 산란신호 측정을 통해, 분석시료 중 표적 생체분자의 유무 또는 함량을 결정하는 시스템으로서,광학적 간섭을 제거하기 위하여, 상기 제1금속 나노패턴과 상기 제2금속 나노입자는 각각 다른 파장에서 산란 성질을 가져, 제2금속 함유 비형광 나노입자의 산란 스펙트럼이 제1금속-나노패턴의 산란 스펙트럼과 중첩되지 않는 것인, 시스템
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제11항에 있어서,상기 분석시료 중 표적 생체분자 존재 시 이를 통해 제2금속 함유 비형광 나노입자로 표지된 검출분자가 특이적으로 결합하고, 상기 제2금속 함유 비형광 나노입자가 제1산란신호와 상이한 파장에서 제2산란신호를 발생시키므로 제2산란신호의 유무, 세기 또는 둘 모두를 분석하여 분석시료 중 표적 생체분자를 정성 또는 정량 분석하는 것인 시스템
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제11항에 있어서,광원으로부터의 빛은, 각도를 조절하기 위하여 선택적으로 구비된, 하나 이상의 미러 및 미러조절장치에 의해 소정의 각도로 프리즘을 통해 조사되는 것인 시스템
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제11항에 있어서,전반사형 대물렌즈를 사용하는 경우 산란신호를 수집하기 위하여 별도의 대물렌즈를 포함하지 않는 것인 시스템
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제11항에 있어서,프리즘과 바이오칩 사이에 회전스테이지를 추가로 포함하는 것인 시스템
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제11항에 있어서,상기 검출부는 현미경으로부터 제공되는 영상을 처리할 수 있도록 현미경에 연결되어 구비된 영상처리부를 포함하는 것인 시스템
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제17항에 있어서,상기 검출부는 광다이오드 배열(photodiode arrays, PDA), 전하주입장치(charge-injection device, CID), 전하결합장치(charge-couple device, CCD) 및 디지털 단렌즈 반사식 사진기(digital single lens reflex)로 구성된 군으로부터 선택되는 검출기를 포함하는 것인 시스템
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제11항에 있어서,대물렌즈와 영상처리부 사이에 대역통과필터, 회전분석기 또는 둘 모두를 차례로 구비한 것인 시스템
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제11항에 있어서,현미경에 광원, 바이오칩, 프리즘 및 영상처리부와 선택적으로 회전스테이지를 장착하여 구성한 것인 시스템
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