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탈세포화된 간 조직 유래의 생체적합성(Biocompatible) 가용화 스캐폴드 추출물(SSE, Solubilized Scaffold Extract)을 유효성분으로 포함하는 배아줄기세포의 내배엽 세포로의 분화 유도용 배지 조성물로서, 상기 생체적합성 가용화 스캐폴드 추출물은 하기와 같은 단계에 의해 제조되는 것을 특징으로 하는 조성물:(a) 간 조직을 탈세포화(decellularization)하는 단계;(b) 상기 탈세포화된 간 조직으로부터 세포외 기질(ECM, Extracellular Matrix)을 수득하는 단계;(c) 상기 (b) 단계의 ECM을 동결건조 후 분쇄하여 분말을 형성하는 단계;(d) 상기 (c) 단계의 분말에 산용액을 첨가하여 산추출한 산가용성 추출물을 수득하는 단계;(e) 상기 (d) 단계의 산가용성 추출물에 펩신을 첨가하여 분해한 펩신 가용화 추출물을 수득하는 단계;(f) 상기 (e) 단계의 펩신 가용화 추출물을 중화하여 가용성 추출물(SEx, solubilized extract)을 수득하는 단계;(e) 상기 (f) 단계의 SEx를 원심분리하여 원심분리된 추출물(CEx, centrifuged extract)을 수득하는 단계; 및 (f) 상기 (e) 단계의 CEx를 여과하여 여과된 추출물(FEx, filtered extract)인 생체적합성 가용화 스캐폴드 추출물(SSE, solubilized scaffold extract)을 수득하는 단계
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제 1 항에 있어서, 상기 (a) 단계의 간 조직은 포유류로부터 분리된 조직인 것을 특징으로 하는 조성물
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제 1 항에 있어서, 상기 (a) 단계의 탈세포화는 용해 용액(lysis solution), 저장성 용액(hypotonic solution), 계면활성제, RNase A 및 DNase I으로 이루어진 군으로부터 선택된 1 종 이상을 이용하는 것을 특징으로 하는 조성물
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제 5 항에 있어서, 상기 계면활성제는 SDS (sodium dodecyl sulfate), Triton-X, DNase 및 CHAPS (3-(3-cholamidopropyl)dimethylammonio)-1-propane sulfonate)로 이루어진 군 중에서 선택된 1 종 이상인 것을 특징으로 하는 조성물
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제 1 항에 있어서, 상기 (d) 단계의 산용액은 염산, 황산 및 인산으로 이루어진 군 중에서 선택된 1 종 이상인 것을 특징으로 하는 조성물
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제 1 항에 있어서, 상기 가용화 스캐폴드 추출물의 농도는 0
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다음 단계를 포함하는 배아줄기세포의 내배엽 세포로의 분화 유도 방법:(a) 탈세포화된 간 조직 유래의 생체적합성 가용화 스캐폴드 추출물(Solubilized Scaffold Extract, SSE)로 배양 용기를 코팅하는 단계; 및(b) 상기 (a) 단계의 SSE로 코팅된 배양 용기에서 제1항, 제3항, 제5항, 제6항, 제7항 및 제9항 중 어느 한 항의 배지 조성물과 배아줄기세포를 접촉시켜 내배엽 세포로 분화시키는 단계
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제 10 항에 있어서, 상기 방법은 (b) 단계에서 추가적으로 분화유도물질을 첨가하는 것을 특징으로 하는 방법
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제 10 항에 있어서, 상기 (a) 단계의 가용화 스캐폴드 추출물의 농도는 0
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제 10 항에 있어서, 상기 (b) 단계의 배지 조성물 내 가용화 스캐폴드 추출물의 농도는 0
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