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합성 글루탐산 탈수소효소 프로모터를 이용한 목적단백질의 생산 방법(METHOD FOR DEVELOPMENT OF TARGET PROTEIN USING SYNTHETIC GLUTAMATE DEHYDROGENASE PROMOTER)

  • 기술번호 : KST2016012039
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 연구에서는 아미노산 생산 균주인 코리네박테리움 글루타미쿰을 이용하여 합성 프로모터 라이브러리(Synthetic promoter library(SPL))를 구축하기 위해 gdh 프로모터를 선정하였다. SPL 제작을 위해서 gdh 프로모터의 -10과 -35 부위의 염기서열의 변화를 유도하기 위해 랜덤 프라이머를 이용하여 PCR을 수행한 다음 다양한 염기서열을 가진 프로모터를 획득하였다. 프로모터 염기서열의 변화에 따라 발현량이 기존의 절반 정도에서부터 6배 이상까지 다양해지는 것을 확인할 수 있었다. SPL은 특정 효소의 발현량을 조절하여 생합성 경로의 병목현상을 해소할 수 있으므로 유용한 대사공학 도구로 사용될 수 있다.
Int. CL C12N 15/63 (2006.01)
CPC C12P 21/00(2013.01) C12P 21/00(2013.01) C12P 21/00(2013.01) C12P 21/00(2013.01) C12P 21/00(2013.01)
출원번호/일자 1020140178915 (2014.12.12)
출원인 한국외국어대학교 연구산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2016-0072278 (2016.06.23) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 공개
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2014.12.12)
심사청구항수 4

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국외국어대학교 연구산학협력단 대한민국 경기도 용인시 처인구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 이현환 대한민국 서울특별시 강동구
2 김성집 대한민국 서울특별시 동작구
3 한찬욱 대한민국 경기도 용인시 기흥구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이은철 대한민국 서울특별시 송파구 법원로**길 **, A동 *층 ***호 (문정동, H비지니스파크)(*T국제특허법률사무소)
2 이우영 대한민국 서울특별시 송파구 법원로**길 **, A동 *층 ***호 (문정동, H비지니스파크)(*T국제특허법률사무소)
3 이수찬 대한민국 서울특별시 송파구 법원로**길 **, A동 *층 ***호 (문정동, H비지니스파크)(*T국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2014.12.12 수리 (Accepted) 1-1-2014-1208053-31
2 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2015.02.04 수리 (Accepted) 4-1-2015-5015664-33
3 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2015.03.18 수리 (Accepted) 4-1-2015-5034583-23
4 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2015.05.27 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
5 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2015.07.13 수리 (Accepted) 9-1-2015-0047692-73
6 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2015.08.04 수리 (Accepted) 4-1-2015-5103814-83
7 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2015.08.05 수리 (Accepted) 4-1-2015-5104573-42
8 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2016.03.03 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0166777-96
9 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2016.05.03 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2016-0425283-50
10 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2016.05.03 수리 (Accepted) 1-1-2016-0425256-27
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2016.08.22 수리 (Accepted) 4-1-2016-5118942-04
12 최후의견제출통지서
Notification of reason for final refusal
2016.09.12 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0655428-14
13 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2016.11.14 수리 (Accepted) 1-1-2016-1108899-96
14 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2016.12.12 수리 (Accepted) 1-1-2016-1217496-23
15 심사처리보류(연기)보고서
Report of Deferment (Postponement) of Processing of Examination
2017.04.26 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-6-2017-0062155-15
16 거절결정서
Decision to Refuse a Patent
2017.06.20 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2017-0426351-16
17 [법정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
2017.07.20 수리 (Accepted) 1-1-2017-0699470-29
18 법정기간연장승인서
2017.07.24 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2017-0101284-13
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번호 청구항
1 1
(1) (a) 프로모터, (b) 목적단백질 코딩 염기서열 및 (c) 상기 프로모터와 목적단백질 코딩 염기서열 사이에 위치한 제한효소부위를 포함하는 벡터를 제조하는 단계;(2) 상기 (1)단계에서 제조된 벡터에 랜덤 프라이머를 이용하여 합성 프로모터를 획득하는 단계;(3) 상기 합성 프로모터가 삽입된 재조합벡터를 세포에 도입시키는 단계;(4) 상기 (3)단계의 재조합벡터가 도입된 세포들 중에 목적단백질 발현 양상을 나타내는 세포를 탐색하여 선정하는 단계; 및(5) 상기 (4)단계에서 선정된 세포를 배양하여 목적단백질을 생산하는 단계;를 포함하는 합성 글루탐산 탈수소효소(glutamate dehydrogenase, gdh) 프로모터를 이용한 목적단백질의 생산 방법
2 2
제 1 항에 있어서,상기 (2)단계의 합성 프로모터는 -35부위가 서열번호 1의 염기서열로 구성되고 -10부위가 서열번호 2의 염기서열로 구성되는 것을 특징으로 하는 합성 글루탐산 탈수소효소 프로모터를 이용한 목적단백질의 생산 방법
3 3
제 1 항에 있어서,상기 (2)단계의 합성 프로모터는 -35부위가 서열번호 3의 염기서열로 구성되고 -10부위가 서열번호 4의 염기서열로 구성되는 것을 특징으로 하는 합성 글루탐산 탈수소효소 프로모터를 이용한 목적단백질의 생산 방법
4 4
제 1 항에 있어서,상기 (2)단계의 합성 프로모터는 -35부위가 서열번호 5의 염기서열로 구성되고 -10부위가 서열번호 6의 염기서열로 구성되는 것을 특징으로 하는 합성 글루탐산 탈수소효소 프로모터를 이용한 목적단백질의 생산 방법
5 5
제 1 항에 있어서,상기 (3)단계의 재조합벡터는 -35부위가 서열번호 1의 염기서열로 구성되고 -10부위가 서열번호 2의 염기서열로 구성된 합성 프로모터를 포함하는 것을 특징으로 하는 합성 글루탐산 탈수소효소 프로모터를 이용한 목적단백질의 생산 방법
6 6
제 1 항에 있어서,상기 (3)단계의 재조합벡터는 -35부위가 서열번호 3의 염기서열로 구성되고 -10부위가 서열번호 4의 염기서열로 구성된 합성 프로모터를 포함하는 것을 특징으로 하는 합성 글루탐산 탈수소효소 프로모터를 이용한 목적단백질의 생산 방법
7 7
제 1 항에 있어서,상기 (3)단계의 재조합벡터는 -35부위가 서열번호 5의 염기서열로 구성되고 -10부위가 서열번호 6의 염기서열로 구성된 합성 프로모터를 포함하는 것을 특징으로 하는 합성 글루탐산 탈수소효소 프로모터를 이용한 목적단백질의 생산 방법
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