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1) 생분해성 지방족 폴리에스테르계 고분자를 가용용매에 용해시킨 후 전기방사하여 나노섬유 망(nanofibrous meshes)을 제조하는 단계;2) 상기 단계 1)의 나노섬유 망을 아미노 분해 반응을 이용하여 절단하여 입자길이 10 내지 80 ㎛의 섬유상 입자(fibrous particle; FP)를 제조하는 단계;3) 상기 단계 2)에서 얻어진 섬유상 입자에 방사선을 조사하여 아크릴산(Acrylic Acid)을 접합함으로써 카복실기가 도입된 섬유상 입자를 제조하는 단계;4) 상기 단계 3)에서 얻어진 카복실기가 도입된 섬유상 입자에 세포부착 리간드를 결합시켜 세포부착 리간드가 결합된 섬유상 입자를 제조하는 단계; 및5) 상기 단계 4)에서 얻어진 세포부착 리간드가 결합된 섬유상 입자를 생체 적합성 고분자에 혼합하여 하이드로젤화 시키는 단계;를 포함하는 조직공학용 하이드로젤 지지체의 제조 방법
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제 1항에 있어서, 상기 단계 1)의 폴리에스테르계 고분자는 분자량 1,000 내지 1,000,000인 폴리(L-락트산)(PLLA), 폴리(D,L-락트산)PDLLA), 폴리(글리콜산)(PGA), 폴리(카프로락톤)(PCL), 폴리(하이드록시알카노에이트), 폴리다이옥산온(PDS), 폴리트라이메틸린카보네이트, 이들의 유도체 및 공중합체로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 조직공학용 하이드로젤 지지체의 제조 방법
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제 1항에 있어서, 상기 단계 2)의 아미노 분해 반응은 다이아민(diamine) 또는 트리아민(triamine)이 사용되는 것을 특징으로 하는 조직공학용 하이드로젤 지지체의 제조 방법
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제 1항에 있어서, 상기 단계 3)의 방사선은 감마선(γ-ray), 전자빔(electron-beam) 또는 이온빔(ion-beam)인 것을 특징으로 하는 조직공학용 하이드로젤 지지체의 제조 방법
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제 4항에 있어서, 상기 방사선의 조사량은 1 내지 10 kGy인 것을 특징으로 하는 조직공학용 하이드로젤 지지체의 제조 방법
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제 1항에 있어서, 상기 단계 4)의 세포부착 리간드는 서열번호 1로 기재되는 RGD(Arg Gly Asp)를 포함하는 3 내지 25개의 아미노산으로 이루어진 펩타이드인 것을 특징으로 하는 조직공학용 하이드로젤 지지체의 제조 방법
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제 6항에 있어서, 상기 세포부착 리간드는 RGD(Arg Gly Asp), RGDS(Arg Gly Asp Ser), RGDC(Arg Gly Asp Cys), RGDV(Arg Gly Asp Val), RGDSPASSKP(Arg Gly Asp Ser Pro Ala Ser Ser Lys Pro), GRGDS(Gly Arg Gly Asp, Ser), GRGDTP(Gly Arg Gly Asp Thr Pro), GRGDSP(Gly Arg Gly Asp Ser Pro), GRGDSPC(Gly Arg Gly Asp Ser Pro Cys) 및 YRGDS(Tyr Arg Gly Asp Ser)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 조직공학용 하이드로젤 지지체의 제조 방법
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제 1항에 있어서, 상기 단계 5)의 생체 적합성 고분자는 알지네이트(alginate), 히알루론산(hyaluronic acid), 젤라틴, 키토산 및 PEG(polyethylene glycol)로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 조직공학용 하이드로젤 지지체의 제조 방법
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제 1항의 제조방법에 의하여 얻어진 조직공학용 하이드로젤 지지체
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제 9항에 있어서, 상기 하이드로젤 지지체는 세포의 배양 또는 조직재생에 사용되는 것을 특징으로 하는 조직공학용 하이드로젤 지지체
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1) 제 9항의 하이드로젤 지지체에 세포를 봉입하는 단계; 및2) 상기 봉입된 하이드로젤 지지체를 배지에서 배양하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 세포-지지체 복합체의 제조 방법
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제 11항에 있어서, 상기 세포는 줄기세포, 조골세포, 섬유세포, 간세포, 신경세포, 면역세포 또는 배아세포인 것을 특징으로 하는 세포-지지체 복합체의 제조 방법
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제 12항의 방법에 의하여 제조된 세포-지지체 복합체
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