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브라제인 고효율 분비발현용 형질전환 효모를 이용한 브라제인 다중 변이체의 대량 생산 방법(Mass production method of brazzein multiple mutated variants using transformed yeast for high level secretory expression of brazzein)

  • 기술번호 : KST2016011788
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요약 본 발명은 브라제인 다중 변이체 고효율 분비발현용 형질전환 효모 및 이를 이용한 브라제인 다중 변이체의 대량 생산 방법에 관한 것이다. 본 발명은 단백질의 이황화결합의 형성과 이성질화에 관여하는 단백질인 PDI와 ERO의 과발현으로 브라제인의 올바른 구조 형성을 유도하여 균체 밖으로 배출되는 재조합 브라제인 다중 변이체 변이체의 양을 증가시킴으로써 브라제인 다중 변이체 고효율 분비발현용 효모 발현계를 구축하였다.
Int. CL C12N 9/90 (2006.01.01) C12N 15/80 (2006.01.01) C12P 21/00 (2006.01.01) C07K 14/415 (2006.01.01)
CPC C12N 9/90(2013.01) C12N 9/90(2013.01) C12N 9/90(2013.01) C12N 9/90(2013.01) C12N 9/90(2013.01) C12N 9/90(2013.01) C12N 9/90(2013.01) C12N 9/90(2013.01)
출원번호/일자 1020140175123 (2014.12.08)
출원인 주식회사 바이오스위트
등록번호/일자 10-1682663-0000 (2016.11.29)
공개번호/일자 10-2016-0069589 (2016.06.17) 문서열기
공고번호/일자 (20161221) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2014.12.08)
심사청구항수 1

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 주식회사 바이오스위트 대한민국 서울특별시 영등포구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 공광훈 대한민국 인천광역시 서구
2 노진석 대한민국 경기도 수원시 권선구
3 조현주 대한민국 서울특별시 서초구
4 임진경 대한민국 인천광역시 남동구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이상문 대한민국 서울시 강남구 역삼로 *** 남경빌딩 ***호(삼오국제특허법률사무소)
2 박천도 대한민국 서울시 강남구 역삼로 *** 남경빌딩 ***호(삼오국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 주식회사 바이오스위트 대한민국 서울특별시 영등포구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2014.12.08 수리 (Accepted) 1-1-2014-1192811-13
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2015.05.11 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2015.07.10 수리 (Accepted) 9-1-2015-0046192-88
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2016.02.22 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0133193-70
5 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2016.04.20 수리 (Accepted) 1-1-2016-0379203-05
6 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2016.04.20 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2016-0379207-87
7 [출원인변경]권리관계변경신고서
[Change of Applicant] Report on Change of Proprietary Status
2016.06.14 수리 (Accepted) 1-1-2016-0569900-66
8 거절결정서
Decision to Refuse a Patent
2016.07.13 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0505458-44
9 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2016.08.12 수리 (Accepted) 1-1-2016-0787131-19
10 [명세서등 보정]보정서(재심사)
Amendment to Description, etc(Reexamination)
2016.08.12 보정승인 (Acceptance of amendment) 1-1-2016-0787075-50
11 수수료 반환 안내서
Notification of Return of Official Fee
2016.08.16 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2016-0122385-28
12 등록결정서
Decision to Grant Registration
2016.08.23 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0603476-32
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2018.03.29 수리 (Accepted) 4-1-2018-5055720-33
14 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2018.06.05 수리 (Accepted) 4-1-2018-5104001-63
15 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.12.02 수리 (Accepted) 4-1-2020-5272706-31
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
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클루이베로마이세스 락티스(Kluyveromyces lactis)를 브라제인 다중 변이체 발현을 위한 숙주로 하고, 브라제인 다중 변이체 유전자를 포함하는 재조합 발현벡터; 및 클루이베로마이세스 락티스 유래의 단백질 이황화결합 이성화효소(protein disulfide isomerase, PDI) 유전자를 포함하는 재조합 발현벡터;로 동시에 형질전환된 클루이베로마이세스 락티스(Kluyveromyces lactis)를 배양하는 단계를 포함하되, 상기 브라제인 다중 변이체는 서열번호 14로 표시되는 브라제인 3차 변이체, 서열번호 15로 표시되는 브라제인 4차 변이체, 서열번호 16으로 표시되는 브라제인 4차 변이체, 서열번호 17로 표시되는 브라제인 4차 변이체 및 서열번호 18로 표시되는 브라제인 4차 변이체인 브라제인으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나이고,상기 브라제인 다중 변이체 유전자를 포함하는 재조합 발현벡터는 서열번호 1로 표시되는 클루이베로마이세스 락티스(Kluyveromyces lactis) 알파-메이팅(α-mating) 신호서열 및 LAC4-PBⅠ 프로모터를 더 포함하며, 상기 배양 시 내재적 ERO(Endoplasmic reticulum oxidoreductin)의 과발현을 위해 배지에 DTT를 첨가하는 브라제인 다중 변이체의 대량 생산 방법
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 미래창조과학부 중앙대학교 산학협력단 과학기술기반조성사업 신개념 단밸질 기반 저칼로리 감미료