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서열번호 1의 아미노산 서열로 표시되는 TEM-1의 N-말단과 C-말단의 위치가 근접하도록 변형시킨, 변형 베타-락타마제(cpBLA, circularly permutated β-lactamase)로서, 상기 cpBLA는 서열번호 2의 아미노산 서열로 표시되며,상기 cpBLA는 서열번호 1의 아미노산 서열로 표시되는 TEM-1의 양 말단이 제1의 링커(linker)에 의하여 연결된 것이며; 서열번호 1의 아미노산 서열로 표시되는 TEM-1의 N-말단(N-terminus)은 서열번호 2의 아미노산 서열 중 M268에 해당하며; 서열번호 1의 아미노산 서열로 표시되는 TEM-1의 C-말단(C-terminus)은 서열번호 2의 아미노산 서열 중 A266에 해당하는 것을 특징으로 하는 변형 베타-락타마제
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서열번호 3의 아미노산 서열로 이루어진 베타-락타마제 저해 단백질(β-lactamase inhibitory protein, BLIP) 내의 아미노산을 치환하여 변이(mutation)시킨 변형 베타-락타마제 저해 단백질로서, 상기 변이는 F74A, F142A 및 W150A로 이루어진 군에서 선택되는 1 종 이상인 것을 특징으로 하는, 변형 베타-락타마제 저해 단백질
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제 3 항에 있어서, 상기 변형 베타-락타마제 저해 단백질은 서열번호 4의 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는, 변형 베타-락타마제 저해 단백질
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다음을 포함하는 자가저해 단백질 융합체(autoinhibitory protein fusion):(1) 서열번호 1의 아미노산 서열로 표시되는 TEM-1의 N-말단과 C-말단의 위치가 근접하도록 변형시킨, 변형 베타-락타마제(cpBLA, circularly permutated β-lactamase)로서, 상기 cpBLA는 서열번호 2의 아미노산 서열로 표시되며,상기 cpBLA는 서열번호 1의 아미노산 서열로 표시되는 TEM-1의 양 말단이 제1의 링커(linker)에 의하여 연결된 것이며; 서열번호 1의 아미노산 서열로 표시되는 TEM-1의 N-말단(N-terminus)은 서열번호 2의 아미노산 서열 중 M268에 해당하며; 서열번호 1의 아미노산 서열로 표시되는 TEM-1의 C-말단(C-terminus)은 서열번호 2의 아미노산 서열 중 A266에 해당하는 것을 특징으로 하는 변형 베타-락타마제; (2) 서열번호 3의 아미노산 서열로 이루어진 베타-락타마제 저해 단백질(β-lactamase inhibitory protein, BLIP) 내의 아미노산을 치환하여 변이(mutation)시킨 변형 베타-락타마제 저해 단백질로서, 상기 변이는 F74A, F142A 및 W150A로 이루어진 군에서 선택되는 1 종 이상인 변형 베타-락타마제 저해 단백질; 및(3) 상기 변형 베타-락타마제와 상기 변형 베타-락타마제 저해 단백질을 연결하는, 프로테아제(protease)에 의해 분해(cleavage)되는 아미노산 서열이 삽입되어 있는 제2의 링커(linker)
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제 6 항에 있어서, 상기 자가저해 단백질 융합체는, 상기 (1)의 변형 베타-락타마제가 C-말단에 위치하고, 상기 (2)의 변형 베타-락타마제 저해 단백질이 N-말단에 위치하거나; 또는 상기 (1)의 변형 베타-락타마제가 N-말단에 위치하고, 상기 (2)의 변형 베타-락타마제 저해 단백질이 C-말단에 위치하는 것을 특징으로 하는, 자가저해 단백질 융합체
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제 6 항에 있어서, 상기 변형 베타-락타마제 저해 단백질은 서열번호 4의 아미노산 서열로 이루어진 변형 베타-락타마제 저해 단백질인 것을 특징으로 하는, 자가저해 단백질 융합체
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제 6 항에 있어서, 상기 제2의 링커 내에 삽입되는, 프로테아제에 의해 분해(cleavage)되는 아미노산 서열은 MMP(matrix metalloproteinases)에 의해 분해되는 아미노산 서열(서열번호 5 내지 11), 카스파제(caspase)에 의해 분해되는 아미노산 서열(서열번호 12 내지 21), 및 카텝신(Cathepsin)에 의해 분해되는 아미노산 서열(서열번호 22 내지 26)로 이루어진 군으로부터 선택된 1 종 이상인 것을 특징으로 하는, 자가 저해 단백질 융합체
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제 6 항에 있어서, 상기 자가 저해 단백질 융합체는 추가적으로 정제 또는 검출용 태그를 포함할 수 있는 것을 특징으로 하는, 자가 저해 단백질 융합체
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다음을 포함하는 프로테아제(protease) 활성 측정용 센서:(a) 제 6 항의 자가저해 단백질 융합체(autoinhibitory protein fusion); 및(b) 프로테아제에 의해 상기 자가저해 단백질 융합체로부터 분리된, 베타-락타마제의 활성형에 대한 검출제
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제 14 항에 있어서, 상기 (b)의 검출제는 형광성, 발광성 또는 발색성 검출제인 것을 특징으로 하는, 프로테아제 활성 측정용 센서
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제 15 항에 있어서, 상기 발색성 검출제는 CENTA(CENTATM β-lactamase substrate), 니트로세핀(Nitrocefin), 및 세파로스포린(cephalosporin)계 기질로 이루어진 군에서 선택되는 1 종 이상인 것을 특징으로 하는, 프로테아제 활성 측정용 센서
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다음을 포함하는 프로테아제(protease) 활성 측정용 키트:(a) 제 6 항의 자가저해 단백질 융합체(autoinhibitory protein fusion); 및(b) 프로테아제에 의해 상기 자가저해 단백질 융합체로부터 분리된, 베타-락타마제의 활성형에 대한 검출제
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다음 단계를 포함하는 프로테아제의 활성 측정 방법:(a) 제 6 항의 자가저해 단백질 융합체(autoinhibitory protein fusion)에 활성을 측정하고자 하는 프로테아제를 처리하는 단계; 및 (b) 상기 프로테아제에 의해 분리된, 상기 자가저해 단백질 융합체의 베타-락타마제의 활성형을 측정하는 단계
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제 18 항에 있어서, 상기 (b) 단계의 상기 자가저해 단백질 융합체의 베타-락타마제의 활성형의 측정은 상기 활성형과 결합하는 발색성 검출제를 이용하는 것을 특징으로 하는 방법
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제 19 항에 있어서, 상기 발색성 검출제는 CENTA(CENTATM β-lactamase substrate), 니트로세핀(Nitrocefin), 및 세파로스포린(cephalosporin)계 기질로 이루어진 군에서 선택되는 1 종 이상인 것을 특징으로 하는 방법
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