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디제너러시 리프로그래밍을 통한 비천연 단백질 합성 방법(A METHOD OF SYNTHESIZING UNNATURAL PROTEIN USING DEGENERCY REPROGRAMMING)

  • 기술번호 : KST2016007431
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 디제너러시 리프로그래밍(degenercy reprogramming)을 통한 비천연 아미노산을 포함하는 단백질의 합성 방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 1) 천연 아미노산을 암호화하는 코돈 중 일부에 대한 tRNA를 제거하여 해당 코돈들의 암호화 기능을 제거한 후 다시 2) 정상적인 단백질 합성에 필요한 tRNA와 비천연 아미노산 도입에 사용되는 tRNA를 외부에서 도입함으로써, 여러 개의 코돈이 하나의 아미노산을 지정하는 생명체의 디제너러시(degenercy)를 재프로그램하여 두 가지 이상의 아미노산을 지정하도록 만드는 디제너러시 리프로그래밍하여 비천연 아미노산을 포함하는 단백질을 생산하는 방법에 관한 것이다.
Int. CL C12N 9/16 (2006.01) C12P 21/02 (2006.01) C07K 14/195 (2006.01)
CPC C07K 14/00(2013.01) C07K 14/00(2013.01) C07K 14/00(2013.01) C07K 14/00(2013.01)
출원번호/일자 1020140112273 (2014.08.27)
출원인 동국대학교 산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2016-0025661 (2016.03.09) 문서열기
공고번호/일자 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2014.08.27)
심사청구항수 7

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 동국대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 중구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 강택진 대한민국 서울특별시 강북구
2 이기백 대한민국 경기도 성남시 분당구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 노경규 대한민국 서울시 서초구 반포대로**길 ** 매강빌딩 *층(에이치앤에이치국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 동국대학교 산학협력단 서울특별시 중구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2014.08.27 수리 (Accepted) 1-1-2014-0816907-33
2 [출원서등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment
2014.09.04 수리 (Accepted) 1-1-2014-0847880-15
3 보정요구서
Request for Amendment
2014.09.17 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2014-0155759-94
4 [출원서등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment
2014.09.24 수리 (Accepted) 1-1-2014-0907110-74
5 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2015.02.10 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
6 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2015.04.10 수리 (Accepted) 9-1-2015-0023762-19
7 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2015.12.21 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2015-0891435-68
8 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2016.02.19 수리 (Accepted) 1-1-2016-0168536-00
9 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2016.02.19 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2016-0168559-49
10 등록결정서
Decision to grant
2016.07.27 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0542367-00
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.08.16 수리 (Accepted) 4-1-2019-5163486-33
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번호 청구항
1 1
1) 목적 단백질을 생산하는 대장균 유래 전 tRNA 혼합물(whole tRNA mixture)에서, 비천연 아미노산으로 치환하고자 하는 표적 천연 아미노산을 암호화하는 코돈을 해독하는 표적 tRNA를 선택적으로 분해하는 콜리신 또는 이의 변형체를 처리하여 아르기닌에 대한 코돈을 해독하는 tRNA(arginyl-tRNA)를 제거하여 상기 코돈이 비어있는(empty) 상태로 제조하는 단계; 및2) 상기 단계 1)에서 아르기닌에 대한 코돈을 해독하는 tRNA(arginyl-tRNA)가 제거된 대장균 유래 전 tRNA 혼합물에 상기 외부에서 합성한 아르기닌에 대한 코돈을 해독하는 tRNA 및 외부에서 비천연 아미노산과 결합된 아미노아실화 tRNA(aminoacyl tRNA)를 도입하여 단백질 합성 시스템을 회복시키는 단계;를 포함하는 비천연 아미노산을 포함하는 단백질의 합성 방법
2 2
삭제
3 3
제 1항에 있어서, 상기 단계 1)의 콜리신 또는 이의 변형체는 콜리신D, 콜리신E5, PrrC, 및 이들의 절단체 및 이들의 단백질공학 변형체로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 방법
4 4
제 1항에 있어서, 상기 단계 1) 이후 단백질 합성에 있어 천연 아미노산의 암호화에 사용할 코돈과 비천연 아미노산의 암호화에 사용할 코돈을 구분하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
5 5
목적 단백질을 생산하는 대장균 유래 전 tRNA 혼합물(whole tRNA mixture)에 표적 tRNA를 선택적으로 분해하는 콜리신 또는 이의 변형체를 처리하는 단계를 포함하는, 대장균 유래 전 tRNA 혼합물에서의 아르기닌에 대한 코돈을 해독하는 tRNA(arginyl-tRNA)의 제거 방법
6 6
삭제
7 7
제 5항에 있어서, 상기 단계 1)의 콜리신 또는 이의 변형체는 콜리신D, 콜리신E5 및 PrrC로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 방법
8 8
1) 무세포 단백질 생산 시스템에서 목적 단백질을 생산하는 대장균 추출액에 콜리신 또는 이의 변형체를 처리하여 아르기닌에 대한 코돈을 해독하는 tRNA(arginyl-tRNA)를 제거하는 단계; 및2) 외부에서 합성한 아르기닌에 대한 코돈을 해독하는 tRNA, 및 상기 tRNA에 표적 비천연 아미노산을 결합시킨 tRNA를 도입하는 단계;를 포함하는 비천연 아미노산을 포함하는 EGFP 변이체의 제조방법
9 9
제 8항에 있어서, 상기 단계 2)의 비천연 아미노산은 아세틸리신인 것을 특징으로 하는 방법
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1 WO2016032163 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY

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1 WO2016032163 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 교육과학기술부 동국대학교 산학협력단 일반연구자지원사업(신진) 히스톤 내 메틸 리신에 특이적인 상호 작용 이해를 위한번역 후 수식 포함 단백질 합성 시스템의 구축
2 교육과학기술부 동국대학교 산학협력단 글로벌프론티어연구개발사업 Cyclic peptide를 이용한 ARS관련 암유발인자 조절연구