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(a) 원자힘현미경(Atomic force microscope, AFM) 캔틸레버 표면에 순환종양세포(Circulating Tumor Cell, CTC) 특이 단백질인 Her2 단백질에 대한 특이 항체를 고정화시키는 단계;(b) 순환종양세포 특이 단백질을 반응시키는 단계; 및 (c) 원자힘현미경을 이용하여 공진 주파수의 변화를 측정하는 단계를 포함하는 AFM 캔틸레버를 이용하여 5 nM 농도 이하의 순환종양세포 특이 단백질을 검지하는 방법
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제1항에 있어서,AFM 캔틸레버 표면에 특이 항체를 고정화시키는 단계 이전에 상기 캔틸레버 표면을 기능화 시키는 단계를 추가로 포함하는, AFM 캔틸레버를 이용하여 순환종양세포 특이 단백질을 검지하는 방법
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제2항에 있어서,상기 AFM 캔틸레버 표면을 기능화 시키는 단계는, 상기 캔틸레버 표면을 아민화하거나 금 박막으로 코팅하는 단계; 및 자기조립단분자층(self assembled monolayer, SAM)을 형성하는 단계로 이루어지는 것을 특징으로 하는, AFM 캔틸레버를 이용하여 순환종양세포 특이 단백질을 검지하는 방법
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제3항에 있어서,상기 자기조립단분자층은 캘릭스크라운(Calixcrown), 11-머캅토언데카노산(11-mercaptoundecanoic acid) 및 티옥트산(thioctic acid)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, AFM 캔틸레버를 이용하여 순환종양세포 특이 단백질을 검지하는 방법
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제1항에 있어서,단계(b)에서, 순환종양세포 특이 단백질이 0
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제1항에 있어서,단계(c)에서, 원자힘현미경을 이용한 공진 주파수 변화 측정은 공기 중 또는 액상에서 측정 시 순환종양세포 특이 단백질이 검지되는 것을 특징으로 하는, AFM 캔틸레버를 이용하여 순환종양세포 특이 단백질을 검지하는 방법
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제1항에 있어서,순환종양세포 특이 단백질이 과발현 되는 양성형(positive type) 및 소량 발현되는 음성형(negative type) 세포주 모두에서 순환종양세포 특이 단백질이 검지되는 것을 특징으로 하는, AFM 캔틸레버를 이용하여 순환종양세포 특이 단백질을 검지하는 방법
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제1항에 있어서,상기 공진 주파수의 변화 정도는 항체와 순환종양세포 특이 단백질 간 결합 유무로 인한 AFM 캔틸레버의 질량 변화량과 비례하고, 공진 주파수의 변화량은 순환종양세포 특이 단백질 발현량에 비례하는 것을 특징으로 하는, AFM 캔틸레버를 이용하여 순환종양세포 특이 단백질을 검지하는 방법
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제10항에 있어서,상기 공진 주파수의 변화량은 순환종양세포 특이 단백질에 대한 특이 항체 고정화되기 전의 캔틸레버 자체의 공진주파수를 기준 공진주파수로 하여 이로부터 실시간으로 측정한 공진주파수의 차이로 측정되는 것을 특징으로 하는, AFM 캔틸레버를 이용하여 순환종양세포 특이 단백질을 검지하는 방법
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제1항에 있어서,제10항 또는 제11항의 방법에 의하여 측정된 공진 주파수의 변화량을 통해 순환종양세포 특이 단백질 발현량을 정량적으로 분석하는 단계;동일한 순환종양세포 특이 단백질에 대하여 세포주 별 발현량을 비교하는 단계를 거쳐,순환종양세포 특이 단백질이 과발현되는 양성형(positive type) 또는 소량 발현되는 음성형(negative type) 세포주로 분류하는 것을 특징으로 하는, AFM 캔틸레버를 이용하여 순환종양세포 특이 단백질을 검지하는 방법
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제1항에 따른 방법으로 순환종양세포 특이 단백질인 Her2 단백질을 검출함으로써, 순환종양세포를 포함하는 암 진단에 필요한 정보를 제공하는 방법
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제13항에 있어서,상기 암은 유방암, 자궁경부암, 자궁내막체암, 난소암, 위암, 식도암, 간암, 췌장암, 폐암, 대장암, 직장암, 결장암, 전립선암, 고환암, 방광암, 신장암, 골암, 결합조직암, 피부암, 뇌암, 갑상선암, 백혈병, 호지킨 질환, 림프종 및 다발성 골수종혈액암으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 암 진단에 필요한 정보를 제공하는 방법
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AFM 캔틸레버 센서를 기반으로 하는 단백질 검출 시스템으로서,AFM 캔틸레버; 상기 AFM 캔틸레버 표면에 고정된 검지대상이 되는 순환종양세포 특이 단백질인 Her2 단백질 특이 항체층; 및상기 특이 항체층 위에 형성된 5 nM 농도 이하의 검출 대상 순환종양세포 특이 단백질층을 포함하고, 상기 특이 항체층과 순환종양세포 특이 단백질의 결합 반응에 따른 캔틸레버의 공진 주파수 변화를 실시간으로 측정함으로써 순환종양세포를 포함하는 암 진단을 위한 정보를 제공하는, AFM 캔틸레버 센서 기반 생체 물질 검출 시스템
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제16항에 있어서,상기 순환종양세포 특이 단백질 특이 항체층은 AFM 캔틸레버 표면의 기능화에 의해 캔틸레버 표면에 결합되는 것을 특징으로 하는, AFM 캔틸레버 센서 기반 생체 물질 검출 시스템
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제17항에 있어서,상기 AFM 캔틸레버 표면의 기능화는 캔틸레버 표면을 아민화하거나 금 박막으로 코팅하는 단계; 및 자기조립단분자층(self assembled monolayer, SAM)을 형성하는 단계로 이루어지는 것을 특징으로 하는, AFM 캔틸레버 센서 기반 생체 물질 검출 시스템
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제18항에 있어서,자기조립단분자층은 캘릭스크라운(calixcrown), 11-머캅토언데카노산(11-mercaptoundecanoic acid) 및 티옥트산(thioctic acid)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, AFM 캔틸레버 센서 기반 생체 물질 검출 시스템
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