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뇌 시상하부 세포에서 TSPO에 의한 대사체 변화 분석방법(Method for Determination of metabolites changed by Translocator protein 18 kDa in hypothalamus cells)

  • 기술번호 : KST2016009916
  • 담당센터 : 대구기술혁신센터
  • 전화번호 : 053-550-1450
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 세포 내에서 TSPO(translocator protein)에 의한 대사체 변화의 분석방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 뇌 시상하부 세포 내의 TSPO 역할 규명을 위해 TSPO 리간드 처리 후 변화되는 특정 대사체를 LC/Q-TOFMS을 사용하여 분석하고, TSPO의 기능에 대한 최종 표현형을 제공하는 것이다.본 발명의 TSPO에 의한 대사체 분석 방법은 TSPO 리간드(PK11195) 처리에 따른 TSPO에 의한 대사체 구성 및 분비 변화양상을 확인할 수 있으므로, TSPO 리간드 처리 후 변화되는 특정 대사체에 대한 동정을 수행하여 질병과 관련된 독성, 질환의 병리, 생리학 분야에 유용하게 사용할 수 있으며, 아직 명확하게 밝혀지지 않은 TSPO의 기능에 대한 최종 표현형을 제시함으로써 TSPO의 대사 과정 조절에 대한 마커로 활용될 수 있다.
Int. CL G01N 33/68 (2006.01) G01N 30/88 (2006.01) G01N 33/53 (2006.01)
CPC G01N 33/68(2013.01)
출원번호/일자 1020140151301 (2014.11.03)
출원인 재단법인대구경북과학기술원
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2016-0051389 (2016.05.11) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 거절
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호 1020170017569;
심사청구여부/일자 Y (2014.11.03)
심사청구항수 2

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 재단법인대구경북과학기술원 대한민국 대구 달성군 현

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 김은경 대한민국 대구광역시 달성군 현풍면 테크노중앙대로 *** 대구
2 유성운 대한민국 대구광역시 달성군 현풍면 테크노중앙대로 *** 대구
3 박정현 대한민국 대구광역시 달성군 현풍면 테크노중앙대로 *** 대구
4 박석재 대한민국 대구광역시 달성군 현풍면 테크노중앙대로 *** 대구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인이룸리온 대한민국 서울특별시 서초구 사평대로 ***, *층 (반포동)
2 특허법인리온 대한민국 서울특별시 서초구 사평대로 ***, *층(반포동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2014.11.03 수리 (Accepted) 1-1-2014-1057315-01
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2015.04.10 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2015.06.10 수리 (Accepted) 9-1-2015-0039715-03
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2015.09.21 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2015-0649938-56
5 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2015.11.20 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2015-1136161-87
6 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2015.11.20 수리 (Accepted) 1-1-2015-1136154-67
7 [복대리인선임]대리인(대표자)에 관한 신고서
[Appointment of Sub-agent] Report on Agent (Representative)		 2016.04.01 수리 (Accepted) 1-1-2016-0314924-48
8 최후의견제출통지서
Notification of reason for final refusal		 2016.04.27 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0308132-55
9 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2016.05.24 수리 (Accepted) 1-1-2016-0499363-72
10 거절결정서
Decision to Refuse a Patent		 2016.10.25 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0766783-77
11 [법정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Extension of Legal Period] Request for Extension of Period (Reduction, Expiry Reconsideration)		 2016.11.24 수리 (Accepted) 7-1-2016-0065368-83
12 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2016.12.16 수리 (Accepted) 1-1-2016-1236444-50
13 [명세서등 보정]보정서(재심사)
Amendment to Description, etc(Reexamination)		 2016.12.16 보정승인 (Acceptance of amendment) 1-1-2016-1236428-29
14 거절결정서
Decision to Refuse a Patent		 2017.01.06 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2017-0016724-93
15 [분할출원]특허출원서
[Divisional Application] Patent Application		 2017.02.08 수리 (Accepted) 1-1-2017-0132127-97
16 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2018.12.18 수리 (Accepted) 4-1-2018-5260250-39
17 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2020.06.18 수리 (Accepted) 4-1-2020-5134633-04
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번호 청구항
1 1
세포에 전이체 단백질(translocator protein, TSPO) 리간드를 처리한 다음, TSPO 대사체를 포함하는 세포 추출물을 분리하는 단계; 및 상기 세포 추출물에 포함된 단백질의 농도를 분석한 다음, TSPO 리간드를 처리하지 않은 세포 추출물과의 비교를 통해 TSPO에 의한 대사체를 분석하는 단계; 를 포함하는 TSPO 대사체 분석방법
2 2
제1항에 있어서, 상기 세포는 뇌 시상하부 세포인 것을 특징으로 하는 TSPO 대사체 분석방법
3 3
제1항에 있어서, 상기 전이체 단백질(translocator protein, TSPO) 리간드는 PK11195[1-(2-chloro-phenyl)-N-methyl-N-(1-methylpropyl)-3-isoquinoline carboxamide]인 것을 특징으로 하는 TSPO 대사체 분석방법
4 4
제1항에 있어서, 상기 단백질 농도 분석은 대사체 물질의 비행시간(Time of flight, TOF)를 이용한 LC/Q-TOFMS(liquid chromatography/quadrupole time-of-flight mass spectrometry)를 이용하는 것을 특징으로 하는 TSPO 대사체 분석방법
5 5
제1항에 있어서, TSPO 대사체 분석방법은(a) 세포에 전이체 단백질(translocator protein, TSPO) 리간드를 처리하여 3~6시간 동안 반응시킨 다음, TSPO 대사체를 포함하는 세포 추출물을 수득하는 단계; (b) 상기 세포 추출물에 내부표준물질로 레세르핀(reserpine)을 첨가한 후, 유기용매를 처리하여 원심분리를 수행하는 단계; (c) 상기 원심분리로 인해 분리된 수용액층(Aqueous phase; 상층), 단백질층(Protein Disc
6 6
제1항에 있어서, 상기 (a) 단계의 세포추출은 메탄올 및 물의 혼합용매를 이용하여 추출하는 것을 특징으로 하는 TSPO 대사체 분석방법
7 7
제1항에 있어서, 상기 (b) 단계의 유기용매는 클로로포름인 것을 특징으로 하는 TSPO 대사체 분석방법
8 8
제1항에 있어서, 상기 TSPO에 의한 대사체는 L-올레안드로실-올레안돌라이드(L-oleandrosyl-oleandolide), C8-디하이드로세라마이드(C8-Dihydroceramide), b-D-글루코피라뉴로닉 산(b-D-Glucopyranuronic acid), N2-석시닐-L-아르기닌(N2-Succinyl-L-arginine), 우라실(Uracil), 피틸 디포스페이트(Phytyl diphosphate), S-(하이드로시페닐아세토시오하이드록시모일)-L-시스테인(S-(Hydroxyphenylacetothiohydroximoyl)-L-cysteine), 유로코르티손(Urocortisone), 테트라코사헥사엔오일-CoA(Tetracosahexaenoyl-CoA), 코르티손 아세테이트(cortisone acetate), 16(S)-HETE, 피토스핑고신(Phytosphingosine), 6-(2-클로로-5(트리플루오로메틸)페닐)-1-페닐-2-티오바이우레아(6-(2-chloro-5-(trifluoromethyl)phenyl)-1-phenyl-2-thiobiurea), 트리페닐포스핀 옥사이드(Triphenylphosphine oxide), 니코티뉴릭 산(Nicotinuric acid), CMP-N-글리코로일뉴라미네이트(CMP-N-glycoloylneuraminate), 1-헥사데카놀(1-Hexadecanol), 호모아이소시트레이트(Homoisocitrate), N-팔미토일 트립토판(N-palmitoyl tryptophan), N-스테로일 글루탐산(N-stearoyl glutamic acid), N-아세틸락토사민(N-acetyllactosamine), L-유로빌린(L-urobilin), 7a-하이드록시-3-옥소콜레스트-4-엔-27-오익 산(7a-hydroxy-3-oxocholest-4-en-27-oic acid), 포스파티딜에탄올아민(Phosphatidylethanolamine) 및 트리글리세라이드(Triglyceride)로 구성된 군에서 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 하는 TSPO 대사체 분석방법
9 9
제1항 내지 제8항의 어느 한 항의 방법으로 분석된 TSPO 대사체를 포함하는 TSPO 대사조절 분석 마커
10 10
제9항에 있어서, 상기 TSPO에 의한 대사체는 L-올레안드로실-올레안돌라이드(L-oleandrosyl-oleandolide), C8-디하이드로세라마이드(C8-Dihydroceramide), b-D-글루코피라뉴로닉 산(b-D-Glucopyranuronic acid), N2-석시닐-L-아르기닌(N2-Succinyl-L-arginine), 우라실(Uracil), 피틸 디포스페이트(Phytyl diphosphate), S-(하이드로시페닐아세토시오하이드록시모일)-L-시스테인(S-(Hydroxyphenylacetothiohydroximoyl)-L-cysteine), 유로코르티손(Urocortisone), 테트라코사헥사엔오일-CoA(Tetracosahexaenoyl-CoA), 코르티손 아세테이트(cortisone acetate), 16(S)-HETE, 피토스핑고신(Phytosphingosine), 6-(2-클로로-5(트리플루오로메틸)페닐)-1-페닐-2-티오바이우레아(6-(2-chloro-5-(trifluoromethyl)phenyl)-1-phenyl-2-thiobiurea), 트리페닐포스핀 옥사이드(Triphenylphosphine oxide), 니코티뉴릭 산(Nicotinuric acid), CMP-N-글리코로일뉴라미네이트(CMP-N-glycoloylneuraminate), 1-헥사데카놀(1-Hexadecanol), 호모아이소시트레이트(Homoisocitrate), N-팔미토일 트립토판(N-palmitoyl tryptophan), N-스테로일 글루탐산(N-stearoyl glutamic acid), N-아세틸락토사민(N-acetyllactosamine), L-유로빌린(L-urobilin), 7a-하이드록시-3-옥소콜레스트-4-엔-27-오익 산(7a-hydroxy-3-oxocholest-4-en-27-oic acid), 포스파티딜에탄올아민(Phosphatidylethanolamine) 및 트리글리세라이드(Triglyceride)로 구성된 군에서 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 하는 TSPO 대사조절 분석 마커
11 11
제1항 내지 제8항의 어느 한 항의 방법으로 분석된 TSPO 대사체의 발현정도를 분석하는 단계를 포함하는 TSPO 활성 측정 방법
12 12
제11항에 있어서, 상기 TSPO에 의한 대사체는 L-올레안드로실-올레안돌라이드(L-oleandrosyl-oleandolide), C8-디하이드로세라마이드(C8-Dihydroceramide), b-D-글루코피라뉴로닉 산(b-D-Glucopyranuronic acid), N2-석시닐-L-아르기닌(N2-Succinyl-L-arginine), 우라실(Uracil), 피틸 디포스페이트(Phytyl diphosphate), S-(하이드로시페닐아세토시오하이드록시모일)-L-시스테인(S-(Hydroxyphenylacetothiohydroximoyl)-L-cysteine), 유로코르티손(Urocortisone), 테트라코사헥사엔오일-CoA(Tetracosahexaenoyl-CoA), 코르티손 아세테이트(cortisone acetate), 16(S)-HETE, 피토스핑고신(Phytosphingosine), 6-(2-클로로-5(트리플루오로메틸)페닐)-1-페닐-2-티오바이우레아(6-(2-chloro-5-(trifluoromethyl)phenyl)-1-phenyl-2-thiobiurea), 트리페닐포스핀 옥사이드(Triphenylphosphine oxide), 니코티뉴릭 산(Nicotinuric acid), CMP-N-글리코로일뉴라미네이트(CMP-N-glycoloylneuraminate), 1-헥사데카놀(1-Hexadecanol), 호모아이소시트레이트(Homoisocitrate), N-팔미토일 트립토판(N-palmitoyl tryptophan), N-스테로일 글루탐산(N-stearoyl glutamic acid), N-아세틸락토사민(N-acetyllactosamine), L-유로빌린(L-urobilin), 7a-하이드록시-3-옥소콜레스트-4-엔-27-오익 산(7a-hydroxy-3-oxocholest-4-en-27-oic acid), 포스파티딜에탄올아민(Phosphatidylethanolamine) 및 트리글리세라이드(Triglyceride)로 구성된 군에서 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 하는 TSPO 활성 측정 방법
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 미래창조과학부 대구경북과학기술원 뇌과학원천기술개발사업 뇌대사체분석 및 자가포식작용 기반 대사조절 원천기술개발
2 미래창조과학부 대구경북과학기술원 MIREBraiN사업 뇌대사체학연구센터사업
3 미래창조과학부 대구경북과학기술원 DGIST 특성화지원 융합과학중점센터 운영 신경 가소성 기반 재활 가능한 뇌질환의 조절 기법 연구