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a) 융합파트너 단백질과 미니-인테인 융합체를 제조하는 단계; 및b) 상기 융합체를 세포투과 펩타이드(CPP)와 반응시켜서 융합파트너 단백질과 CPP의 융합체를 제조하는 단계를 포함하는 융합파트너 단백질과 CPP의 융합체 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 융합파트너 단백질은 Cre 단백질, 전사인자,CRISPR-관련 단백질(associated protein) 9, 또는 단일 도메인 항체인 것을 특징으로 하는 제조방법
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제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 Cre 단백질은 서열번호 1의 아미노산 서열을 가지고, 상기 미니-인테인(mini-intein)은 서열번호2의 아미노산 서열을 가지는 것을 특징으로 하는 방법
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4
제1항에 있어서, 상기 CPP는 N-말단에 L-이성체 시스테인 또는 D-이성체 시스테인이 위치하고 L-이성체 아미노산, D-이성체 아미노산, 또는 L-이성체 아미노산과 D-이성체 아미노산의 조합으로 구성된 폴리펩타이드를 특징으로 하는 제조방법
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제1항 또는 제4항에 있어서, 상기 CPP는 6개로부터 15개의 아르기닌으로 구성된 폴리아르기닌 폴리펩타이드, TAT, 페네트라틴(Penetratin), 단백질 트랜스덕션 도메인(protein transduction domain) 4, 단백질 드린스덕션 도메인 5, FHV Coat-(35-49), BMV Gag-(7-25), HTLV-II Rex-(4-16), SynB1, SynB3, 아르기닌과 라이신의 조합으로 구성된 폴리펩타이드, 및 폴리구아니딘 펩토이드(polyguanidine peptoid)로 구성된 군으로부터 선택된 CPP인 것을 특징으로 하는 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 CPP는 폴리펩타이드에 비천연아미노산, 형광소자, 또는 비오틴이 삽입되어 있거나 삽입되어 있지 않은 폴리펩타이드를 특징으로 하는 제조방법
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제1항의 제조방법에 의하여 제조된 융합파트너 단백질과 CPP의 융합체
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제7항에 있어서, 상기 융합파트너 단백질은 Cre 단백질, 전사인자,CRISPR-관련 단백질(associated protein) 9, 또는 단일 도메인 항체인 것을 특징으로 하는 융합체
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제7항에 있어서, 상기 CPP는 N-말단에 L-이성체 시스테인 또는 D-이성체 시스테인이 위치하고 L-이성체 아미노산, D-이성체 아미노산, 또는 L-이성체 아미노산과 D-이성체 아미노산의 조합으로 구성된 폴리펩타이드인 것을 특징으로 하는 조성물
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제7항에 있어서, 상기 CPP는 6개로부터 15개의 아르기닌으로 구성된 폴리아르기닌 폴리펩타이드, TAT, 페네트라틴(Penetratin), 단백질 트랜스덕션 도메인(protein transduction domain) 4, 단백질 드린스덕션 도메인 5, FHV Coat-(35-49), BMV Gag-(7-25), HTLV-II Rex-(4-16), SynB1, SynB3, 아르기닌과 라이신의 조합으로 구성된 폴리펩타이드, 및 폴리구아니딘 펩토이드(polyguanidine peptoid)로 구성된 군으로부터 선택된 CPP인 것을 특징으로 하는 조성물
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제7항에 있어서, 상기 CPP는 폴리펩타이드에 비천연아미노산, 형광소자, 또는 비오틴이 삽입되어 있거나 삽입되어 있지 않은 폴리펩타이드를 특징으로 하는 조성물
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제7항의 융합체를 포함하는 세포 투과용 조성물
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