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(1) Rosa26 생쥐 및 Oct4-GFP 형질전환 생쥐(OG2)를 반복 세대 교차함으로써 제작된 OG2/Rosa26 이형접합체 생쥐 유래의 녹색형광단백질(green fluorescent protein; GFP)이 활성화된 생쥐 배아 섬유아세포(mouse embryonic fibroblasts; MEFs)를 Oct4, Klf4, Sox2 및 cMyc 유전자가 포함된 플라스미드 벡터로 형질감염시키고, 이를 배양하여 배양된 세포 중 편평한 배아줄기세포 콜로니 모양을 형성하며, GFP 음성인 콜로니로서, Nanog 및 SSEA-1은 발현하지만, Oct4 및 Sox2는 발현하지 않는 상태를 유지하면서 장기간 지속적인 계대 배양이 가능한 것을 특징으로 하는 중간단계 역분화 세포를 면역결핍 동물에 주입하여 테라토마(teratoma) 형성을 유도하는 단계;(2) 상기 테라토마의 조직으로부터 단일세포를 분리하고, 신경구(neurosphere)를 형성시키는 단계; 및(3) 상기 신경구로부터 테라토마 유래 신경줄기세포를 분리하는 단계를 포함하는 중간단계 역분화 세포를 면역결핍 동물에 주입하여 체내 형성된 테라토마로부터 중간단계 역분화 세포 유래 신경줄기세포를 분리하여 신경줄기세포를 생산하는 방법(단, 상기 면역결핍 동물에서 인간을 제외함)
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제1항에 있어서, 상기 중간단계 역분화 세포는 테라토마 형성에서 외배엽으로 분화가 이루어지는 것을 특징으로 하는 중간단계 역분화 세포를 면역결핍 동물에 주입하여 체내 형성된 테라토마로부터 중간단계 역분화 세포 유래 신경줄기세포를 분리하여 신경줄기세포를 생산하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 테라토마 유래 신경줄기세포는 신경줄기세포 마커인 Musashi, Nestin 및 Sox2를 발현하는 것을 특징으로 하는 중간단계 역분화 세포를 면역결핍 동물에 주입하여 체내 형성된 테라토마로부터 중간단계 역분화 세포 유래 신경줄기세포를 분리하여 신경줄기세포를 생산하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 면역결핍 동물은 면역결핍된 생쥐, 쥐 또는 돼지인 것을 특징으로 하는 중간단계 역분화 세포를 면역결핍 동물에 주입하여 체내 형성된 테라토마로부터 중간단계 역분화 세포 유래 신경줄기세포를 분리하여 신경줄기세포를 생산하는 방법
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