| 1 |
1
서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 신규한 리파제(lipase)
|
| 2 |
2
제1항에 있어서, 상기 리파제는 리조푸스 오리재(Rhizopus oryzae) 균주로부터 유래된 것인 리파제
|
| 3 |
3
제1항의 리파제를 코딩하는 염기서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드
|
| 4 |
4
제3항에 있어서,서열번호 2의 염기서열을 포함하는 것인 폴리뉴클레오티드
|
| 5 |
5
제3항의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현벡터
|
| 6 |
6
제5항의 발현벡터가 숙주세포에 도입되어, 리파제를 생산할 수 있는 형질전환체
|
| 7 |
7
제6항에 있어서,상기 숙주세포에 발현벡터를 도입하여 제작된 형질전환체를 대상으로 스크리닝하는 단계를 추가로 수행하여 수득한 것인 형질전환체
|
| 8 |
8
제7항에 있어서,상기 스크리닝은 리파제의 효소활성측정, 리파제의 생산량 및 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 기준에 의하여 수행되는 것인 형질전환체
|
| 9 |
9
제8항에 있어서,상기 리파제의 효소활성측정은 트리글리세리드 또는 pNP-에스터에 대한 에스테르결합 분해활성을 측정하여 수행되는 것인 형질전환체
|
| 10 |
10
제6항에 있어서,상기 숙주세포는 피키아 파스토리스(Pichia pastoris) 균주인 것인 형질전환체
|
| 11 |
11
제6항에 있어서,상기 형질전환체는 수탁번호 KCTC18327P로 기탁된 피키아 파스토리스 KRO-A(Pichia pastoris KRO-A)인 것인 형질전환체
|
| 12 |
12
(a) 서열번호 1의 아미노산 서열을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 수득하는 단계; (b) 상기 수득한 폴리뉴클레오티드를 클로닝하여 발현벡터를 수득하는 단계; (c) 상기 수득한 발현벡터를 숙주세포에 도입하여 형질전환체를 수득하는 단계; 및, (d) 상기 형질전환체를 배양하고, 이로부터 리파제를 회수하는 단계를 포함하는, 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 리파제의 제조방법
|
| 13 |
13
제12항에 있어서,상기 폴리뉴클레오티드는 서열번호 2의 염기서열을 포함하는 것인 방법
|
| 14 |
14
제12항에 있어서,(d) 단계에서 회수된 리파제를 정제하는 단계를 추가로 포함하는 것인 방법
|
| 15 |
15
제14항에 있어서,상기 정제는 면역친화성 크로마토그래피, 수용체친화성 크로마토그래피, 소수성 작용 크로마토그래피, 렉틴 친화성 크로마토그래피, 크기배제 크로마토그래피, 양이온 또는 음이온 교환 크로마토그래피, 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC), 역상 HPLC 등을 포함하는 종래의 크로마토그래피 방법 및 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 크로마토그래피를 이용하여 수행되는 것인 방법
|
| 16 |
16
(a) 제1항의 리파제, 제6항의 형질전환체 및 상기 형질전환체의 배양물로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 유지 및 알코올과 반응시켜서 반응물을 수득하는 단계; 및 (b) 상기 반응물로부터 바이오디젤을 회수하는 단계를 포함하는, 바이오디젤의 생산방법
|
| 17 |
17
제16항에 있어서,상기 변이된 리파제, 형질전환체 또는 배양물은 고정화된 것인 방법
|
| 18 |
18
제16항에 있어서,상기 유지는 천연유지, 가공유지 또는 폐유지인 것인 방법
|
| 19 |
19
제16항에 있어서,상기 알코올은 탄소수 2개 내지 8개의 알코올인 것인 방법
|
