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(a) 단백질을 포함하는 체액; 또는 단백질과 혼합되어 오염된 세포 밖 소포체;를 포함하는 수용액에 제1물질과 제2물질을 혼합하는 단계;(b) 상기 혼합물을 상층액과 하층액으로 상분리시켜 수용액 이상계를 제조하는 단계;(c) 상기 수용액 이상계 중, 제1물질이 포함된 상층액을 제거하는 단계;(d) 잔류하는 하층액에 제1물질을 포함하는 새로운 상층액을 공급하여 혼합하는 단계; 및(e) 상기 (b) 내지 (d)단계를 적어도 두번 이상 수행한 후, 상기 하층액으로부터 세포 밖 소포체를 회수하는 단계;를 포함하고, 상기 체액은 전혈(whole blood), 혈청, 복강액, 모유 및 소변으로 이루어진 군 중에서 선택되는 적어도 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는, 수용액 이상계를 이용한 세포 밖 소포체의 다단계 정제방법
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제1항에 있어서,상기 제1물질은 물, 폴리에틸렌 글리콜, 폴리비닐피로리돈, 폴리비닐 알코올 또는 피콜 중에서 선택되는 것이며, 상기 제2물질은 EOPO(ethylene oxide propylene oxide), 덱스트란, 레반, Poly(vinyl methyl ethyl ether), 황산암모늄, 황산나트륨, 황산마그네슘, 인산칼륨 또는 탄산나트륨 중에서 선택되는 것을 특징으로 하는, 수용액 이상계를 이용한 세포 밖 소포체의 다단계 정제방법
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제2항에 있어서,상기 제1물질은 물이고, 상기 제2물질은 EOPO인 것을 특징으로 하는, 수용액 이상계를 이용한 세포 밖 소포체의 다단계 정제방법
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제2항에 있어서,상기 제1물질은 폴리에틸렌 글라이콜이고, 상기 제2물질은 덱스트란, 레반, Poly(vinyl methyl ethyl ether), 황산암모늄, 황산나트륨, 황산마그네슘, 인산칼륨, 탄산나트륨 중에서 선택되는 것을 특징으로 하는, 수용액 이상계를 이용한 세포 밖 소포체의 다단계 정제방법
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제2항에 있어서,상기 제1물질은 폴리에틸렌 글라이콜, 폴리비닐피로리돈, 폴리비닐 알코올 또는 피콜 중에서 선택되는 것이고, 상기 제2물질은 덱스트란인 것을 특징으로 하는, 수용액 이상계를 이용한 세포 밖 소포체의 다단계 정제방법
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제2항에 있어서,상기 제1물질은 폴리에틸렌 글리콜(polyethylene glycol)이며, 상기 제2물질은 덱스트란(dextran)인 것을 특징으로 하는, 수용액 이상계를 이용한 세포 밖 소포체의 다단계 정제방법
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제1항에 있어서,상기 (a)단계 이후 및 (b)단계 이전에, 상기 수용액 이상계에 첨가제를 추가하여 수용액 이상계 내 분자들 사이의 인력 또는 반발력을 조절하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 수용액 이상계를 이용한 세포 밖 소포체의 다단계 정제방법
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제1항에 있어서,상기 (b)단계의 상 분리는 500 ~ 2,000 × g-force의 원심분리법으로 수행되는 것을 특징으로 하는, 수용액 이상계를 이용한 세포 밖 소포체의 다단계 정제방법
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제1항에 있어서, 상기 (b)단계에서,상기 수용액 이상계에 초음파 조사 혹은 미세 기포를 주입하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 수용액 이상계를 이용한 세포 밖 소포체의 다단계 정제방법
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제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 기재된 방법을 통해 분리 및 정제된 세포 밖 소포체로 ELISA, RT-PCR, western blot, proteomics 또는 genomics으로 assay를 수행하는 방법
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