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1) 기판에 전극 패턴 및 전극 형성 부위에 해당하는 금 박막층을 형성하여 전기화학적 바이오 센서의 상판을 제조하는 단계;2) 상기 상판을 전극이 형성되지 않은 하판과 부착시켜 마이크로 채널을 형성하는 단계;3) 상기 마이크로 채널에 금 결합 단백질-단백질 G(GBP-ProG)를 포함하는 유체를 통과시키는 단계;4) 상기 마이크로 채널에 검출 목적 물질에 특이적으로 결합하는 항체를 포함하는 유체를 통과시켜, GBP-ProG와의 결합을 통해 항체를 바이오 센서 상판에 고정하는 단계; 및5) 상기 상판을 전극이 형성되지 않은 하판에서 분리하여 전극이 형성된 하판에 부착하여 바이오 센서를 제조하는 단계를 포함하는, 전기화학적 바이오 센서 키트의 제조 방법
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제1항에 있어서, 상기 3) 단계 이후에 마이크로 채널에 인산 완충 용액(Phosphate-buffered saline, PBS)을 통과시켜 상판 금 박막층에 결합하지 않은 GBP-ProG를 제거하는 단계를 추가로 포함하는, 제조 방법
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제1항에 있어서, 상기 3) 단계 이후에 상기 마이크로 채널에 블락킹(blocking) 용액을 통과시켜, 융합 단백질이 결합하지 않은 금 박막층을 블락킹하는 단계를 추가로 포함하는 것인, 제조 방법
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제3항에 있어서, 상기 블락킹하는 단계 이후에 마이크로 채널에 인산 완충 용액(Phosphate-buffered saline, PBS)을 통과시켜 블락킹 용액을 제거하는 단계를 추가로 포함하는, 제조 방법
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제1항에 있어서, 상기 4) 단계 이후에 마이크로 채널에 인산 완충 용액(Phosphate-buffered saline, PBS)을 통과시켜 상판 금 박막층에 결합하지 않은 항체를 제거하는 단계를 추가로 포함하는, 제조 방법
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제1항에 있어서,a) 실리카 나노 입자와 실리카 결합 단백질-단백질 G(SBP-ProG) 융합 단백질을 섞어, 실리카 나노 입자 표면에 SBP-ProG 융합 단백질을 부착시키는 단계; 및b) 상기 a) 단계를 거친 실리카 나노 입자에 알칼라인 탈인산화 효소(Alkaline phosphatase, AP)로 표지된 검출 목적 물질에 특이적으로 결합하는 항체를 포함하는 액체를 섞어, SBP-ProG와의 결합을 통해 항체를 실리카 나노 입자에 고정하여 실리카 나노 입자를 제조하는 단계를 추가로 포함하는, 제조 방법
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제6항에 있어서, 상기 a) 단계를 거친 실리카 나노 입자와 블락킹 용액을 섞어, 융합 단백질이 결합하지 않은 실리카 나노 입자 표면을 블락킹(blocking)하는 단계를 추가로 포함하는, 제조 방법
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제1항에 따른 제조 방법에 의해 제조된, 전기화학적 바이오 센서 키트에 있어서,a) 기판 상에 금을 박막한 마이크로 채널 상판;기판 상에 전극을 포함하는 마이크로 채널 하판;검출 목적 물질에 특이적으로 결합하는 항체; 및상기 상판에 상기 항체를 고정하는 금 결합 단백질(Gold binding protein, GBP)-단백질 G(protein G) 융합 단백질; 을 포함하며, 상기 금 결합 단백질-단백질 G 융합 단백질을 구성하는 금 결합 단백질은 상기 상판에 박막된 금에 결합되고, 단백질 G는 항체에 결합되고, 상기 채널 상판과 채널 하판이 부착하여 마이크로 채널을 형성하는 것인 전기화학적 바이오 센서;와b) 실리카 나노 입자;산화 환원 효소로 표지된 검출 목적 물질에 특이적으로 결합하는 항체; 및상기 나노 입자에 상기 검출 목적 물질에 특이적으로 결합하는 항체를 고정하는 실리카 결합 단백질(Silica binding protein, SBP)-단백질 G(protein G) 융합 단백질; 을 포함하며, 상기 실리카 결합 단백질-단백질 G 융합 단백질을 구성하는 실리카 결합 단백질은 실리카 나노 입자에 결합되고, 단백질 G는 항체에 결합되는 것인 검출용 실리카 나노 입자;를 포함하는 것을 특징으로 하며, 상기 전기화학적 바이오 센서 키트는 전극 오염(electode fouling) 현상이 방지되는 것인, 전기화학적 바이오 센서 키트
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제8항에 있어서, 상기 산화 환원 효소는 알칼라인 탈인산화 효소(Alkaline phosphatase, AP)인 것인, 전기화학적 바이오 센서 키트
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제8항에 있어서, 상기 금 결합 단백질-단백질 G 융합 단백질은 서열번호 2의 아미노산 서열로 구성되는 것인, 전기화학적 바이오 센서 키트
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제8항에 있어서, 상기 실리카 결합 단백질-단백질 G 융합 단백질은 서열번호 4의 아미노산 서열로 구성되는 것인, 전기화학적 바이오 센서 키트
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제8항에 있어서, 상기 기판은 플라스틱인 것인, 전기화학적 바이오 센서 키트
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제8항에 있어서, 상기 검출 목적 물질은 화합물, 단백질, 사이토카인, 수용체 단백질, DNA, SNP, RNA, miRNA 및 세균과 바이러스를 포함하는 병원성 미생물로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인, 전기화학적 바이오 센서 키트
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제8항에 있어서, 상기 검출 목적 물질은 질병 마커인 것인, 전기화학적 바이오 센서 키트
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제16항에 있어서, 상기 질병 마커는 전립선암의 마커인 Prostate specific antigen(PSA)인 것인, 전기화학적 바이오 센서 키트
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제8항에 따른 전기화학적 바이오 센서 키트를 이용하고 하기 단계를 포함하는 검출 목적 물질의 검출 방법으로서,1) 상기 전기화학적 바이오 센서 키트의 바이오 센서의 마이크로 채널 내로 시료를 통과시키는 단계; 2) 상기 마이크로 채널 내로 상기 전기화학적 바이오 센서 키트의 실리카 나노 입자를 처리하는 단계; 및3) 상기 마이크로 채널 내로 알칼라인 탈인산화 효소의 기질인 ρ-Aminophenylphosphate monosodium salt (PAPP)를 통과시켜 얻어지는 산화 환원 그래프를 측정하는 단계를 포함하는, 검출 방법
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제18항에 있어서, 상기 1) 단계 이후에 마이크로 채널에 인산 완충 용액(Phosphate-buffered saline, PBS)을 통과시키는 세척 단계를 추가로 포함하는, 검출 방법
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제18항에 있어서, 상기 2) 단계 이후에 마이크로 채널에 인산 완충 용액을 통과시키는 세척 단계를 추가로 포함하는, 검출 방법
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