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수용액 이상계를 이용한 세포 밖 소포체의 분리방법(Isolation Method of Extracellular Vesicles by Aqueous Two-phase System)

  • 기술번호 : KST2016017754
  • 담당센터 : 대구기술혁신센터
  • 전화번호 : 053-550-1450
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 수용액 이상계를 이용하여 세포 밖 소포체를 분리하는 방법에 관한 것으로, (a) 체액 또는 세포 밖 소포체가 있는 수용액에 서로 혼화되지 않는 제1물질과 제2물질을 혼합하여 수용액 이상계를 제조하는 단계; (b) 상기 수용액 이상계 중, 제2물질에 농축된 세포 밖 소포체를 분리하는 단계;를 포함한다. 상기 수용액 이상계를 이용한 세포 밖 소포체 분리방법은 종래의 기술에 비하여, 매우 높은 효율을 가지며 분리 방식이 간단하고 소요 시간이 매우 짧은 장점을 갖는다. 더욱 상세하게는, 수용액 이상계을 이용한 세포 밖 소포체의 분리는 초원심분리기가 필요 없으며, 약 10 ~ 20분이라는 짧은 시간 안에 세포 밖 소포체의 분리가 거의 100% 효율로 이루어진다. 따라서 본 발명은 세포 밖 소포체를 이용한 진단 개발에 긍정적인 영향을 줄 것으로 예상되며, 종래의 다른 분리 방법과는 달리 실용적이며 비용이 적게 들어 경제적이므로 경쟁력이 매우 높은 방법이다. 또한, 단백질에 의해 오염된 세포 밖 소포체의 순도를 높일 수 있으며, 분리된 세포 밖 소포체로 질병을 진단할 수 있을 뿐 아니라 세포 밖 소포체를 이용한 모든 분야에 응용될 수 있는 장점이 있다.
Int. CL C12Q 1/68 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01) C12M 1/26 (2006.01) C12Q 1/24 (2006.01) G01N 33/53 (2006.01)
CPC C12Q 1/24(2013.01) C12Q 1/24(2013.01) C12Q 1/24(2013.01) C12Q 1/24(2013.01) C12Q 1/24(2013.01)
출원번호/일자 1020150045070 (2015.03.31)
출원인 포항공과대학교 산학협력단, 더 리젠츠 오브 더 유니버시티 오브 미시간
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2016-0116802 (2016.10.10) 문서열기
공고번호/일자 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2015.03.31)
심사청구항수 15

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 포항공과대학교 산학협력단 대한민국 경상북도 포항시 남구
2 더 리젠츠 오브 더 유니버시티 오브 미시간 미국 미국 ***** 미시간주 앤 아버 세컨드 플로어 휴론 파크웨이 **** 오피스 오브 테크놀로지 트

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 박재성 대한민국 경상북도 포항시 남구
2 라버즈 요셉 엠 미국 미국 ***** 미시간주
3 타카야마 슈이치 미국 미국 ***** 미시간주
4 신현우 대한민국 부산광역시 사하구
5 한충민 대한민국 경상북도 포항시 남구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 윤병국 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로 ***길, **, *층 (대치동, 삼호빌딩)(지성국제특허법률사무소)
2 이영규 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로 ***길, **, *층 (대치동, 삼호빌딩)(지성국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 포항공과대학교 산학협력단 대한민국 경상북도 포항시 남구
2 더 리젠츠 오브 더 유니버시티 오브 미시간 미국 미국 ***** 미시간주 앤 아버 세컨드 플로어 휴론 파크웨이 **** 오피스 오브 테크놀로지 트
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2015.03.31 수리 (Accepted) 1-1-2015-0314671-57
2 보정요구서
Request for Amendment
2015.04.08 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2015-0066709-91
3 [출원서등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment
2015.04.10 수리 (Accepted) 1-1-2015-0350703-64
4 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2015.12.04 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
5 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2016.01.08 수리 (Accepted) 9-1-2016-0001699-60
6 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2016.09.26 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0686747-89
7 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2016.11.28 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2016-1162387-87
8 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2016.11.28 수리 (Accepted) 1-1-2016-1162427-15
9 [대리인선임]대리인(대표자)에 관한 신고서
[Appointment of Agent] Report on Agent (Representative)
2017.01.17 수리 (Accepted) 1-1-2017-0054094-60
10 등록결정서
Decision to grant
2017.05.25 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2017-0365838-85
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.11.20 수리 (Accepted) 4-1-2019-5243581-27
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.11.22 수리 (Accepted) 4-1-2019-5245997-53
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.11.25 수리 (Accepted) 4-1-2019-5247115-68
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
(a) 단백질을 포함하는 체액; 또는 단백질과 혼합되어 오염된 세포 밖 소포체;를 포함하는 수용액에 제1물질과 제2물질을 혼합하여 수용액 이상계를 제조하는 단계;(b) 상기 수용액 이상계 중, 제1물질과 제2물질 사이의 경계면 또는 상기 제2물질에 농축된 세포 밖 소포체를 분리하는 단계;를 포함하는 수용액 이상계를 이용하여 세포 밖 소포체를 분리하는 방법
2 2
제1항에 있어서,상기 제1물질은 폴리에틸렌 글리콜, 폴리비닐피로리돈, 폴리비닐 알코올 또는 피콜 중에서 선택되는 것이며, 상기 제2물질은 EOPO(ethylene oxide propylene oxide), 덱스트란, 레반, Poly(vinyl methyl ethyl ether), 황산암모늄, 황산나트륨, 황산마그네슘, 인산칼륨 또는 탄산나트륨 중에서 선택되는 것을 특징으로 하는 수용액 이상계를 이용하여 세포 밖 소포체를 분리하는 방법
3 3
제2항에 있어서,상기 제1물질은 물이고, 상기 제2물질은 EOPO인 것을 특징으로 하는 수용액 이상계를 이용하여 세포 밖 소포체를 분리하는 방법
4 4
제2항에 있어서,상기 제1물질은 폴리에틸렌 글리콜이고, 상기 제2물질은 덱스트란, 레반, Poly(vinyl methyl ethyl ether), 황산암모늄, 황산나트륨, 황산마그네슘, 인산칼륨, 탄산나트륨 중에서 선택되는 것을 특징으로 하는 수용액 이상계를 이용하여 세포 밖 소포체를 분리하는 방법
5 5
제2항에 있어서, 상기 제1물질은 폴리에틸렌 글리콜, 폴리비닐피로리돈, 폴리비닐 알코올 또는 피콜 중에서 선택되는 것이고, 상기 제2물질은 덱스트란인 것을 특징으로 하는 수용액 이상계를 이용하여 세포 밖 소포체를 분리하는 방법
6 6
제2항에 있어서,상기 제1물질은 폴리에틸렌 글리콜(polyethylene glycol)이며, 제2물질은 덱스트란(dextran)인 것을 특징으로 하는 수용액 이상계를 이용하여 세포 밖 소포체를 분리하는 방법
7 7
제6항에 있어서,상기 폴리에틸렌 글리콜의 중량평균 분자량은 200 ~ 600,000인 것을 특징으로 하는, 수용액 이상계를 이용하여 세포 밖 소포체를 분리하는 방법
8 8
제6항에 있어서,상기 폴리에틸렌 글리콜의 농도는 1 ~ 20 wt% 인 것을 특징으로 하는, 수용액 이상계를 이용하여 세포 밖 소포체를 분리하는 방법
9 9
제6항에 있어서,상기 덱스트란의 중량평균 분자량은 15000 ~ 2,000,000인 것을 특징으로 하는, 수용액 이상계를 이용하여 세포 밖 소포체를 분리하는 방법
10 10
제6항에 있어서,상기 덱스트란의 농도는 1 ~ 20 wt%인 것을 특징으로 하는 수용액 이상계를 이용하여 세포 밖 소포체를 분리하는 방법
11 11
제1항에 있어서,상기 (a)단계 이후, 상기 수용액 이상계에 첨가물을 추가하여 수용액 이상계 내 분자들 사이의 인력 또는 반발력을 조절하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 수용액 이상계를 이용하여 세포 밖 소포체를 분리하는 방법
12 12
제1항에 있어서,상기 (a)단계 이후, 상기 수용액 이상계를 100 ~ 5,000 × g-force로 전처리하는 단계;를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 수용액 이상계를 이용하여 세포 밖 소포체를 분리하는 방법
13 13
제1항에 있어서,상기 체액은 전혈(whole blood), 혈청, 복강액, 모유 및 소변으로 이루어진 군 중에서 선택되는 적어도 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 수용액 이상계를 이용하여 세포 밖 소포체를 분리하는 방법
14 14
삭제
15 15
제1항에 있어서,상기 세포 밖 소포체는 엑소좀(exosome), 마이크로베지클(microvesicle) 및 마이크로파티클(microparticle)로 이루어진 군 중에서 선택되는 적어도 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는, 수용액 이상계를 이용하여 세포 밖 소포체를 분리하는 방법
16 16
제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 기재된 방법을 사용하여 분리한 소포체로 ELISA, PCR, western blot, protepmics, genomics 혹은 genomics의 어세이(assay) 방법으로 assay를 하는 방법
17 17
삭제
18 18
삭제
19 19
삭제
20 20
삭제
21 21
삭제
지정국 정보가 없습니다
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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 CN107532195 CN 중국 FAMILY
2 EP03279332 EP 유럽특허청(EPO) FAMILY
3 US20180164197 US 미국 FAMILY
4 WO2016159520 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY

DOCDB 패밀리 정보

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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 CN107532195 CN 중국 DOCDBFAMILY
2 EP3279332 EP 유럽특허청(EPO) DOCDBFAMILY
3 EP3279332 EP 유럽특허청(EPO) DOCDBFAMILY
4 US2018164197 US 미국 DOCDBFAMILY
5 WO2016159520 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 미래창조과학부 포항공과대학교 산학협력단 선도연구센터육성사업 국부투사영상과 햅틱기반 수술용 로봇기술 연구
2 미래창조과학부 포항공과대학교 산학협력단 중견연구자지원사업 세포 유래 인공 소포체를 이용한 분화, 역분화 시스템 연구