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제1 프로모터와, 상기 제1 프로모터에 의해 발현이 조절되고, CadC 단백질을 코딩하는 cadC 유전자를 포함하는 제1 유전자 컨스트럭트; 및제2 프로모터, 상기 제2 프로모터에 의해 발현이 조절되는 목적 단백질의 유전자가 클로닝되는 다중 클로닝 자리(Multiple Cloning Site, MCS), 및 상기 제2 프로모터 및 상기 다중 클로닝 자리의 사이에 개재되고, 상기 CadC 단백질이 결합하여 상기 제2 프로모터에 의한 목적 단백질의 발현이 저해되는 오퍼레이터 cadO;를 포함하는 제2 유전자 컨스트럭트;를 포함하고,상기 cadO 및 cadC 유전자는 바실러스 오세아니씨디미니스(Bacillus oceanisediminis)에서 유래되며,상기 CadC 단백질은 서열번호 1 내지 서열번호 6에서 선택되는 어느 하나의 아미노산 서열이고,중금속의 존재 하에서, 상기 CadC 단백질이 상기 cadO로부터 분리됨으로써, 상기 제2 프로모터에 의한 목적 단백질의 발현이 활성화되는 것을 특징으로 하는 발현 벡터
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제1 프로모터와, 상기 제1 프로모터에 의해 발현이 조절되고, CadC 단백질을 코딩하는 cadC 유전자를 포함하는 제1 유전자 컨스트럭트; 및제2 프로모터, 상기 제2 프로모터에 의해 발현이 조절되는 목적 단백질의 유전자가 클로닝되는 다중 클로닝 자리(Multiple Cloning Site, MCS), 및 상기 제2 프로모터 및 상기 다중 클로닝 자리의 사이에 개재되고, 상기 CadC 단백질이 결합하여 상기 제2 프로모터에 의한 목적 단백질의 발현이 저해되는 오퍼레이터 cadO;를 포함하는 제2 유전자 컨스트럭트;를 포함하고,상기 제1 유전자 컨스트럭트는 T7 RNA 중합효소를 코딩하는 T7RNAP 유전자를 더 포함하고,상기 제1 유전자 컨스트럭트는 상기 제1 프로모터와 상기 cadC 유전자 또는 T7RNAP 유전자 사이에 cadO를 더 포함하고,상기 제2 유전자 컨스트럭트의 제2 프로모터는 상기 T7 RNA 중합효소가 결합하는 T7 프로모터이며,중금속의 존재 하에서, 상기 CadC 단백질이 상기 cadO로부터 분리됨으로써, 상기 제2 프로모터에 의한 목적 단백질의 발현이 활성화되는 것을 특징으로 하는 발현 벡터
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청구항 2에 있어서,상기 제1 유전자 컨스트럭트는, 상기 cadC 유전자와 상기 T7RNAP 유전자 사이에 리보솜 결합 부위(RBS)을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 발현 벡터
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삭제
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청구항 2에 있어서,상기 제1 유전자 컨스트럭트는 제1 프로모터, cadO, cadC 유전자 및 T7RNAP 유전자의 순서로 구비되는 것을 특징으로 하는 발현 벡터
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청구항 1 내지 청구항 3 및 청구항 5 중 어느 한 항에 있어서,상기 CadC 단백질과 상기 CadC 단백질이 결합하는 cadO는 각각 서열번호 1 및 서열번호 69, 서열번호 2 및 서열번호 70, 서열번호 3 및 서열번호 71, 서열번호 4 및 서열번호 72, 서열번호 5 및 서열번호 73, 또는 서열번호 6 및 서열번호 74의 아미노산 서열 및 염기 서열인 것을 특징으로 하는 발현 벡터
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청구항 6에 있어서,상기 중금속은 카드뮴 또는 납인 것을 특징으로 하는 발현 벡터
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8
제1 프로모터와, 상기 제1 프로모터에 의해 발현이 조절되고, CadC 단백질을 코딩하는 cadC 유전자를 포함하는 제1 유전자 컨스트럭트; 및제2 프로모터, 상기 제2 프로모터에 의해 발현이 조절되는 리포터 단백질을 코딩하는 리포터 유전자, 및 상기 제2 프로모터 및 상기 리포터 유전자의 사이에 개재되고, 상기 CadC 단백질이 결합하여 상기 제2 프로모터에 의한 리포터 단백질의 발현이 저해되는 오퍼레이터 cadO;를 포함하는 제2 유전자 컨스트럭트;가숙주세포 내에 형질전환되어 있고,상기 cadO 및 cadC 유전자는 바실러스 오세아니씨디미니스(Bacillus oceanisediminis)에서 유래되며,상기 CadC 단백질은 서열번호 1 내지 서열번호 6에서 선택되는 어느 하나의 아미노산 서열이고,중금속의 존재 하에서, 상기 CadC 단백질이 상기 cadO로부터 분리됨으로써, 상기 제2 프로모터에 의해 리포터 단백질이 발현되는 것을 특징으로 하는 중금속 검출용 형질전환체
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9
제1 프로모터와, 상기 제1 프로모터에 의해 발현이 조절되고, CadC 단백질을 코딩하는 cadC 유전자를 포함하는 제1 유전자 컨스트럭트; 및제2 프로모터, 상기 제2 프로모터에 의해 발현이 조절되는 리포터 단백질을 코딩하는 리포터 유전자, 및 상기 제2 프로모터 및 상기 리포터 유전자의 사이에 개재되고, 상기 CadC 단백질이 결합하여 상기 제2 프로모터에 의한 리포터 단백질의 발현이 저해되는 오퍼레이터 cadO;를 포함하는 제2 유전자 컨스트럭트;가숙주세포 내에 형질전환되어 있고,상기 제1 유전자 컨스트럭트는 T7 RNA 중합효소를 코딩하는 T7RNAP 유전자를 더 포함하고,상기 제1 유전자 컨스트럭트는 상기 제1 프로모터와 상기 cadC 유전자 또는 T7RNAP 유전자 사이에 cadO를 더 포함하고,상기 제2 유전자 컨스트럭트의 제2 프로모터는 상기 T7 RNA 중합효소가 결합하는 T7 프로모터이며,중금속의 존재 하에서, 상기 CadC 단백질이 상기 cadO로부터 분리됨으로써, 상기 제2 프로모터에 의해 리포터 단백질이 발현되는 것을 특징으로 하는 중금속 검출용 형질전환체
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10
청구항 9에 있어서,상기 제1 유전자 컨스트럭트는, 상기 cadC 유전자와 상기 T7RNAP 유전자 사이에 내부 리보솜 유입점(IRBS)을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 중금속 검출용 형질전환체
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11
삭제
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청구항 9에 있어서,상기 제1 유전자 컨스트럭트는 제1 프로모터, cadO, cadC 유전자 및 T7RNAP 유전자의 순서로 구비되는 것을 특징으로 하는 중금속 검출용 형질전환체
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13
청구항 8 내지 청구항 10 및 청구항 12 중 어느 한 항에 있어서,상기 CadC 단백질과 상기 CadC 단백질이 결합하는 cadO는 각각 서열번호 1 및 서열번호 69, 서열번호 2 및 서열번호 70, 서열번호 3 및 서열번호 71, 서열번호 4 및 서열번호 72, 서열번호 5 및 서열번호 73, 또는 서열번호 6 및 서열번호 74의 아미노산 서열 및 염기 서열인 것을 특징으로 하는 중금속 검출용 형질전환체
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청구항 8 내지 청구항 10 및 청구항 12 중 어느 한 항에 있어서,상기 리포터 유전자는 형광유전자 또는 항생제 내성 유전자인 것을 특징으로 하는 중금속 검출용 형질전환체
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청구항 8 내지 청구항 10 및 청구항 12 중 어느 한 항에 있어서,상기 중금속은 카드뮴 또는 납인 것을 특징으로 하는 중금속 검출용 형질전환체
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16
청구항 8 내지 청구항 10 및 청구항 12 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 유전자 컨스트럭트는 상기 숙주세포의 염색체 내에 삽입된 상태로 존재하고, 상기 제2 유전자 컨스트럭트는 재조합 발현 백터에 포함된 채로 상기 숙주세포 내에 형질전환된 상태로 존재하는 것을 특징으로 하는 중금속 검출용 형질전환체
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17
청구항 16에 있어서,상기 숙주세포에는 제3 프로모터 및 상기 제3 프로모터에 의해 발현이 조절되는 CadC 단백질을 코딩하는 cadC 유전자를 포함하는 제3 유전자 컨스트럭트;가 재조합 발현 백터에 포함된 채로 상기 숙주세포 내에 추가적으로 형질전환된 상태로 존재하는 것을 특징으로 하는 중금속 검출용 형질전환체
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18
청구항 17에 있어서,상기 제3 프로모터는 항시 발현 프로모터인 것을 특징으로 하는 중금속 검출용 형질전환체
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청구항 17에 있어서,상기 제2 유전자 컨스트럭트 및 상기 제3 유전자 컨스트럭트는 동일한 재조합 발현 벡터 내에 포함되어 있는 것을 특징으로 하는 중금속 검출용 형질전환체
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