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상피―중간엽 전이(epithelial―mesenchymal transition; EMT) 유도용 세포 배양 기재, 이의 용도 및 제조방법(Cell culture substrate for inducing epithelial―mesenchymal transition, use thereof and preparing the same)

  • 기술번호 : KST2016011228
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 상피-중간엽 전이(epithelial-mesenchymal transition; EMT) 유도용 세포 배양 기재로서, 상부에 세포가 부착하여 배양될 수 있는 편평한 면을 포함하는 일정한 평균직경을 갖는 기둥형태의 구조물이 일정한 간격으로 배열되고, 상기 기둥형태의 구조물은 하나의 기둥의 중심으로부터 인접한 기둥의 중심까지의 거리는 4 μm 이상 30 μm 이하로 조절된 것인 세포 배양 기재; 상기 세포 배양 기재를 이용한 약물 스크리닝 방법; 상기 세포 배양 기재에 환자의 암조직으로부터 분리한 세포를 항암제 후보물질을 처리 또는 비처리하여 부착배양하는 단계를 포함하는 환자맞춤형 항암제 및 섬유화증 치료제의 스크리닝 방법; 및 복수의 기둥형태의 구조물이 음각으로 패턴화된 탄성고분자를 포함하는 중간체 주형(intermediate mold)을 준비하는 단계를 포함하는 상기 세포 배양 기재의 제조방법에 관한 것이다.
Int. CL C12M 3/00 (2006.01) C12N 5/071 (2010.01) G01N 33/574 (2006.01)
CPC C12M 3/00(2013.01) C12M 3/00(2013.01) C12M 3/00(2013.01) C12M 3/00(2013.01) C12M 3/00(2013.01) C12M 3/00(2013.01) C12M 3/00(2013.01) C12M 3/00(2013.01)
출원번호/일자 1020160066676 (2016.05.30)
출원인 한국화학연구원
등록번호/일자 10-1658966-0000 (2016.09.13)
공개번호/일자 10-2016-0065070 (2016.06.08) 문서열기
공고번호/일자 (20160923) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자 10-2014-0063801 (2014.05.27)
관련 출원번호 1020140063801
심사청구여부/일자 Y (2016.07.26)
심사청구항수 12

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국화학연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 이정오 대한민국 대전광역시 유성구
2 김성환 대한민국 대전광역시 유성구
3 최원진 대한민국 서울특별시 은평구
4 문성희 대한민국 경상남도 고성군
5 정종진 대한민국 경기도 고양시 일산
6 박정규 대한민국 대전광역시 서구
7 김지연 대한민국 대전광역시 중구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 손민 대한민국 서울특별시 송파구 법원로 ***, *층(문정동)(특허법인한얼)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국화학연구원 대전광역시 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [분할출원]특허출원서
[Divisional Application] Patent Application
2016.05.30 수리 (Accepted) 1-1-2016-0520070-94
2 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2016.07.26 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2016-0726628-35
3 [심사청구]심사청구(우선심사신청)서
[Request for Examination] Request for Examination (Request for Preferential Examination)
2016.07.26 수리 (Accepted) 1-1-2016-0726629-81
4 등록결정서
Decision to grant
2016.08.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0625343-84
5 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2017.09.14 수리 (Accepted) 4-1-2017-5149265-52
6 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2017.09.14 수리 (Accepted) 4-1-2017-5149242-13
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
상부에 상피세포가 부착하여 배양될 수 있는 편평한 면을 포함하는 일정한 평균직경을 갖는 기둥형태의 구조물이 일정한 간격으로 배열되고, 상기 기둥형태의 구조물은 하나의 기둥의 중심으로부터 인접한 기둥의 중심까지의 거리는 4 μm 이상 30 μm 이하로 조절되는 세포 배양 기재에서 상피세포를 배양하는 단계를 포함하는, 상피세포의 상피-중간엽 전이(epithelial-mesenchymal transition; EMT) 유도를 위한 세포 배양 방법
2 2
제1항에 있어서,상기 기둥형태의 구조물은 1 μm 내지 5 μm의 평균직경을 갖는 것인, 방법
3 3
제1항에 있어서,상기 상피-중간엽 전이 유도는 EMT 유도를 위한 사이토카인을 추가로 포함하지 않는 배지를 이용하여 세포를 부착배양하여 달성되는 것인, 방법
4 4
제3항에 있어서, 상기 EMT 유도를 위한 사이토카인은 TGF-β, BMP-7, EGF, HGF, PDGF 또는 Wnt-3a인 것인, 방법
5 5
제1항에 있어서,상기 EMT 유도는 α-SMA, FAK, N-카데린(N-cadherin), DDR2, 데스민(desmin), 파이브로넥틴(fibronectin), 라미닌-5(laminin-5), MMP-2, MMP-3, MMP-9, S100A4, 신데칸-1/CD138(syndecan-1/CD138), 비멘틴(vimentin) 및 비트로넥틴(vitronectin)으로 구성된 군으로부터 선택되는 중간엽 마커 또는 Src, Smad2, Smad2/3, Smad3, Smad7, Snail, STAT3, Twist-1, Akt, Dsh-1, Dsh-2, Dsh-3, Dkk-1, Dkk-2, Dkk-3, Dkk-4, EOMES, FoxC2, ILK, JAG1, JAG2, JNK, 노긴(noggin), p38 MAP 키나아제, p300 및 Ras로 구성된 군으로부터 선택되는 EMT 신호전달분자의 발현 증가에 의해 나타나는 것인, 방법
6 6
제1항에 있어서,상기 EMT 유도는 액틴, ALCAM, β-카테닌(β-catenin), E-카데린(E-cadherin), 콜라겐 I, 사이토케라틴 8(cytokeratin 8), 사이토케라틴 14, 사이토케라틴 19, EpCAM, 히알루로난(hyaluronan), JAM-A, JAM-B/VE-JAM, JAM-C, JAM-4/IGSF5, 라미닌 I(laminin I), 넥틴-1(nectin-1), 넥틴-2/CD112, 넥틴-3 및 넥틴-4로 구성된 군으로부터 선택되는 상피마커의 발현 감소에 의해 나타나는 것인, 방법
7 7
제1항에 있어서,상기 세포는 암세포 또는 피부, 입, 코, 항문관, 호흡기계통, 소화기계통, 심혈관계통 및 림프계통으로 구성된 군으로부터 선택되는 조직세포 또는 이의 전구체세포인 것인, 방법
8 8
상부에 상피세포가 부착하여 배양될 수 있는 편평한 면을 포함하는 일정한 평균직경을 갖는 기둥형태의 구조물이 일정한 간격으로 배열되고, 상기 기둥형태의 구조물은 하나의 기둥의 중심으로부터 인접한 기둥의 중심까지의 거리는 4 μm 이상 30 μm 이하로 조절되는 세포 배양 기재에 상피세포를 12 내지 48시간 동안 부착배양하는 제1단계;약물 후보물질을 처리 또는 비처리하여, 상기 세포 배양 기재에 세포를 추가로 12시간 내지 72시간 동안 부착배양하는 제2단계;약물 후보물질 처리 세포 및 비처리 세포의 국소부착 관련 단백질 발현수준을 확인하여 비교하는 제3단계; 및약물 후보물질 비처리 세포에 비해 약물 후보물질을 처리하여 배양한 세포에서 국소부착 관련 단백질 발현수준이 증가 또는 감소한 경우 약물 후보물질을 해당 세포에 대한 약효를 갖는 것으로 판단하는 제4단계를 포함하는 상피-중간엽 전이(epithelial-mesenchymal transition; EMT) 억제 약물 스크리닝 방법
9 9
제8항에 있어서,상기 약물은 항암제, 조직 섬유화(tissue fibrosis) 억제제 또는 상처치료제(wound healing agent)인 것인 약물 스크리닝 방법
10 10
상부에 상피세포가 부착하여 배양될 수 있는 편평한 면을 포함하는 일정한 평균직경을 갖는 기둥형태의 구조물이 일정한 간격으로 배열되고, 상기 기둥형태의 구조물은 하나의 기둥의 중심으로부터 인접한 기둥의 중심까지의 거리는 4 μm 이상 30 μm 이하로 조절되는 세포 배양 기재에 환자의 암조직으로부터 분리된 세포를 12 내지 48시간 동안 부착배양하는 제1단계;항암제 후보물질을 처리 또는 비처리하여, 상기 세포 배양 기재에 세포를 추가로 12시간 내지 72시간 동안 부착배양하는 제2단계;항암제 후보물질 처리 세포 및 비처리 세포의 국소부착 관련 단백질 발현수준을 확인하여 비교하는 제3단계; 및항암제 후보물질 비처리 세포에 비해 항암제 후보물질을 처리하여 배양한 세포에서 국소부착 관련 단백질 발현수준이 낮아진 경우 항암제 후보물질을 해당 세포에 대한 항암제로 판단하는 제4단계를 포함하는 환자맞춤형 항암제의 스크리닝 방법
11 11
제10항에 있어서,상기 항암제는 암세포의 전이를 억제하는 것인 스크리닝 방법
12 12
상부에 상피세포가 부착하여 배양될 수 있는 편평한 면을 포함하는 일정한 평균직경을 갖는 기둥형태의 구조물이 일정한 간격으로 배열되고, 상기 기둥형태의 구조물은 하나의 기둥의 중심으로부터 인접한 기둥의 중심까지의 거리는 4 μm 이상 30 μm 이하로 조절되는 세포 배양 기재에 환자의 섬유화증 조직으로부터 분리된 세포를 12 내지 48시간 동안 부착배양하는 제1단계;섬유화증 치료제 후보물질을 처리 또는 비처리하여, 상기 세포 배양 기재에 세포를 추가로 12시간 내지 72시간 동안 부착배양하는 제2단계;섬유화증 치료제 후보물질 처리 세포 및 비처리 세포의 국소부착 관련 단백질 발현수준을 확인하여 비교하는 제3단계; 및섬유화증 치료제 후보물질 비처리 세포에 비해 섬유화증 치료제 후보물질을 처리하여 배양한 세포에서 국소부착 관련 단백질 발현수준이 낮아진 경우 섬유화증 치료제 후보물질을 해당 세포에 대한 섬유화증 치료제로 판단하는 제4단계를 포함하는 환자맞춤형 섬유화증 치료제의 스크리닝 방법
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1 KR1020150136688 KR 대한민국 FAMILY

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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 미래창조과학부 한국화학연구원 협동연구사업 NT 기반 세포신호측정계 구축