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항체의 상보성 결정부위(complementarity Determining Regions, CDRs) 서열을 개별적으로 설계하는 단계; 및 상기 설계한 서열을 가지는 상보성 결정부위들을 포함하는 항체를 합성하여 라이브러리를 제조하는 단계를 포함하는, 항체 라이브러리를 제작하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 항체 라이브러리를 구성하는 항체의 상보성 결정부위를 이루는 중쇄 상보성 결정부위 1(CDR-H1), 중쇄 상보성 결정부위 2(CDR-H2), 중쇄 상보성 결정부위 3(CDR-H3), 경쇄 상보성 결정부위 1(CDR-L1), 경쇄 상보성 결정부위 2(CDR-L2) 및 경쇄 상보성 결정부위 3(CDR-L3)은 다양성(polymorphism)을 가지는 것인, 항체 라이브러리를 제작하는 방법
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제1항에 있어서, 상보성 결정부위 서열의 개별적인 설계시, CDR-H1, CDR-H2, CDR-L1 또는 CDR-L2에 대하여 실제 인간유래 숙성 항체의 상보성 결정부위의 i) 생식계열(germline) 면역글로불린 유전자 사용빈도, ii) 각 아미노산 위치별로 체세포 초돌연변이에 의한 각 20종의 아미노산으로의 변이 빈도, iii) 상보성 결정부위 서열의 길이별 빈도 또는 iv) 이들의 조합을 분석하여 계산된 각 아미노산 위치별 빈도를 반영하여 모사한 서열을 설계하는 것인, 항체 라이브러리를 제작하는 방법
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제1항에 있어서, 상보성 결정부위 서열의 개별적인 설계시, CDR-L3에 대하여 a) 상기 상보성 결정부위의 N 말단으로부터 7개 내지 8개의 아미노산 서열은 실제 인간유래 숙성 항체의 상보성 결정부위의 i) 생식계열(germline) 면역글로불린 유전자 사용빈도, ii) 각 아미노산 위치별로 체세포 초돌연변이에 의한 각 20종의 아미노산으로의 변이 빈도, iii) 상보성 결정부위 CDR-L3 서열의 길이별 빈도 또는 iv) 이들의 조합을 분석하여 계산된 각 아미노산 위치별 빈도를 반영하여 모사한 서열을 설계하고;b) 상기 상보성 결정부위의 C 말단으로부터 2개 내지 3개의 아미노산 서열은 실제 인간유래 숙성 항체의 상보성 결정부위의 각 아미노산 위치별 빈도를 분석하여 계산된 빈도를 반영하여 모사한 서열을 설계하는 것이며;상기 CDR-L3는 9개 내지 11개의 아미노산으로 이루어지고, 상기 빈도 분석은 각 길이별로 나누어 분석하며, 상기 CDR-L3 서열의 설계는 설계하고자 하는 CDR-L3의 길이와 동일한 아미노산 길이를 가지는 인간유래 숙성 항체의 상보성 결정부위 CDR-L3를 분석한 결과를 기반으로 설계하는 것인, 항체 라이브러리를 제작하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 상보성 결정부위 서열 중 경쇄를 설계하는 경우에 해당 경쇄는 카파(kappa) 경쇄 또는 람다(lambda) 경쇄인 것인, 항체 라이브러리를 제작하는 방법
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제1항에 있어서, 상보성 결정부위 서열의 개별적인 설계시, CDR-H3에 대하여 a) 상기 상보성 결정부위의 C 말단으로부터 3개의 아미노산을 제외한 서열들은 실제 인간유래 숙성 항체의 상보성 결정부위의 각 아미노산 위치별 빈도를 반영하여 모사한 서열을 설계하고;b) 상기 상보성 결정부위의 C 말단으로부터 3개의 아미노산 서열은 실제 인간유래 숙성 항체의 상보성 결정부위의 해당 3개 아미노산 서열의 위치별 빈도를 분석하여 계산된 빈도를 반영하여 모사한 서열을 설계하는 것이며;상기 CDR-H3는 9개 내지 20개의 아미노산으로 이루어지고, 상기 빈도 분석은 각 길이별로 나누어 분석하며, 상기 CDR-H3 서열의 설계는 설계하고자 하는 CDR-H3의 길이와 동일한 아미노산 길이를 가지는 인간유래 숙성 항체의 상보성 결정부위 CDR-H3를 분석한 결과를 기반으로 설계하는 것인, 항체 라이브러리를 제작하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 상보성 결정부위 아미노산 서열을 설계한 후 설계된 서열에서 N-당화, 이성질체화, 탈아미드화, 절단, 산화가 일어날 수 있는 서열을 배제하는 단계를 추가로 포함하는 것인, 항체 라이브러리를 제작하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 상보성 결정부위 아미노산 서열을 설계한 후 설계한 서열을 폴리뉴클레오티드로 역번역한 후, 번역된 폴리뉴클레오티드 5' 및 3' 말단에 각각 해당하는 인간항체 생식계열(germline) 유전자의 가변영역 골격부위 서열을 연결한 올리고뉴클레오티드 서열을 설계하는 단계를 추가로 포함하는 것인, 항체 라이브러리를 제작하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 항체는 VH3-23 (Genebank accession No
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제1항에 있어서, 상기 항체는 IgA, IgD, IgE, IgM, IgG, Fc 단편, Fab, Fab', F(ab')2 및 Fv로 이루어진 군에서 선택된 것인, 항체 라이브러리를 제작하는 방법
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제3항에 있어서, 하기 1) 내지 6) 중 어느 하나 이상에 해당하는 것인, 항체 라이브러리를 제작하는 방법:1) 상기 중쇄의 CDR-H1에 대한 생식계열 CDR 서열은 서열번호 54 내지 84의 아미노산 서열을 사용; 2) 상기 중쇄의 CDR-H2에 대한 생식계열 CDR 서열은 서열번호 85 내지 121의 아미노산 서열을 사용;3) 상기 경쇄 CDR 설계에 사용하는 생식계열 CDR 서열로 카파 경쇄를 사용하고, 카파 경쇄의 CDR-L1에 대한 생식계열 CDR 서열은 서열번호 122 내지 145의 아미노산 서열을 사용;4) 상기 경쇄 CDR 설계에 사용하는 생식계열 CDR 서열로 카파 경쇄를 사용하고, 카파 경쇄의 CDR-L2에 대한 생식계열 CDR 서열은 서열번호 146 내지 165의 아미노산 서열을 사용;5) 상기 경쇄 CDR 설계에 사용하는 생식계열 CDR 서열로 람다 경쇄를 사용하고, 람다 경쇄의 CDR-L1에 대한 생식계열 CDR 서열로써 서열번호 166 내지 189의 아미노산 서열을 사용; 및6) 상기 경쇄 CDR 설계에 사용하는 생식계열 CDR 서열로 람다 경쇄를 사용하고, 람다 경쇄의 CDR-L2에 대한 생식계열 CDR 서열은 서열번호 190 내지 209의 아미노산 서열을 사용
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제4항에 있어서, 하기 1) 내지 2) 중 어느 하나 이상에 해당하는 것인, 항체 라이브러리를 제작하는 방법:1) 경쇄 CDR 설계에 사용하는 생식계열 CDR 서열로 카파 경쇄를 사용하고, 카파 경쇄의 CDR-L3에 대한 생식계열 CDR 서열은 서열번호 210 내지 236의 아미노산 서열을 사용; 및2) 경쇄 CDR 설계에 사용하는 생식계열 CDR 서열로 람다 경쇄를 사용하고, 람다 경쇄의 CDR-L3에 대한 생식계열 CDR 서열은 서열번호 237 내지 252의 아미노산 서열을 사용
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제11항에 있어서, 상기 각 생식계열 CDR 서열의 사용빈도는 항체서열 데이터베이스의 분석을 통해 알아낸 자연인간항체에서의 각 생식계열 CDR 서열의 사용빈도를 모사한 것인, 항체 라이브러리를 제작하는 방법
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제12항에 있어서, 상기 각 생식계열 CDR 서열의 사용빈도는 항체서열 데이터베이스의 분석을 통해 알아낸 자연인간항체에서의 각 생식계열 CDR 서열의 사용빈도를 모사한 것인, 항체 라이브러리를 제작하는 방법
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제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 따른 방법에 의해 제조된 항체 라이브러리
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