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서열번호 2로 이루어진 슈도모나스 플루오레슨스(Pseudomonas fluorescens)에서 분리된 ABC 트랜스포터(ABC transporter)의 tliDEF 유전자 및 서열번호 10으로 이루어진 아라자임(arazyme)을 코딩하는 유전자를 포함하는 재조합벡터
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제1항에 있어서,상기 아라자임은 글리신-리치 박스(Glycine-rich box(-G-G-X-G-X-D)), 암피필릭 알파-헬릭스(Amphiphilic α-helix) 및 익스트림 C-말단 모티프(extreme C-terminal motif)를 포함하는 카르복시 말단 신호서열을 가지는 것을 특징으로 하며,상기 글리신-리치 박스; 암피필릭 알파-헬릭스; 및 익스트림 C-말단 모티프는 각각(a) 서열번호 3에 기재된 아미노산 서열로 이루어진 단백질; 서열번호 4에 기재된 아미노산 서열로 이루어진 단백질; 및 서열번호 5에 기재된 아미노산 서열로 이루어진 단백질, 또는 (b) 서열번호 6에 기재된 염기 서열의 코딩 영역으로 이루어진핵산에 의해 코딩되는 단백질; 서열번호 7에 기재된 염기 서열의 코딩 영역으로 이루어진 핵산에 의해 코딩되는 단백질; 및 서열번호 8에 기재된 염기 서열의 코딩 영역으로 이루어진 핵산에 의해 코딩되는 단백질, 인 것을 특징으로 하는 재조합벡터
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제1항에 있어서,상기 아라자임은 세라티아 프로테아마큘런스(Serratia proteamaculans) HY-3 또는 아라니콜라 프로테오리티쿠스 (Aranicola proteolyticus) HY-3의 배양액에서 분리된 것을 특징으로 하는 재조합 벡터
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제1항에 있어서,상기 재조합벡터는 pTliDEFSPP-519이며, 도 2의 pTliDEFSPP-519 개열지도를 가지는 것을 특징으로 하는 재조합벡터
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제1항의 재조합 벡터로 형질전환된 재조합 균주
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제9항에 있어서,상기 균주는 슈도모나스 플루오레슨스(Pseudomonas fluorescens) SIK W1[pTliDEFSPP-519](KCTC18388P)인 것을 특징으로 하는 재조합 균주
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제9항의 재조합 균주를 배양하고, 배양물로부터 아라자임을 분리하는 단계를 포함하는 아라자임 생산방법
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하기 단계를 포함하는 아라자임 생산방법:S1) 벡터에 서열번호 2로 이루어진 슈도모나스 플루오레슨스(Pseudomonas fluorescens)에서 분리된 ABC 트랜스포터(ABC transporter) 의 tliDEF 유전자 및 서열번호 10으로 이루어진 아라자임(arazyme)을 코딩하는 유전자를 도입하여 재조합벡터를 제조하는 단계;S2) 상기 재조합벡터를 숙주에 형질전환하여 슈도모나스 플루오레슨스(Pseudomonas fluorescens) SIK W1[pTliDEFSPP-519](KCTC18388P)인 재조합균주를 제조하는 단계;S3) 상기 슈도모나스 플루오레슨스(Pseudomonas fluorescens) SIK W1[pTliDEFSPP-519](KCTC18388P)를 배지 내에서 배양하여 아라자임의 세포 외 분비를 유도하는 단계; 및S4) 상기 슈도모나스 플루오레슨스(Pseudomonas fluorescens) SIK W1[pTliDEFSPP-519](KCTC18388P)의 배양액으로부터 아라자임을 회수하는 단계
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제14항에 있어서,상기 S3) 단계의 배지는 1~3 중량%의 이스트 추출물(yeast extract), 0
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제14항에 있어서,상기 S3) 단계의 배양은 배치(batch) 발효를 포함하여 수행하는 것을 특징으로 하는 아라자임 생산방법
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제14항에 있어서,상기 재조합 균주는 전체 배양액을 기준으로 10 U/ml 이상의 프로테아제 활성을 보이는 것을 특징으로 하는 아라자임 생산방법
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