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레반슈크라제 생산능이 향상된 균주 및 이를 이용한 레반 생산방법(A microorganism having enhanced levansucrase productivity and a method of producing levan using the microorganism)

  • 기술번호 : KST2016020419
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 레반슈크라제 (levansucrase)를 코딩하는 핵산 및 단백질 분비 융합 인자 (Translational fusion partner, TFP)를 코딩하는 핵산을 포함하는 레반슈크라제 분비 발현 카세트, 상기 카세트를 포함하는 벡터, 상기 핵산 또는 벡터를 포함하는 형질전환 미생물, 및 상기 형질전환 미생물을 이용한 레반슈크라제 및 레반의 제조방법에 관한 것이다. 본 발명의 형질전환 미생물은 단백질 분비 융합 인자를 이용하여 재조합 레반슈크라제를 우수한 효율로 분비 발현할 수 있으며, 상기 미생물로부터 생산된 레반슈크라제를 설탕과 반응시키거나, 또는 상기 미생물을 설탕을 포함한 배지에서 발효시켜 레반을 효과적으로 생산할 수 있다.
Int. CL C07K 19/00 (2006.01) C12P 19/04 (2006.01) C12N 15/81 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01)
CPC C12N 15/63(2013.01) C12N 15/63(2013.01) C12N 15/63(2013.01) C12N 15/63(2013.01) C12N 15/63(2013.01) C12N 15/63(2013.01) C12N 15/63(2013.01)
출원번호/일자 1020150078236 (2015.06.02)
출원인 한국생명공학연구원
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2016-0142191 (2016.12.12) 문서열기
공고번호/일자 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2016.04.15)
심사청구항수 21

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 손정훈 대한민국 대전광역시 유성구
2 성봉현 대한민국 대전광역시 유성구
3 배정훈 대한민국 대전광역시 유성구
4 박순호 대한민국 대전광역시 유성구
5 고현준 대한민국 대전광역시 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 손민 대한민국 서울특별시 송파구 법원로 ***, *층(문정동)(특허법인한얼)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대전광역시 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2015.06.02 수리 (Accepted) 1-1-2015-0533592-74
2 [심사청구]심사청구(우선심사신청)서
[Request for Examination] Request for Examination (Request for Preferential Examination)
2016.04.15 수리 (Accepted) 1-1-2016-0361786-24
3 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2017.02.10 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2017.05.12 수리 (Accepted) 9-1-2017-0014501-89
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2017.09.14 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2017-0647045-22
6 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2017.11.14 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2017-1130251-27
7 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2017.11.14 수리 (Accepted) 1-1-2017-1130249-35
8 등록결정서
Decision to grant
2018.01.26 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0064126-04
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
레반슈크라제 (levansucrase)를 코딩하는 핵산 및 단백질 분비 융합 인자 (Translational fusion partner, TFP)를 코딩하는 핵산을 포함하는, 레반슈크라제 분비 발현 카세트로서,상기 단백질 분비 융합인자는,서열번호 15의 TFP 1, 서열번호 16의 TFP 2, 서열번호 17의 TFP 3, 서열번호 18의 TFP 4, 서열번호 19의 TFP 5, 서열번호 20의 TFP 6, 서열번호 21의 TFP 7, 서열번호 22의 TFP 8, 서열번호 23의 TFP 9, 서열번호 24의 TFP 10, 서열번호 25의 TFP 11, 서열번호 26의 TFP 12, 서열번호 27의 TFP 13, 서열번호 28의 TFP 14, 서열번호 29의 TFP 15, 서열번호 30의 TFP 16, 서열번호 31의 TFP 17, 서열번호 32의 TFP 18, 서열번호 33의 TFP 19, 서열번호 34의 TFP 20, 서열번호 35의 TFP 21, 서열번호 36의 TFP 22, 서열번호 37의 TFP 23, 및 서열번호 38의 TFP 24로 이루어진 군에서 선택되는, 분비 발현 카세트
2 2
제1항에 있어서, 상기 레반슈크라제는 라넬라 아쿠아틸리스 (Rhanella aquatilis), 자이모모나스 모빌리스 (Zymomonas mobilis), 또는 바실러스 서브틸리스 (Bacillus subtilis) 유래인 것인, 분비 발현 카세트
3 3
제2항에 있어서, 상기 레반슈크라제는 (i) 서열번호 12의 아미노산 서열을 가지는 라넬라 아쿠아틸리스 유래의 레반슈크라제;(ii) 서열번호 13의 아미노산 서열을 가지는 자이모모나스 모빌리스 유래의 레반슈크라제; 또는(iii) 서열번호 14의 아미노산 서열을 가지는 바실러스 서브틸리스 유래의 레반슈크라제인,분비 발현 카세트
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삭제
5 5
제2항에 있어서,상기 라넬라 아쿠아틸리스 유래의 레반슈크라제는 서열번호 17의 TFP 3, 서열번호 18의 TFP 4, 서열번호 22의 TFP 8 또는 서열번호 30의 TFP 16과 연결된 것인, 분비 발현 카세트
6 6
제2항에 있어서,상기 자이모모나스 모빌리스 유래의 레반슈크라제는 서열번호 17의 TFP 3, 서열번호 20의 TFP 6, 서열번호 22의 TFP 8, 서열번호 23의 TFP 9, 서열번호 25의 TFP 11, 서열번호 30의 TFP 16, 서열번호 33의 TFP 19 또는 서열번호 36의 TFP 22와 연결된 것인, 분비 발현 카세트
7 7
제2항에 있어서,상기 바실러스 서브틸리스 유래의 레반슈크라제는 서열번호 15의 TFP 1, 서열번호 19의 TFP 5, 서열번호 20의 TFP 6, 서열번호 22의 TFP 8, 서열번호 23의 TFP 9, 서열번호 27의 TFP 13, 서열번호 30의 TFP 16 또는 서열번호 33의 TFP 19와 연결된 것인, 분비 발현 카세트
8 8
제1항에 있어서, 상기 레반슈크라제(levansucrase)를 코딩하는 핵산 및 단백질 분비 융합 인자를 코딩하는 핵산은 링커 (linker)로 서로 연결된 것인, 분비 발현 카세트
9 9
제8항에 있어서, 상기 링커는 프로테아제 인식 서열 또는 친화성 태그를 포함하는 것인, 분비 발현 카세트
10 10
제1항에 있어서, 상기 분비 발현 카세트는 친화성 태그를 추가로 포함하는 것인, 분비 발현 카세트
11 11
제10항에 있어서, 상기 친화성 태그는 GST, MBP, NusA, 티오레독신(thioredoxin), 유비퀴틴, FLAG, BAP, HIS, STREP, CBP, CBD, 및 S-태그로 이루어진 그룹에서 선택되는 것인, 분비 발현 카세트
12 12
제1항 내지 제3항 및 제5항 내지 제11항 중 어느 한 항의 레반슈크라제 분비 발현 카세트를 포함하는, 벡터
13 13
레반슈크라제 (levansucrase)를 코딩하는 핵산 및 단백질 분비 융합 인자를 코딩하는 핵산을 포함하는, 레반슈크라제 분비 발현 카세트를 포함하는, 형질전환 미생물로서,상기 단백질 분비 융합인자는,서열번호 15의 TFP 1, 서열번호 16의 TFP 2, 서열번호 17의 TFP 3, 서열번호 18의 TFP 4, 서열번호 19의 TFP 5, 서열번호 20의 TFP 6, 서열번호 21의 TFP 7, 서열번호 22의 TFP 8, 서열번호 23의 TFP 9, 서열번호 24의 TFP 10, 서열번호 25의 TFP 11, 서열번호 26의 TFP 12, 서열번호 27의 TFP 13, 서열번호 28의 TFP 14, 서열번호 29의 TFP 15, 서열번호 30의 TFP 16, 서열번호 31의 TFP 17, 서열번호 32의 TFP 18, 서열번호 33의 TFP 19, 서열번호 34의 TFP 20, 서열번호 35의 TFP 21, 서열번호 36의 TFP 22, 서열번호 37의 TFP 23, 및 서열번호 38의 TFP 24로 이루어진 군에서 선택되는 것인, 미생물
14 14
제13항에 있어서, 상기 형질전환 미생물은 효모인 것인, 미생물
15 15
제14항에 있어서, 상기 효모는 캔디다 (Candida), 디베리오마이세스 (Debaryomyces), 한세눌라 (Hansenula), 클루이베로마이세스 (Kluyveromyces), 피키아 (Pichia), 스키조사카로마이세스 (Schizosaccharomyces), 야로이야 (Yarrowia), 사카로마이시스 (Saccharomyces), 슈완니오마이세스 (Schwanniomyces) 및 아르술라 (Arxula) 속으로 이루어진 그룹에서 선택되는 것인, 미생물
16 16
제14항에 있어서, 상기 효모는 캔디다 유틸리스 (Candida utilis), 캔디다 보이디니 (Candida boidinii), 캔디다 알비칸스 (Candida albicans), 클루이베로마이세스 락티스 (Kluyveromyces lactis), 피키아 파스토리스 (Pichia pastoris), 피키아 스티피티스 (Pichia stipitis), 스키조사카로마이세스 폼베 (Schizosaccharomyces pombe), 사카로마이시스 세레비지에 (Saccharomyces cerevisiae), 한세눌라 폴리모르파 (Hansenula polymorpha), 야로이야 리폴리티카 (Yarrowia lipolytica), 슈완니오마이세스 옥시덴탈리스 (Schwanniomyces occidentalis) 및 아르술라 아데니니보란스 (Arxula adeninivorans)로 이루어진 그룹에서 선택되는 것인, 미생물
17 17
(i) 제13항의 형질전환 미생물을 배양하는 단계; 및(ii) 상기 배양된 미생물 또는 이의 배양 상등액으로부터 레반슈크라제를 회수하는 단계를 포함하는, 레반슈크라제 (levansucrase)의 제조방법
18 18
제13항의 형질전환 미생물 또는 제17항의 방법으로 제조된 레반슈크라제를 설탕과 반응시키는 단계를 포함하는, 레반 (levan)의 제조방법
19 19
제18항에 있어서, 상기 반응은 pH 4
20 20
제18항에 있어서, 상기 반응은 1 ℃ 내지 45 ℃에서 수행되는 것인, 레반의 제조방법
21 21
제18항에 있어서,상기 단계는 형질전환 미생물을 설탕을 포함하는 배지에서 발효시키는 것을 포함하는 것인, 레반의 제조방법
22 22
제18항에 있어서,상기 단계는 형질전환 미생물을 당밀을 포함하는 배지에서 발효시키는 것을 포함하는 것인, 레반의 제조방법
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
순번, 연구부처, 주관기관, 연구사업, 연구과제의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 국가R&D 연구정보 정보 표입니다.
순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 지식경제부 한국생명공학연구원 사업화연계기술개발사업(R&BD) 레반을 기질원료로하여 미네랄 흡수촉진기능을 강화시킨 DFA-IV(DifructoseAnhydride)의 생산 및 제품화를 위한 기술개발
2 미래창조과학부 한국생명공학연구원 주요사업(2015-2018) 바이오에너지 생산 원천기술 개발 및 산업화 사업
3 농림축산식품부 한국생명공학연구원 농림기술개발사업 비목재자원을 활용한 바이오신소재 개발:고온성 효모(KM) 세포공장 플랫폼 구축 및 그린바이오 신소재 생산기술 개발
4 미래창조과학부 한국생명공학연구원 협동연구개발사업(기초기술연구회) 팜 바이오디젤 생산 및 바이오화학 비료화기술개발