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혈액시료 내 독성물질의 대사체를 동시 정제할 수 있는 시료정제장치 및 이를 이용한 단백질 대사체 동시 분석방법(Methods for simultaneous assay using the purification apparatus of metabolite in toxicity blood sample)

  • 기술번호 : KST2016015767
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 혈액의 혈장 내에서 독성물질 노출에 의한 서로 다른 두 종류의 단백질 대사체를 분리 정제할 수 있는 시료정제장치를 이용한 분석방법에 관한 것으로 본 발명에 의한 시료정제장치는 부티릴콜린에스테라아제(Butyrylcholinesterase) 대사체를 흡착할 수 있는 부티릴콜린에스테라아제 흡착 컬럼 및 알부민(Albumine) 대사체를 흡착할 수 있는 알부민 흡착 컬럼을 연결되어 구성되며, 흡착 컬럼(affinity column)을 이용한 고체상 추출법으로 흡착 컬럼에 독성물질 노출로 인한 혈장(plasma)으로부터 단백질 대사체를 흡착하는 흡착 단계, 단백질 대사체가 흡착된 흡착 컬럼으로부터 상기 단백질 대사체를 탈착하여 추출하는 추출 단계, 단백질 대사체를 분해효소로 분해하여 바이오 마커를 형성하는 분해 단계 및 상기 바이오 마커를 액체크로마토그래피-질량분석기(Liquid Chromatography tandem Mass Spectrometry, LC-MS/MS)를 이용하여 분석하는 분석 단계를 포함하여 적은양의 시료를 가지고 혈장 내에 존재하는 서로 다른 단백질 대사체를 동시에 분석할 수 있어 분석 시간과 비용의 절감 및 정확도가 향상되는 효과가 있다.
Int. CL G01N 33/68 (2006.01) G01N 30/06 (2006.01) B01J 20/00 (2006.01) G01N 30/72 (2006.01)
CPC G01N 30/06(2013.01) G01N 30/06(2013.01) G01N 30/06(2013.01) G01N 30/06(2013.01)
출원번호/일자 1020150024027 (2015.02.17)
출원인 국방과학연구소
등록번호/일자 10-1691056-0000 (2016.12.23)
공개번호/일자 10-2016-0101450 (2016.08.25) 문서열기
공고번호/일자 (20161229) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2015.02.17)
심사청구항수 4

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 국방과학연구소 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 이진영 대한민국 대전광역시 유성구
2 이용한 대한민국 대전광역시 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 한양특허법인 대한민국 서울특별시 강남구 논현로**길 **, 한양빌딩 (도곡동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 국방과학연구소 대전광역시 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2015.02.17 수리 (Accepted) 1-1-2015-0167224-57
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2015.09.11 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2015.11.10 수리 (Accepted) 9-1-2015-0070294-44
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2016.06.28 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0466005-26
5 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2016.08.24 수리 (Accepted) 1-1-2016-0823740-49
6 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2016.08.24 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2016-0823741-95
7 등록결정서
Decision to grant		 2016.12.21 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0920968-96
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번호 청구항
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독성물질에 노출된 혈장에 유기용매인 디클로로메탄(dichloromethane)을 가하여 혈장(plasma)을 추출하는 전처리 단계;흡착 컬럼(affinity column)을 이용한 고체상 추출법으로 부티릴콜린에스테라아제(Butyrylcholineasterase) 대사체를 흡착할 수 있는 부티릴콜린에스테라아제 흡착 컬럼 및 알부민(Albumine) 대사체를 흡착할 수 있는 알부민 흡착 컬럼이 서로 연결되어 구성된 흡착 컬럼을 포함하는 시료정제장치에 상기 전처리 단계를 거친 혈장(plasma)을 주입하여, 독성물질 노출로 인한 혈장(plasma)으로부터 서로 다른 단백질 대사체를 동시에 흡착하는 흡착 단계;인산 완충용액을 상기 단백질 대사체가 흡착된 흡착 컬럼에 가하여 상기 단백질 대사체를 탈착하여 추출하는 추출 단계;단백질 대사체를 분해효소로 분해하여 바이오 마커를 형성하는 분해 단계; 및상기 바이오 마커를 액체크로마토그래피-질량분석기(Liquid Chromatography tandem Mass Spectrometry, LC-MS/MS)를 이용하여 분석하는 분석 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 단백질 대사체 동시 분석방법
4 4
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제 3 항에 있어서, 상기 분해효소는 펩신(Pepsine), 프로나제(Pronase ), 트립신(Trypsin) 및 서몰리신(Thermolysin) 중에서 선택되는 어느 하나 이상을 사용하는 것을 특징으로 하는 단백질 대사체 동시 분석방법
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제 3 항에 있어서, 상기 분해 단계는 상기 단백질 대사체와 상기 분해효소를 함께 항온 교반장치(incubating shaker)에서 37 oC 온도로 교반하여 상기 단백질 대사체를 분해하는 것을 특징으로 하는 단백질 대사체 동시 분석방법
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제 3 항에 있어서, 상기 독성물질은 Chlorpyrifos(O,O-diethyl O-3,5,6-trichloropyridin-2-yl phosphorothioate), EPN(O-Ethyl O-(4-nitrophenyl) phenylphosphonothioate), Methidathion(3-(dimethoxyphosphinothioylsulfanylmethyl)-5-methoxy-1,3,4-thiadiazol-2-one), Phosphamidon((E/Z)-[3-Chloro-4-(diethylamino)-4-oxobut-2-en-2-yl] Dimethyl phosphate), Malathion(Diethyl 2-[(dimethoxyphosphorothioyl)sulfanyl]butanedioate), Parathion(O,O-Diethyl O-(4-nitrophenyl) phosphorothioate), Diazinon(O,O-Diethyl O-[4-methyl-6-(propan-2-yl)pyrimidin-2-yl] phosphorothioate)으로 이루어진 유기인계 독성물질군; 및Parathion(Diethyl O-(4-nitrophenyl)phosphorothioate), Paraoxone(Diethyl-4-nitrophenylphosphate), Paraoxon(Diethyl 4-nitrophenylphosphate), Malathion(O,O-Dimethyl S-(1,2-dicarbethoxyethyl)phosphorodithioate), DIFP(Diisopropyl fluorophosphate), VX(O-Ethyl S-2-diisopropylaminoethyl methyl phosphonothiolate)으로 이루어진 신경작용제군 중에서 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 단백질 대사체 동시 분석방법
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
국가 R&D 정보가 없습니다.