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마우스 렙틴 수용체 돌연변이 유전자형 판별방법(Genotyping method for the mouse leptin receptor mutation)

  • 기술번호 : KST2016017476
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 동형접합체 불임을 나타내는 마우스 모델을 유지하는데 있어서 빠르고 효과적인 유전자형 확인이 매우 중요하다. 동형접합체 불임을 나타내는 렙틴 수용체 돌연변이 (C57BL/KsJ-db/db) 마우스는 비인슐린 의존적 당뇨병 동물모델로 일반적으로 이용되고 있다. 본 발명자들은 C57BL/KsJ-db/db 마우스의 빠르고 효과적인 유전자형 확인을 위해 테트라-프라이머 ARMS-PCR 방법을 이용하였다. 정상 (+/+) 마우스로부터 407bp 및 199bp PCR 산물이 증폭되었고; 반면, 동형접합체 (db/db) 마우스에서는 407bp 및 268bp PCR 산물이 증폭되었으며; 이형접합체 (db/+) 마우스에서는 497bp, 268bp 및 199bp PCR 산물이 증폭되었다. 뿐만 아니라, 테트라-프라이머 ARMS-PCR 분석법은 C57BL/6J 유전자 배경을 갖는 다른 마우스에서도 효과적이었다. 테트라-프라이머 ARMS-PCR 분석법은 1) C57BL/KsJ-db/db를 계통 유지하는데 유용하며, 2) 효율적으로 실험에 사용이 가능한 동형접합체(db/db)를 대량 생산에 유용하며, 3) 렙틴 수용체 돌연변이를 포함하는 이중 녹아웃 마우스를 고속 대량생산하는데 유용하다.
Int. CL C12Q 1/68 (2006.01)
CPC C12Q 1/6883(2013.01) C12Q 1/6883(2013.01) C12Q 1/6883(2013.01) C12Q 1/6883(2013.01)
출원번호/일자 1020150042431 (2015.03.26)
출원인 한림대학교 산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2016-0115212 (2016.10.06) 문서열기
공고번호/일자 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2015.03.26)
심사청구항수 3

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한림대학교 산학협력단 대한민국 강원도 춘천시 한림

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 서준교 대한민국 강원도 춘천시 충열로 **,
2 정혜리 대한민국 강원도 춘천시
3 남하진 대한민국 강원도 춘천시 보안길 *

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 강성혜 대한민국 대전 유성구 지족로***번길 **, ***-*호 (지족동, 성훈프라자)(아이앤아이특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한림대학교 산학협력단 강원도 춘천시 한림
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2015.03.26 수리 (Accepted) 1-1-2015-0297437-35
2 보정요구서
Request for Amendment
2016.09.28 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0698744-78
3 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2016.10.21 1-1-2016-1024340-49
4 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2016.10.28 보정승인 (Acceptance of amendment) 1-1-2016-1052362-44
5 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2016.12.27 수리 (Accepted) 4-1-2016-5194076-39
6 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2017.03.22 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2017-0208944-23
7 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2017.03.23 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2017-0287970-49
8 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2017.03.23 수리 (Accepted) 1-1-2017-0287969-03
9 심사처리보류(연기)보고서
Report of Deferment (Postponement) of Processing of Examination
2017.05.29 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-6-2017-0077912-12
10 등록결정서
Decision to grant
2017.06.26 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2017-0442394-44
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2018.03.06 수리 (Accepted) 4-1-2018-5038639-99
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
(가) 시험대상 마우스 유전체 DNA에 대하여Lepr-FO(Leptin receptor-forward outer primer); AGGGTTAGAGATCTTTCATCTTTAGCT, Lepr-FI(Leptin receptor-forward inner primer); TTAGAACATGTTTACATTTTGATGGAGGG, Lepr-RI(Leptin receptor-reverse inner primer); ATTTGTTTGGATTTGATACCAAACTTACTG 및Lepr-RO(Leptin receptor-reverse outer primer); AAATTTCAACTATAACTACCTGAGACGTA를 프라이머로 하여 테트라-프라이머 ARMS-PCR(amplification-refractory mutation system- polymerase chain reaction)을 수행하는 단계;(나) 얻어진 PCR 산물을 전기영동하는 단계; 및(다) 전기영동 결과 전개된 PCR 산물이 407bp 및 199bp인 경우 정상 (C57BL/KsJ-+/+) 마우스; 407bp 및 268bp인 경우 동형접합체 (C57BL/KsJ-db/db) 마우스; 497bp, 268bp 및 199bp인 경우 이형접합체 (C57BL/KsJ-db/+) 마우스로 결정하는 단계;를 포함하는 마우스 렙틴 수용체 돌연변이 유전자형 판별방법
2 2
청구항 1에 있어서,마우스 유전체 DNA는 SDS와 프로티네이즈 K를 이용한 용균방법 및 페놀과 클로로포름을 이용한 추출방법으로 용균 및 추출함을 특징으로 하는 마우스 렙틴 수용체 돌연변이 유전자형 판별방법
3 3
(가) DNA 중합효소; (나) dNTPs; (다) PCR용 완충용액; 및(라)Lepr-FO(Leptin receptor-forward outer primer); AGGGTTAGAGATCTTTCATCTTTAGCT, Lepr-FI(Leptin receptor-forward inner primer); TTAGAACATGTTTACATTTTGATGGAGGG, Lepr-RI(Leptin receptor-reverse inner primer); ATTTGTTTGGATTTGATACCAAACTTACTG 및Lepr-RO(Leptin receptor-reverse outer primer); AAATTTCAACTATAACTACCTGAGACGTA로 이루어진 프라이머 셋트;를 포함하는 마우스 렙틴 수용체 돌연변이 유전자형 판별용 PCR 킷트
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 교육과학기술부 한림대학교 산학협력단 일반연구자지원사업 제2형 당뇨병 모델동물에서 피브로인의 항 당뇨 기전에 관한 연구