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형질전환동물 제작을 위한 형질주입 시스템(Transfection system for production of transgenic animal)

  • 기술번호 : KST2016012580
  • 담당센터 : 서울서부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-6124-6930
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 형질전환동물 제작을 위한 형질주입 시스템에 관한 것으로, 본 발명에 따른 형질주입 시스템은 바이러스용 벡터를 사용함으로써 동물의 성체에서 직접 형질전환이 가능하며, 벡터의 세포특이적 프로모터 서열 및 목적하는 유전자의 shRNA 서열만 변경함으로써, 세포특이적으로 목적하는 유전자의 발현 억제를 조절할 수 있을 뿐만 아니라, 위치특이적 재조합 효소가 인식하는 두 개의 서열 사이에 종결코돈을 포함함으로써, 원하는 시기에 유전자의 발현을 억제시킬 수 있다. 따라서 본 발명에 따른 형질주입 시스템을 이용하면, 다양한 종의 동물 성체에서 원하는 시기에 세포특이적으로 목적 유전자의 발현을 억제시킬 수 있기 때문에 다양한 유전자의 역할 연구에 용이하게 사용될 수 있을 것으로 기대된다.
Int. CL C12N 15/86 (2006.01) C12N 15/87 (2006.01) C12N 15/113 (2010.01) C12N 15/867 (2006.01) A01K 67/027 (2006.01) C12N 15/861 (2006.01)
CPC C12N 15/87(2013.01) C12N 15/87(2013.01) C12N 15/87(2013.01) C12N 15/87(2013.01) C12N 15/87(2013.01) C12N 15/87(2013.01) C12N 15/87(2013.01) C12N 15/87(2013.01) C12N 15/87(2013.01) C12N 15/87(2013.01)
출원번호/일자 1020140186879 (2014.12.23)
출원인 연세대학교 산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2016-0076628 (2016.07.01) 문서열기
공고번호/일자 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2014.12.23)
심사청구항수 20

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 연세대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 서대문구

발명자

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1 강신욱 대한민국 서울특별시 서대문구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인 정안 대한민국 서울특별시 강남구 선릉로 *** ***층(논현동,썬라이더빌딩)

최종권리자

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1 연세대학교 산학협력단 서울특별시 서대문구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2014.12.23 수리 (Accepted) 1-1-2014-1249178-34
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2015.05.11 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2015.07.10 수리 (Accepted) 9-1-2015-0044553-10
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2016.07.05 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0488296-00
5 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2016.08.11 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2016-0779837-02
6 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2016.08.11 수리 (Accepted) 1-1-2016-0779836-56
7 등록결정서
Decision to grant
2017.01.23 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2017-0059016-27
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번호 청구항
1 1
(a) 인간을 제외한 출생 이후의 개체에 세포특이적 프로모터(cell-type specific promoter) 및 위치특이적 재조합 효소(site-specific recombinase)를 포함하는 제 1 재조합 발현 벡터를 형질주입(transfection)하는 단계; 및(b) 상기 개체에 위치특이적 재조합 효소의 인식 서열 및 목적 유전자의 발현 억제용 올리고뉴클레오티드(oligonucleotide)를 포함하는 제 2 재조합 발현 벡터를 형질주입하는 단계를 포함하고,상기 제 2 재조합 발현 벡터는 두 개의 재조합 효소 인식 서열 사이에 종결코돈(stop codon) 서열을 포함하는, 목적 유전자의 발현을 억제하는 방법
2 2
제 1 항에 있어서,상기 세포특이적 프로모터는 서열번호 15의 염기서열을 포함하는 Hoxb7 프로모터인 것을 특징으로 하는, 방법
3 3
제 1 항에 있어서,상기 재조합 효소는 세포특이적 프로모터의 조절을 받는 것을 특징으로 하는, 방법
4 4
제 1 항에 있어서,상기 위치특이적 재조합 효소는 Cre 또는 Flp인 것을 특징으로 하는, 방법
5 5
제 1 항에 있어서,상기 위치특이적 재조합 효소가 인식하는 서열은 loxP 또는 FRT인 것을 특징으로 하는, 방법
6 6
제 1 항에 있어서,상기 목적 유전자의 발현 억제용 올리고뉴클레오티드는 목적 유전자의 shRNA(short hairpin RNA)인 것을 특징으로 하는, 방법
7 7
제 1 항에 있어서,상기 재조합 발현 벡터는 렌티바이러스(lentivirus), 아데노바이러스(adenovirus), 또는 레트로바이러스(retrovirus) 용인 것을 특징으로 하는, 방법
8 8
(a) 인간을 제외한 출생 이후의 개체에 세포특이적 프로모터(cell-type specific promoter) 및 위치특이적 재조합 효소(site-specific recombinase)를 포함하는 제 1 재조합 발현 벡터를 형질주입(transfection)하는 단계; 및(b) 상기 개체에 목적하는 시기에 상기 위치특이적 재조합 효소의 인식 서열 및 목적 유전자의 발현 억제용 올리고뉴클레오티드(oligonucleotide)를 포함하는 제 2 재조합 발현 벡터를 형질주입하는 단계를 포함하고,상기 제 2 재조합 발현 벡터는 두 개의 재조합 효소 인식 서열 사이에 종결코돈(stop codon) 서열을 포함하는, 목적하는 시기의 목적 유전자의 기능을 확인하는 방법
9 9
제 8 항에 있어서,상기 세포특이적 프로모터는 서열번호 15의 염기서열을 포함하는 Hoxb7 프로모터인 것을 특징으로 하는, 방법
10 10
제 8 항에 있어서,상기 재조합 효소는 세포특이적 프로모터의 조절을 받는 것을 특징으로 하는, 방법
11 11
제 8 항에 있어서,상기 위치특이적 재조합 효소는 Cre 또는 Flp인 것을 특징으로 하는, 방법
12 12
제 8 항에 있어서,상기 위치특이적 재조합 효소가 인식하는 서열은 loxP 또는 FRT인 것을 특징으로 하는, 방법
13 13
제 8 항에 있어서,상기 목적 유전자의 발현 억제용 올리고뉴클레오티드는 목적 유전자의 shRNA(short hairpin RNA)인 것을 특징으로 하는, 방법
14 14
제 8 항에 있어서,상기 재조합 발현 벡터는 렌티바이러스(lentivirus), 아데노바이러스(adenovirus), 또는 레트로바이러스(retrovirus) 용인 것을 특징으로 하는, 방법
15 15
세포특이적 프로모터(cell-type specific promoter) 및 위치특이적 재조합 효소(site-specific recombinase)를 포함하는 제 1 재조합 발현 벡터와 상기 위치특이적 재조합 효소의 인식 서열 및 목적 유전자의 발현 억제용 올리고뉴클레오티드(oligonucleotide)를 포함하는 제 2 재조합 발현 벡터를 포함하고,상기 제 2 재조합 발현 벡터는 두 개의 재조합 효소 인식 서열 사이에 종결코돈(stop codon) 서열을 포함하는, 인간을 제외한 출생 이후의 단일 개체에서 목적 유전자의 발현 억제용 조성물
16 16
(a) 세포특이적 프로모터(cell-type specific promoter) 및 위치특이적 재조합 효소(site-specific recombinase)를 포함하는 제 1 지역(region); 및(b) 프로모터, 상기 위치특이적 재조합 효소의 인식 서열 및 목적 유전자의 발현 억제용 올리고뉴클레오티드(oligonucleotide)를 포함하는 제 2 지역을 포함하는, 재조합 발현 벡터
17 17
제 16 항의 벡터를 인간을 제외한 동물에 형질주입(transfection)하는 단계를 포함하는, 인간을 제외한 형질전환동물의 제조 방법
18 18
제 16 항의 벡터를 포함하는, 인간을 제외한 형질전환동물
19 19
(a) 인간을 제외한 출생 이후의 개체에 세포특이적 프로모터(cell-type specific promoter) 및 위치특이적 재조합 효소(site-specific recombinase)를 포함하는 제 1 재조합 발현 벡터를 인간을 제외한 동물에 형질주입(transfection)하는 단계; 및(b) 상기 개체에 위치특이적 재조합 효소의 인식 서열 및 목적 유전자의 발현 억제용 올리고뉴클레오티드(oligonucleotide)를 포함하는 제 2 재조합 발현 벡터를 인간을 제외한 동물에 형질주입하는 단계를 포함하고,상기 제 2 재조합 발현 벡터는 두 개의 재조합 효소 인식 서열 사이에 종결코돈(stop codon) 서열을 포함하는, 형질전환동물의 제조 방법
20 20
세포특이적 프로모터(cell-type specific promoter) 및 위치특이적 재조합 효소(site-specific recombinase)를 포함하는 제 1 재조합 발현 벡터와 상기 위치특이적 재조합 효소의 인식 서열 및 목적 유전자의 발현 억제용 올리고뉴클레오티드(oligonucleotide)를 포함하는 제 2 재조합 발현 벡터를 포함하고,상기 제 2 재조합 발현 벡터는 두 개의 재조합 효소 인식 서열 사이에 종결코돈(stop codon) 서열을 포함하는, 인간을 제외한 출생 이후의 단일 개체로써의 형질전환동물
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1 보건복지부 연세대학교 산학협력단 질환극복기술개발 당뇨병성 신증에서 신세뇨관 내 WNT4가 세뇨관 세포의 상피세포-간엽세포 이행